ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация
Изменить отображение страницы на: только анонсы
array(15) { [0]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2025" ["~ID"]=> string(4) "2025" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["~NAME"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:10:53" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:10:53" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(231) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(231) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(3) "110" ["~SORT"]=> string(3) "110" ["CODE"]=> string(94) "gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh" ["~CODE"]=> string(94) "gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2025" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2025" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(238) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослыхGC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(5764) "<p style="text-align: justify;">Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м<sup>2</sup>/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.</p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(98) "gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh-img" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(161) "GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(98) "gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh-img" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(98) "gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh-img" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(98) "gc-11-oslozhneniya-posle-terapii-t-limfotsitami-s-khimernym-antigennym-retseptorom-u-vzroslykh-img" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28254" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(298) "<p>Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(286) "

Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28255" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(163) "<p>Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(151) "

Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28256" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5764) "<p style="text-align: justify;">Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м<sup>2</sup>/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5591) "

Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.

Материалы и методы

В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.

Результаты

СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м2/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.

Выводы

В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения.

Ключевые слова

CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28257" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28258" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(184) "<p>Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(172) "

Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28259" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(233) "<p>National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(185) "

National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia


Correspondence:
Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28260" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3824) "<p style="text-align: justify;"> Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever &gt;39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m<sup>2</sup>/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%. </p> <h3>Reference</h3> <p style="text-align: justify;"> Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: <a target="_blank" href="https://doi.org/10.1016/j.bbmt.2018.12.758"><u>10.1016/j.bbmt.2018.12.758</u></a> </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3572) "

Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients.

Materials and methods

The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded.

Results

CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever >39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m2/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%.

Conclusions

The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%.

Reference

Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: 10.1016/j.bbmt.2018.12.758

Keywords

CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28261" ["VALUE"]=> string(77) "GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(77) "GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28262" ["VALUE"]=> string(4) "2647" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2647" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28263" ["VALUE"]=> string(4) "2648" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2648" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28258" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(184) "<p>Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(172) "

Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(172) "

Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28260" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3824) "<p style="text-align: justify;"> Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever &gt;39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m<sup>2</sup>/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%. </p> <h3>Reference</h3> <p style="text-align: justify;"> Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: <a target="_blank" href="https://doi.org/10.1016/j.bbmt.2018.12.758"><u>10.1016/j.bbmt.2018.12.758</u></a> </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3572) "

Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients.

Materials and methods

The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded.

Results

CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever >39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m2/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%.

Conclusions

The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%.

Reference

Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: 10.1016/j.bbmt.2018.12.758

Keywords

CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3572) "

Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients.

Materials and methods

The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded.

Results

CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever >39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m2/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%.

Conclusions

The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%.

Reference

Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: 10.1016/j.bbmt.2018.12.758

Keywords

CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28257" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28261" ["VALUE"]=> string(77) "GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(77) "GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(77) "GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28259" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(233) "<p>National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(185) "

National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia


Correspondence:
Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(185) "

National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia


Correspondence:
Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28254" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(298) "<p>Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(286) "

Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(286) "

Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28256" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5764) "<p style="text-align: justify;">Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м<sup>2</sup>/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5591) "

Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.

Материалы и методы

В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.

Результаты

СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м2/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.

Выводы

В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения.

Ключевые слова

CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(5591) "

Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.

Материалы и методы

В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.

Результаты

СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м2/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.

Выводы

В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения.

Ключевые слова

CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28255" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(163) "<p>Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(151) "

Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(151) "

Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия

" } } } [1]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2024" ["~ID"]=> string(4) "2024" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["~NAME"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:01:51" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:01:51" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(3) "100" ["~SORT"]=> string(3) "100" ["CODE"]=> string(100) "gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe" ["~CODE"]=> string(100) "gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2024" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2024" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(350) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушенийGC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders " ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(5101) "<p style="text-align: justify;">В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.</p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;">Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.</p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(222) "GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-10-bioinformaticheskiy-analiz-onkogena-rad54l-dlya-vyyavleniya-vliyaniya-na-vozniknovenie-gemopoe" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28244" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(338) "<p>Богдан О. Щеглов                                                </p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(326) "

Богдан О. Щеглов                                                

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28245" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(162) "<p>Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(150) "

Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28249" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5101) "<p style="text-align: justify;">В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.</p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;">Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4943) "

В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.

