AL-03. Химеризм в периферической крови на +14 день после алло-ТГСК как предиктор неприживления трансплантата

Резюме

Первичная оценка молекулярного химеризма на +28 день после алло-ТГСК (аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток) значима для прогнозирования всех видов нарушения функции трансплантата. Неприживление трансплантата является основной причиной неудач при алло-ТГСК. Более ранний мониторинг химеризма может стать дополнительным инструментом для прогнозирования первичной несостоятельности трансплантата. Целью нашей работы была оценка значимости донорского химеризма на +14 день для прогнозирования неприживления трансплантата после алло-ТГСК у больных острыми лейкозами (ОЛ).

Материалы и методы

Для мониторинга химеризма использовали архивные образцы ДНК из клеток крови 64 пациентов, получивших алло-ТГСК в НМИЦ гематологии с 01.01.2020 по 27.06.2023. Пациенты были разделены на две группы. Критерии отбора пациентов первой группы: доступность архивного материала для проведения ретроспективного исследования химеризма, первая трансплантация от гаплоидентичного донора (≥2 отличий по системе HLA) или неродственного частично-совместимого, диагноз ОЛ, ремиссия на момент выполнения трансплантации, режим кондиционирования пониженной интенсивности – RIC. Медиана возраста пациентов составила 49 лет (26-63), 13 (59%) женщины и 9 (41%) мужчин. Отсутствием приживления к +28 дню считали: абсолютное число нейтрофилов менее 0,5×10⁹/л; гемоглобин менее 70 г/л; тромбоциты менее 20×10⁹/л; донорское кроветворение 0-5%; отсутствие рецидива заболевания. Критерии отбора группы сравнения были такие же, за исключением типа донора: родственный и неродственный полностью совместимый. Группа сравнения составила 22 пациента (медиана возраста пациентов составила 39 лет (19-59), 24 (54%) женщины и 18 (46%) мужчин.) Мониторинг химеризма осуществляли методом STR-ПЦР с использованием лиофилизированного мультиплексного набора CorDIS Plus (19 полиморфных STR-маркеров и локус X/Y амелогенина человека) с последующим разделением продуктов ПЦР методом капиллярного электрофореза. Химеризм рассчитывали на основе процентного содержания уникальных маркеров донора и реципиента в информативных локусах STR с использованием программного обеспечения GeneMapper v. 4-0.

Результаты

Было обнаружено, что в группе с частично совместимым донором уровень донорского химеризма в образцах ПК (периферической крови) на +14 день существенно ниже у пациентов, у которых на +28 день было констатировано неприживление трансплантата. Для пациентов с приживлением медиана показателей химеризма составила 87% (27-100%), без приживления 54% (0-90%), (p<0,0089). При проведении ROC-анализа исследовалась зависимость вероятностей ошибок классификации целевого признака (неприживление на +28 день) от уровня донорского химеризма на +14 день. Было показано, что донорский химеризм 25% и ниже в крови на 14 день может выступать хорошим предиктором неприживления (AUC=0,79; p=0,0034). В соответствии с выбранным пороговым уровнем донорского химеризма все пациенты были разделены на 2 группы (<25%, >25%). У пациентов с донорским химерзмом <25% неприживление констатировано в 100% случаев (3 из 3), а в группе с химеризмом больше 25% – неприживление констатировано в 15% (6 из 39). В группе сравнения с полностью совместимым донором выбранный порог в 25% не является значимым критерием для предиктивной оценки неприживления трансплантата.

Заключение

Уровень химеризма в ПК на + 14 день с высокой степенью достоверности предсказывает неприживление трансплантата на +28 день для пациентов с гаплоидентичным и неродственным частично-совместимым донором, при этом в когорте пациентов с полностью совместимым донором не является предиктором неприживления трансплантата.

Ключевые слова

Неприживление трансплантата, периферическая кровь, посттрансплантационный донорский химеризм, алло-ТГСК, STR-PCR.