Отсроченное восстановление гемо- и иммунопоэза после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток при смешанном химеризме у детей с апластической анемией с миелопролиферативными заболеваниями и миелодиспластическим синдромом

Резюме

Введение

Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК) является эффективным методом лечения пациентов с апластической анемией (АА). Исследование химеризма позволяет определить приживление донорских клеток после аллоТГСК. Тогда как при АА стабильный смешанный химеризм (СХ) считается благоприятным исходом с низкой частотой развития реакции «трансплантат-против-хозяина» (РТПХ), вос становление кроветворения в зависимости от уровня химеризма не изучено. Целью работы было сравнение гематологического и иммунологического восстановления при СХ и полном донорском химеризме (ПДХ) у пациентов с АА после аллоТГСК.

Пациенты и методы

В исследование включено 16 RIC-ТГСК, проведенных у пациентов 1-19 (медиана 11) лет с АА (11 с тяжелой АА, 2 с анемией Фанкони, 2 с анемией Блекфана–Даймонда, 1 с врожденной амегакариоцитарной тромбоцитопенией II типа). На +30, +45, +60, +80, +100, +140,+180, +245, +365 дни после аллоТГСК проводились стандартная иммунограмма и анализ химеризма методом мультиплексной ПЦР маркеров STR в периферической крови (ПК) и/или костном мозге (КМ). Если уровень химеризма был 97-100%, результат подтверждался более чувствительным методом ПЦР в реальном времени InDel полиморфизмов.

Результаты

В течение первого года после аллоТГСК у 9 пациентов был ПДХ (98-100%) и у 7 – СХ (5-98%). ПДХ по сравнению со СХ был ассоциирован с более ранним восстановлением всех трех ростков кроветворения и более ранней независимостью от трансфузий эритро- (р=0.013) и тромбомассы (р=0.014). В КМ у пациентов с ПДХ на +30 день был выше уровень миелокариоцитов (размер эффекта (РЭ) 84,6(21,1-148,1)*109/l, p=0.011) и ядросодержащих клеток эритроидной линии (РЭ 35.8(10.1- 61.5)*109/l, р=0.008), а также на +375 день больше мегакариоцитов (РЭ 0.03(0.002-0.057)*109/l, р=0.037). В течение первого года после аллоТГСК у пациентов с ПДХ был выше средний уровень лейкоцитов (РЭ 2.5(1.4-3.7)*109/l, p=0.004), нейтрофилов (РЭ 1.73(1.0-2.4)*109/l, p=0.0001), моноцитов (РЭ 0.15(0.05-0.24)*109/l, p=0.007). Уровень лейкоцитов выше нижней границы нормы достигался уже с +30 дня в группе с ПДХ по сравнению с +365 днем в группе со СХ, а лимфоцитов – на +245 день и на +365 день соответственно. При ПДХ был выше средний уровень лимфоцитов (на +245 день РЭ 1.1(0.5- 1.7)*109/l, p=0.0009; на +375 день РЭ 0.97 (0.4-1.6)*109/l,р=0.0012), в том числе В-лимфоцитов (на +245 день РЕ 0.27(0.11-0.42)*109/l, p=0.0011; на +375 день РЭ 0.25(0.11- 0.38)*109/l, р=0.0003), Т-лимфоцитов (на +245 день РЭ 1.2(0.5-1.8)*109/l, p=0.0008; на +375 день РЭ 0.6(0.03- 1.1)*109/l, р=0.04), CD8+ Т-лимфоцитов (на +245 день РЭ 1(0.5-1.4)*109/l, p=0.0001; на +375 день РЭ 0.5(0.1-0.8)*109/l, р=0.017). Восстановление CD4+ Т-лимфоцитов, ЕК и ЕКТ-клеток не различалось в группах. В противоположность, на +45 день уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+HLA-DR+) был выше в группе со СХ (РЭ 0.31(0.04-0.59)*109/l, p=0.03), затем он снизился у пациентов со СХ, и на +245 день уровень активированных Т-лимфоцитов был выше в группе с ПДХ (РЭ 0.56(0.2-0.9)*109/l, p=0.0023). В группе с ПДХ рост количества активированных Т-лимфоцитов происходил постепенно и достигал нормы приблизительно на +60 день. В группе со СХ количество активированных Т-лимфоцитов находилось в пределах нормы с +30 до +365 дня, однако отмечался быстрый рост количества активированных Т-лимфоцитов на +45 день по сравнению с +30 днем (p=0.031), а затем к +80 дню происходило их снижение. Кроме того, мы наблюдали долительное персистирование СХ в Т-клетках, тогда как другие субпопуляции были ПДХ. Вероятно, остаточные Т-клетки реципиента активируются в ответ на аллоантигены после ТГСК, что может приводить к отсроченному восстановлению гемо- и иммунопоэза.

Заключение

СХ у пациентов с АА после аллоТГСК ассоциирован с отсроченным гематологическим и иммунологическим восстановлением и длительной зависимостью от гемотрансфузий.

Ключевые слова