Материалы и методы

Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле.

Результаты

Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.

Заключение

Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека.

Ключевые слова

Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28246" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28250" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(416) "<p>Bogdan O. Shcheglov                                                               </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(404) "

Bogdan O. Shcheglov                                                               

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28251" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(241) "<p>School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(193) "

School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia


Correspondence:
Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28252" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2962) "<p style="text-align: justify;">A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;">Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2804) "

A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.

Materials and methods

Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.

Results

The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database.

Conclusions

Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.

Keywords

Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28247" ["VALUE"]=> string(128) "GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(128) "GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28248" ["VALUE"]=> string(4) "2645" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2645" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28253" ["VALUE"]=> string(4) "2646" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2646" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28250" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(416) "<p>Bogdan O. Shcheglov                                                               </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(404) "

Bogdan O. Shcheglov                                                               

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(404) "

Bogdan O. Shcheglov                                                               

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28252" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2962) "<p style="text-align: justify;">A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;">Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2804) "

A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.

Materials and methods

Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.

Results

The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database.

Conclusions

Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.

Keywords

Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(2804) "

A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.

Materials and methods

Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.

Results

The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database.

Conclusions

Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.

Keywords

Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28246" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28247" ["VALUE"]=> string(128) "GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(128) "GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(128) "GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders " } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28251" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(241) "<p>School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(193) "

School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia


Correspondence:
Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(193) "

School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia


Correspondence:
Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28244" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(338) "<p>Богдан О. Щеглов                                                </p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(326) "

Богдан О. Щеглов                                                

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(326) "

Богдан О. Щеглов                                                

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28249" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5101) "<p style="text-align: justify;">В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.</p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;">Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4943) "

В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.

Материалы и методы

Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле.

Результаты

Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.

Заключение

Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека.

Ключевые слова

Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4943) "

В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.

Материалы и методы

Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле.

Результаты

Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.

Заключение

Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека.

Ключевые слова

Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28245" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(162) "<p>Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(150) "

Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(150) "

Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия

" } } } [2]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2026" ["~ID"]=> string(4) "2026" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["~NAME"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:24:44" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:24:44" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(3) "120" ["~SORT"]=> string(3) "120" ["CODE"]=> string(100) "gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-" ["~CODE"]=> string(100) "gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2026" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2026" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(559) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антителGC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies " ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(7099) "<p style="text-align: justify;">Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*10<sup>6</sup> клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов). </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Титр лентивируса составил 8×10<sup>4</sup>/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).</p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;">Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы <i>in vitro</i>, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.</p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(382) "GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-12-kombiniruya-car-t-i-bispetsificheskie-antitela-novyy-dizayn-khimernogo-antigennogo-retseptora-" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28264" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(779) "<p>Даниил И. Шмидт<sup>1</sup>, Иван Н. Гапоненко<sup>1</sup>, Никита Д. Ёлшин<sup>2</sup>, Ольга С. Епифановская<sup>1</sup>, Татьяна Н. Беловежец<sup>3</sup>, Андрей А. Горчаков<sup>3</sup>, Сергей В. Кулемзин<sup>3</sup>, Андрей М. Чекалов<sup>1</sup>, Елена В. Бабенко<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1</sup>, Владислав С. Сергеев<sup>1</sup>, Кирилл В. Лепик<sup>1</sup>, Александр Д. Кулагин<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(611) "

Даниил И. Шмидт1, Иван Н. Гапоненко1, Никита Д. Ёлшин2, Ольга С. Епифановская1, Татьяна Н. Беловежец3, Андрей А. Горчаков3, Сергей В. Кулемзин3, Андрей М. Чекалов1, Елена В. Бабенко1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Кирилл В. Лепик1, Александр Д. Кулагин1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28265" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(690) "<p><sup>1</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(630) "

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия
3 Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28266" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(7099) "<p style="text-align: justify;">Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*10<sup>6</sup> клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов). </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Титр лентивируса составил 8×10<sup>4</sup>/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).</p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;">Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы <i>in vitro</i>, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6905) "

Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].

Материалы и методы

кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*106 клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов).

Результаты

Титр лентивируса составил 8×104/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).

Вывод

Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы in vitro, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.

