PI-03. Реконституция ЦМВ-специфического Т-клеточного иммунитета у пациентов после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток
Анна А. Дмитрова, Михаил Ю. Дроков, Лариса А. Кузьмина, Мурад С. Вагида, Дмитрий О. Кирюхин, Вера А. Васильева, Наталья Н. Попова, Екатерина Д. Михальцова, Мария В. Довыденко, Ольга М. Королева, Дарья С. Дубняк, Зоя В. Конова, Мобил И. Ахмедов, Наталия М. Никифорова, Ульяна В. Масликова, Ольга С. Старикова, Феруза А. Омарова, Эльмира И. Кольгаева, Григорий А. Ефимов, Елена Н. Паровичникова, Валерий Г. Савченко
Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия
Резюме
Введение
Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВ-инфекция) остается одним из наиболее часто встречаемых осложнений у пациентов после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК). Несмотря на возможности фармакотерапии, крайне актуальными остаются вопросы токсичности, высокой стоимости, а также для ряда стран доступности современных препаратов, направленных на ЦМВ-инфекцию. Ведущая роль в борьбе с ЦМВ-инфекцией принадлежит Т-клеткам. На реконституцию Т-клеточного звена иммунитета влияют множество факторов: вид кондиционирования, источник стволовых клеток, режим профилактики реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). В настоящей работе нами показана динамика количественного восстановления ЦМВ-специфичного Т-клеточного иммунитета у пациентов с гемобластозами и неопухолевыми заболеваниями системы крови на разных сроках после алло-ТГСК в зависимости от режима профилактики РТПХ.
Материалы и методы
Детальные характеристики пациентов представлены в таблице 1. Образцы крови пациентов исследовали на +30, +90, +180 дни после алло-ТГСК. ЦМВ-специфичные Т-лимфоциты идентифицировали методом проточной цитометрии, используя конъюгированные с флюорохромом моноклональные антитела против молекул CD3, CD8 и CD45, реагент для определения жизнеспособности, а также тетрамеры, состоящие из мономеров MHC класса I, связанных с одним из иммунодоминантных эпитопов вирусного белка pp65: пептиды NLVPMVATV (NLV), TPRVTGGGAM (TPR), RPHERNGFTVL (RPH), представленные на аллелях HLA-A*02 и -B*07 в комплексе со стрептавидином, меченым фикоэритрином. Далее для расчета абсолютного числа клеток применялся двухплатформенный метод. Общее число лейкоцитов оценивалось на гематологическом анализаторе Sysmex X-2100, что в дальнейшем было использовано для расчета абсолютного числа ЦМВ-специфичных клеток.
Результаты
Наиболее быстрое восстановление абсолютного числа ЦМВ-специфичных клеток было отмечено при включении антитимоцитарного глобулина (АТГ) в режим профилактики РТПХ. При использовании Т-клеточной деплеции (ТКД) и посттрансплантационного циклофосфамида (ПТ-ЦФ) в качестве профилактики РТПХ количество ЦМВ-специфичных клеток было значимо ниже и сохранялось на таком значении до +180 дня после алло-ТГСК.
Заключение
Режимы профилактики РТПХ, включающие ПТ-ЦФ, а также ТКД, обладают более «агрессивным» действием на реконституцию ЦМВ-специфического иммунитета, в том числе и в более поздние сроки после алло-ТГСК. Таким образом именно эти категории пациентов, могут являться целевой группой для применения у них таких клеточных технологий, как реинфузия CD45RA- донорских лимфоцитов, а также ЦМВ-специфичных Т-лимфоцитов донора.
Ключевые слова
Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, цитомегаловирусная инфекция, ЦМВ-специфичные Т-лимфоциты, иммуносупрессивная терапия, реакция «трансплантат против хозяина».
