PI-04. Терапия и профилактика цитомегаловирусной инфекции у посттрансплантационных больных с помощью специфичных Т-лимфоцитов

Резюме

Введение

Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) в раннем периоде после трансплантации аллогенной гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) остается существенной причиной неприживления трансплантата и смертности больных. К группе высокого риска развития ЦМВИ относятся больные с частичной HLA-несовместимостью с донором, а также получившие трансплантат от гаплоидентичного донора. При этом в крови здоровых носителей хронической ЦМВИ содержатся вирус-специфичные Т-лимфоциты, эффективно контролирующие репликацию вируса. У части здоровых доноров число этих клеток достигает нескольких процентов, что делает их привлекательными источниками Т-лимфоцитов для адоптивной терапии. Наши исследования показали, что наличие у донора одного из аллелей HLA I класса, способного презентировать известные иммунодоминантные эпитопы из белка pp65 ЦМВ (HLA-A*02:01 и HLA-B*07:02) приводит к тому, что иммунный ответ цитотоксических лимфоцитов на pp65 фокусируется на один (для HLA-A*02:01) или два (для HLA-B*07:02) эпитопа. Соответственно, при выборе донора для адоптивной терапии необходимо избегать несоответствия между донором и пациентом по этим аллелям.

Материалы и методы

В рамках проводимых в НМИЦ гематологии клинических апробаций методов терапии и профилактики ЦМВИ с помощью введения специфичных лимфоцитов нами были получены аллогенные Т-лимфоциты для шести пациентов, перенесших алло-ТГСК. Критерием отбора доноров являлся высокий уровень Т-клеточного ответа на ЦМВ (>100 клеток на 10⁵ лейкоцитов), определяемый методом ELISpot). Инфузия лимфоцитов была проведена на 30 день после алло-ТГСК для четырех пациентов в качестве профилактики ЦМВИ, а двум – в качестве терапии. Для четырех пациентов источником крови являлся родственный донор стволовых клеток крови, для двух – сторонний донор.

Результаты

Наблюдалась существенная разница как в объеме полученных клеток: от 105 до 107 мононуклеаров, так и в их субпопуляционном составе. При этом количество антиген-специфичных цитотоксических лимфоцитов в клеточном продукте зависело от наличия у донора HLA аллелей, способных презентировать описанные ранее иммунодоминантные эпитопы. Все пациенты перенесли введение клеток удовлетворительно, не было зафиксировано ни одного случая РТПХ, что позволяет говорить о высокой безопасности метода. Для оценки эффективности необходимо расширение выборки больных, но на момент подачи постера ни один их профилактических пациентов не развил ЦМВИ, а обоих пациента с предшествующей виремией, не определялись вирусные титры.

Заключение

В случае использования Т-лимфоцитов от стороннего донора косвенным подтверждением эффективности метода может являться прослеживание отдельных клонов. Для этого были получены образцы лимфоцитов из донорского лейкофереза, клеточного продукта и от пациентов в различные сроки до и после введения ЦМВ-специфичных лимфоцитов. Высокопроизводительное секвенирование репертуаров рецептора Т-лимфоцитов позволит проследить судьбу отдельных клонов после адоптивной Т-клеточной терапии.

Ключевые слова

Цитомегаловирус, трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, клеточная терапия.