Ключевые слова

CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28267" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28268" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(594) "<p>Daniil I. Shmidt<sup>1</sup>, Ivan N. Gaponenko<sup>1</sup>, Nikita D. Yolshin<sup>2</sup>, Olga S. Epifanovskaya<sup>1</sup>, Tatyana N. Belovezhets<sup>3</sup>, Andrey A. Gorchakov<sup>3</sup>, Sergey V. Kulemzin<sup>3</sup>, Andrey M. Chekalov<sup>1</sup>, Elena V. Babenko<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1</sup>, Vladislav S. Sergeev<sup>1</sup>, Kirill V. Lepik<sup>1</sup>, Alexander D. Kulagin<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(426) "

Daniil I. Shmidt1, Ivan N. Gaponenko1, Nikita D. Yolshin2, Olga S. Epifanovskaya1, Tatyana N. Belovezhets3, Andrey A. Gorchakov3, Sergey V. Kulemzin3, Andrey M. Chekalov1, Elena V. Babenko1, Albert R. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, Kirill V. Lepik1, Alexander D. Kulagin1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28269" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(480) "<p><sup>1</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(384) "

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia
3 Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28270" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5174) "<p style="text-align: justify;">Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*10<sup>6</sup> cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×10<sup>4</sup>/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% <i>vs</i> 59%) and 10 pM/L (96% <i>vs</i> 74%).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells <i>in vitro</i>. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.</p> <h3>References</h3> <p style="text-align: justify;">1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.</p> <p style="text-align: justify;">2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.</p> <p style="text-align: justify;">3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.</p> <p style="text-align: justify;">4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4890) "

Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].

Materials and methods

cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*106 cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×104/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% vs 59%) and 10 pM/L (96% vs 74%).

Conclusion

Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells in vitro. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.

References

1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.

2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.

3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.

4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.

Keywords

CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28271" ["VALUE"]=> string(177) "GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(177) "GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28272" ["VALUE"]=> string(4) "2649" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2649" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28273" ["VALUE"]=> string(4) "2650" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2650" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28268" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(594) "<p>Daniil I. Shmidt<sup>1</sup>, Ivan N. Gaponenko<sup>1</sup>, Nikita D. Yolshin<sup>2</sup>, Olga S. Epifanovskaya<sup>1</sup>, Tatyana N. Belovezhets<sup>3</sup>, Andrey A. Gorchakov<sup>3</sup>, Sergey V. Kulemzin<sup>3</sup>, Andrey M. Chekalov<sup>1</sup>, Elena V. Babenko<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1</sup>, Vladislav S. Sergeev<sup>1</sup>, Kirill V. Lepik<sup>1</sup>, Alexander D. Kulagin<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(426) "

Daniil I. Shmidt1, Ivan N. Gaponenko1, Nikita D. Yolshin2, Olga S. Epifanovskaya1, Tatyana N. Belovezhets3, Andrey A. Gorchakov3, Sergey V. Kulemzin3, Andrey M. Chekalov1, Elena V. Babenko1, Albert R. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, Kirill V. Lepik1, Alexander D. Kulagin1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(426) "

Daniil I. Shmidt1, Ivan N. Gaponenko1, Nikita D. Yolshin2, Olga S. Epifanovskaya1, Tatyana N. Belovezhets3, Andrey A. Gorchakov3, Sergey V. Kulemzin3, Andrey M. Chekalov1, Elena V. Babenko1, Albert R. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, Kirill V. Lepik1, Alexander D. Kulagin1

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28270" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5174) "<p style="text-align: justify;">Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*10<sup>6</sup> cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×10<sup>4</sup>/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% <i>vs</i> 59%) and 10 pM/L (96% <i>vs</i> 74%).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells <i>in vitro</i>. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.</p> <h3>References</h3> <p style="text-align: justify;">1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.</p> <p style="text-align: justify;">2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.</p> <p style="text-align: justify;">3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.</p> <p style="text-align: justify;">4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4890) "

Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].

Materials and methods

cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*106 cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×104/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% vs 59%) and 10 pM/L (96% vs 74%).

Conclusion

Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells in vitro. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.

References

1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.

2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.

3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.

4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.

Keywords

CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4890) "

Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].

Materials and methods

cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*106 cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×104/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% vs 59%) and 10 pM/L (96% vs 74%).

Conclusion

Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells in vitro. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.

References

1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.

2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.

3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.

4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.

