CM-04. Возможности цитогенетического анализа клеток крови при диагностике миелофиброза
Ирина А. Петрова, Мария В. Латыпова, Татьяна Ю. Грачева, Анастасия А. Хабибуллина, Диана С. Ильясова, Мария Е. Власова, Татьяна Л. Гиндина
НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
Резюме
Миелофиброз (МФ) – ph-негативное миелопролиферативное заболевание, характеризующееся опухолевой пролиферацией гемопоэтических стволовых клеток и фиброзом костного мозга. Важную роль в развитии фиброза играют мегакариоциты, стимулирующие деятельность фибробластов. В 2013 году N. R. Singh с соавторами [Mol. Cytogenetics, 2013] предложили метод 48-часового культивирования клеток крови без стимулирования митогенами. Одной из важных находок были полиплоидные кариотипы, что предполагало наличие мегакариоцитарных клеток-предшественниц в крови и свидетельствовало о прогрессировании заболевания. Целью работы была оценка частоты встречаемости и характера хромосомных аберраций у пациентов с МФ, сопоставить результаты цитогенетического исследования клеток костного мозга и крови без стимулирования митогенами (после 24-часового и 48-часового культивирования соответственно).
Материалы и методы
В исследование включены 106 пациентов МФ, которые проходили обследование и лечение в клинике НИИ ДОГиТ им Р. М. Горбачевой с 2009 по 2021 год (63 женщины и 43 мужчины в возрасте от 26 до 83 лет с медианой 52 года). Стандартная цитогенетическая методика 24-часового культивирования клеток костного мозга проводилась у 39 пациентов, 48-часовое культивирование клеток периферической крови без стимуляторов роста – у 41 пациента, а комбинация методов – у 26 пациентов. Полученные препараты окрашивали методом GTG-бэндирования. Хромосомные аберрации описывались согласно критериям ISCN 2016.
Результаты
Из 106 обследованных пациентов у 41 (38,7%) – были обнаружены численные и структурные перестройки: полная или частичная моносомия хромосом 7, 11, 13, 20 у 9 (22%) пациентов, полная или частичная трисомия хромосом 1, 8, 9, 21 – у 15 (36,5%), одиночные структурные аномалии и комплексные перестройки (у 5 (12,2%) и 12 (29,3%) больных, соответственно). При кариотипировании клеток крови в 23 из 67 (34%) наблюдений были выявлены метафазы с тетра- и октаплоидным набором хромосом без структурных перестроек, а у 11 (16%) пациентов хромосомные аберрации встречались как в диплоидном, так и в тетраплоидном кариотипах. По системе оценок DIPSS plus пациенты с очень высоким, высоким, промежуточным и низким цитогенетическим риском составили 5,7%, 43,4%, 6,6% и 44,3% соответственно. Молекулярно-генетический анализ пациентов выявил мутации генов: JAK2 у 56,4 % пациентов, CALR – у 23,1 % и MPL – у 1,3% больных. При сравнении эффективности двух методов культивирования возможность обнаружить аномальный кариотип была выше при культивировании клеток крови (76%) по сравнению со стандартным культивированием клеток костного мозга (37%) (р=0,00001).
Заключение
Исследование показало, что метод культивирования клеток крови у пациентов с миелофиброзом более доступен и информативен, так как позволяет выявить полиплоидные мегакариоцитарные предшественники и тем самым определить продвинутую стадию заболевания.
Ключевые слова
Миелофиброз, 48-часовые культуры клеток крови, цитогенетика, полиплоидный кариотип.
