ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Исследование клональных плазматических клеток костного мозга у пациентов множественной миеломой методом проточной цитофлюориметрии: анализ первых результатов

Светлана А. Сизикова, Наталья В. Пронкина, Егор В. Баторов, Дарья С. Баторова, Галина Ю. Ушакова, Вера В. Сергеевичева, Андрей В. Гилевич, Ирина В. Крючкова
Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии ФАНО РФ, Новосибирск, Российсская Федерация

Резюме

Введение

Множественная миелома (ММ) – злокачественное заболевание, характеризующееся клональной пролиферацией в костном мозге аномальных плазматических клеток (ПК), которые секретируют моноклональный протеин (M-протеин) в форме иммуноглобулинов или моноклональных κ- и λ- свободных легких цепей. Высокодозная химиотерапия с последующей аутологичной трансплантацией стволовых клеток (ТСКК) используется для лечения молодых пациентов с ММ и обеспечивает высокий уровень полных ремиссий (ПР). Исследования последних лет с новыми лекарственными препаратами также приводят к высоким показателям ПР даже среди возрастных пациентов и пациентов с факторами риска рецидивирующего/рефрактерного течения ММ. Однако у большинства из них в дальнейшем наблюдается рецидив заболевания, что связано с сохранением остаточных опухолевых клеток, известных как минимальная остаточная болезнь (МОБ).
Цель работы состояла в том, чтобы с помощью мультипараметрической проточной цитофлюориметрии оценить количество аномальных ПК костного мозга у пациентов с ММ, которые достигли частичного или полного ответа, а также были резистентны к химиотерапии, включая высокодозную ХТ с аутологичной ТСКК, провести оценку качества ремиссии, исследовать взаимосвязь между количеством аномальных ПК костного мозга и другими признаками активности ММ.

Пациенты и методы

С ноября 2014 по февраль 2017 в исследование включен 51 пациент MM, средний возраст – 54 года (36-70 лет). Согласно классификации Durie-Salmon подавляющее
большинство пациентов (n=40) имели III стадию болезни, 8 – II и 2 – I. Ответ на лечение оценивали согласно национальным клиническим рекомендациям 2014 года. На момент исследования 20 пациентов были в ПР, 8 имели частичный ответ (ЧР) и 15 – резистентное заболевание, у 5 пациентов заболевание было впервые диагностировано, у 3 отмечен первый рецидив. Большинству пациентов была проведена высокодозная химиотерапия с аутологичной ТСКК (n=42). Исследование количества аномальных ПК костного мозга в динамике на фоне терапии удалось провести 36 пациентам в среднем через 3,1 месяца (1,9-5,7, мин-макс). Анализ проведен с помощью проточного цитометра FACSCantoII (BD) и программного обеспечения FACSDiva (BD). Прибор ежедневно калибровался с помощью калибровочных частиц (Cytometer Setup and Tracking from BD Biosciences). Для анализа использовались клетки костного мозга после предварительного поверхностного и внутриклеточного окрашивания моноклональными антителами: CD38/CD56/CD27/CD117/CD81/CD19/CD45/cytLambda/CD138/cytKappa. Чувствительность нашей панели составляет 0,01% (т.е. 10-4).

Результаты

Среди пациентов в ПР (n=20) МОБ не выявлялась у 6, 14 пациентов были МОБ положительные. Клональные ПК были обнаружены у всех пациентов с ЧР и резистентным течением заболевания (n=31). Относительное содержание клональных ПК у МОБ положительных пациентов с ПР (n=14) было значительно ниже, чем у пациентов с ЧР или резистентностью (n=31): 0,095% (0,026-0,271%) против 1,3% (0,203-5,9%), pU=0,000092. У пациентов с ЧР (n=8) было более низкое относительное содержание клональных ПК (как выраженная тенденция), чем у пациентов с резистентным заболеванием (n=15): 0,286% (0,177-1,129%) против 1,48% (0, 90-8,0%), pU=0,053. Кроме того, относительное содержание клональных ПК у пациентов с ЧР и резистентным течением (N=31) коррелировало с концентрацией M-протеина сыворотки (rs=0,42, p=0,019).

Заключение

В настоящее время мы можем заключить, что метод проточной цитофлюориметрии можно рассматривать как метод выбора для мониторинга МОБ у пациентов ММ. У пациентов с измеряемой болезнью количество клональных ПК коррелирует со статусом заболевания и уровнем М-протеина. При отсутствии M-протеина оценка количества клональных ПК в костном мозге свидетельствует о глубине и качестве ремиссии, определяет готовность пациента к ТПСКК, а также помогает регулировать продолжительность поддерживающей терапии.

Ключевые слова

Множественная миелома, проточная цитофлюориметрия, минимальная остаточная болезнь.

Том 6, Номер 3
27.09.2017 22:19:34

Загрузить версию в PDF

Возврат к списку