Keywords

CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28267" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28271" ["VALUE"]=> string(177) "GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(177) "GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(177) "GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies " } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28269" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(480) "<p><sup>1</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(384) "

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia
3 Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(384) "

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia
3 Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28264" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(779) "<p>Даниил И. Шмидт<sup>1</sup>, Иван Н. Гапоненко<sup>1</sup>, Никита Д. Ёлшин<sup>2</sup>, Ольга С. Епифановская<sup>1</sup>, Татьяна Н. Беловежец<sup>3</sup>, Андрей А. Горчаков<sup>3</sup>, Сергей В. Кулемзин<sup>3</sup>, Андрей М. Чекалов<sup>1</sup>, Елена В. Бабенко<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1</sup>, Владислав С. Сергеев<sup>1</sup>, Кирилл В. Лепик<sup>1</sup>, Александр Д. Кулагин<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(611) "

Даниил И. Шмидт1, Иван Н. Гапоненко1, Никита Д. Ёлшин2, Ольга С. Епифановская1, Татьяна Н. Беловежец3, Андрей А. Горчаков3, Сергей В. Кулемзин3, Андрей М. Чекалов1, Елена В. Бабенко1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Кирилл В. Лепик1, Александр Д. Кулагин1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(611) "

Даниил И. Шмидт1, Иван Н. Гапоненко1, Никита Д. Ёлшин2, Ольга С. Епифановская1, Татьяна Н. Беловежец3, Андрей А. Горчаков3, Сергей В. Кулемзин3, Андрей М. Чекалов1, Елена В. Бабенко1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Кирилл В. Лепик1, Александр Д. Кулагин1

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28266" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(7099) "<p style="text-align: justify;">Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*10<sup>6</sup> клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов). </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Титр лентивируса составил 8×10<sup>4</sup>/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).</p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;">Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы <i>in vitro</i>, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6905) "

Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].

Материалы и методы

кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*106 клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов).

Результаты

Титр лентивируса составил 8×104/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).

Вывод

Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы in vitro, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.

Ключевые слова

CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(6905) "

Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].

Материалы и методы

кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*106 клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов).

Результаты

Титр лентивируса составил 8×104/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).

Вывод

Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы in vitro, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.

Ключевые слова

CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28265" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(690) "<p><sup>1</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(630) "

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия
3 Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(630) "

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия
3 Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия

" } } } [3]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2027" ["~ID"]=> string(4) "2027" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["~NAME"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:30:38" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:30:38" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(3) "130" ["~SORT"]=> string(3) "130" ["CODE"]=> string(100) "gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom" ["~CODE"]=> string(100) "gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2027" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2027" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(307) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клетокGC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(6279) "<p style="text-align: justify;"> Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p&lt;0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p&lt;0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p&lt;0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO). </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(199) "GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-13-sravnitelnaya-otsenka-usloviy-kriokonservatsii-kletochnykh-kultur-k562-i-mezenkhimalnykh-strom" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28274" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(265) "<p>Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(253) "

Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28275" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(358) "<p>НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(346) "

НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28276" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6279) "<p style="text-align: justify;"> Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p&lt;0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p&lt;0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p&lt;0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO). </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6109) "

Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток.

Материалы и методы

Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни.

Результаты

При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p<0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p<0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p<0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO).

Вывод

Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур.

Ключевые слова

Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28277" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28278" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(159) "<p>Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(147) "

Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28279" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(223) "<p>RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(175) "

RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28280" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3661) "<p style="text-align: justify;">Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3494) "

Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.

Materials and methods

The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.

Results

Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).

Conclusion

The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures.

Keywords

Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28281" ["VALUE"]=> string(108) "GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(108) "GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28282" ["VALUE"]=> string(4) "2651" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2651" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28283" ["VALUE"]=> string(4) "2652" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2652" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28278" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(159) "<p>Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(147) "

Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(147) "

Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28280" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3661) "<p style="text-align: justify;">Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3494) "

Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.

Materials and methods

The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.

Results

Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).

Conclusion

The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures.

Keywords

Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3494) "

Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.

Materials and methods

The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.

Results

Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).

Conclusion

The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures.

Keywords

Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28277" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28281" ["VALUE"]=> string(108) "GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(108) "GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(108) "GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28279" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(223) "<p>RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(175) "

RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(175) "

RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28274" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(265) "<p>Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(253) "

Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(253) "

Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28276" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6279) "<p style="text-align: justify;"> Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p&lt;0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p&lt;0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p&lt;0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO). </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6109) "

Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток.

