Исследование клональных плазматических клеток костного мозга у пациентов множественной миеломой методом проточной цитофлюориметрии: анализ первых результатов
Светлана А. Сизикова, Наталья В. Пронкина, Егор В. Баторов, Дарья С. Баторова, Галина Ю. Ушакова, Вера В. Сергеевичева, Андрей В. Гилевич, Ирина В. Крючкова
Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии ФАНО РФ, Новосибирск, Российсская Федерация
Резюме
Введение
Множественная миелома (ММ) – злокачественное заболевание, характеризующееся клональной пролиферацией в костном мозге аномальных плазматических клеток (ПК), которые секретируют моноклональный протеин (M-протеин) в форме иммуноглобулинов или моноклональных κ- и λ- свободных легких цепей. Высокодозная химиотерапия с последующей аутологичной трансплантацией стволовых клеток (ТСКК) используется для лечения молодых пациентов с ММ и обеспечивает высокий уровень полных ремиссий (ПР). Исследования последних лет с новыми лекарственными препаратами также приводят к высоким показателям ПР даже среди возрастных пациентов и пациентов с факторами риска рецидивирующего/рефрактерного течения ММ. Однако у большинства из них в дальнейшем наблюдается рецидив заболевания, что связано с сохранением остаточных опухолевых клеток, известных как минимальная остаточная болезнь (МОБ).Цель работы состояла в том, чтобы с помощью мультипараметрической проточной цитофлюориметрии оценить количество аномальных ПК костного мозга у пациентов с ММ, которые достигли частичного или полного ответа, а также были резистентны к химиотерапии, включая высокодозную ХТ с аутологичной ТСКК, провести оценку качества ремиссии, исследовать взаимосвязь между количеством аномальных ПК костного мозга и другими признаками активности ММ.
Пациенты и методы
С ноября 2014 по февраль 2017 в исследование включен 51 пациент MM, средний возраст – 54 года (36-70 лет). Согласно классификации Durie-Salmon подавляющеебольшинство пациентов (n=40) имели III стадию болезни, 8 – II и 2 – I. Ответ на лечение оценивали согласно национальным клиническим рекомендациям 2014 года. На момент исследования 20 пациентов были в ПР, 8 имели частичный ответ (ЧР) и 15 – резистентное заболевание, у 5 пациентов заболевание было впервые диагностировано, у 3 отмечен первый рецидив. Большинству пациентов была проведена высокодозная химиотерапия с аутологичной ТСКК (n=42). Исследование количества аномальных ПК костного мозга в динамике на фоне терапии удалось провести 36 пациентам в среднем через 3,1 месяца (1,9-5,7, мин-макс). Анализ проведен с помощью проточного цитометра FACSCantoII (BD) и программного обеспечения FACSDiva (BD). Прибор ежедневно калибровался с помощью калибровочных частиц (Cytometer Setup and Tracking from BD Biosciences). Для анализа использовались клетки костного мозга после предварительного поверхностного и внутриклеточного окрашивания моноклональными антителами: CD38/CD56/CD27/CD117/CD81/CD19/CD45/cytLambda/CD138/cytKappa. Чувствительность нашей панели составляет 0,01% (т.е. 10-4).