Материалы и методы

Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни.

Результаты

При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p<0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p<0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p<0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO).

Вывод

Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур.

Ключевые слова

Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(6109) "

Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток.

Материалы и методы

Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни.

Результаты

При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p<0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p<0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p<0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO).

Вывод

Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур.

Ключевые слова

Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28275" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(358) "<p>НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(346) "

НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(346) "

НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [4]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2029" ["~ID"]=> string(4) "2029" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["~NAME"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:49:58" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:49:58" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(3) "150" ["~SORT"]=> string(3) "150" ["CODE"]=> string(100) "gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra" ["~CODE"]=> string(100) "gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2029" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2029" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(389) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкцийGC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material " ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(4424) "<p style="text-align: justify;">Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась <i>in vitro</i> на клетках СТ-26.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.</p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(257) "GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-15-izuchenie-svoystv-polimernykh-mikrokapsul-sintezirovannykh-s-pomoshchyu-metoda-myagkoy-litogra" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28294" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(314) "<p>Анастасия А. Якубова<sup>1,2</sup>, Павел М. Тальянов<sup>3</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(242) "

Анастасия А. Якубова1,2, Павел М. Тальянов3, Михаил В. Зюзин3, Альберт Р. Муслимов1,2, Александр С. Тимин1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28295" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(804) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(744) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия
3 Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28296" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4424) "<p style="text-align: justify;">Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась <i>in vitro</i> на клетках СТ-26.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4217) "

Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.

Материалы и методы

Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась in vitro на клетках СТ-26.

Результаты

Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).

Выводы

Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).

Ключевые слова

Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28297" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28298" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(243) "<p>Anastasia A. Yakubova<sup>1,2</sup>, Pavel M. Talianov<sup>3</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup> </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(171) "

Anastasia A. Yakubova1,2, Pavel M. Talianov3, Mikhail V. Zyuzin3, Albert R. Muslimov1,2, Alexander S. Timin1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28299" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(587) "<p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(491) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
3 School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28300" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2252) "<p style="text-align: justify;">For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.</p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;">Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2094) "

For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.

Materials and methods

Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.

Results

Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.

Conclusions

Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.

Keywords

Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28301" ["VALUE"]=> string(132) "GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(132) "GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> &array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28302" ["VALUE"]=> string(4) "2656" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2656" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28303" ["VALUE"]=> string(4) "2657" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2657" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28298" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(243) "<p>Anastasia A. Yakubova<sup>1,2</sup>, Pavel M. Talianov<sup>3</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup> </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(171) "

Anastasia A. Yakubova1,2, Pavel M. Talianov3, Mikhail V. Zyuzin3, Albert R. Muslimov1,2, Alexander S. Timin1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(171) "

Anastasia A. Yakubova1,2, Pavel M. Talianov3, Mikhail V. Zyuzin3, Albert R. Muslimov1,2, Alexander S. Timin1

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28300" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2252) "<p style="text-align: justify;">For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.</p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;">Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2094) "

For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.

Materials and methods

Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.

Results

Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.

Conclusions

Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.

Keywords

Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(2094) "

For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.

Materials and methods

Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.

Results

Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.

Conclusions

Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.

Keywords

Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28297" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28301" ["VALUE"]=> string(132) "GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(132) "GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(132) "GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material " } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28299" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(587) "<p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(491) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
3 School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(491) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
3 School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28294" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(314) "<p>Анастасия А. Якубова<sup>1,2</sup>, Павел М. Тальянов<sup>3</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(242) "

Анастасия А. Якубова1,2, Павел М. Тальянов3, Михаил В. Зюзин3, Альберт Р. Муслимов1,2, Александр С. Тимин1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(242) "

Анастасия А. Якубова1,2, Павел М. Тальянов3, Михаил В. Зюзин3, Альберт Р. Муслимов1,2, Александр С. Тимин1

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28296" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4424) "<p style="text-align: justify;">Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась <i>in vitro</i> на клетках СТ-26.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4217) "

Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.

Материалы и методы

Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась in vitro на клетках СТ-26.

Результаты

Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).

Выводы

Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).

Ключевые слова

Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4217) "

Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.

Материалы и методы

Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась in vitro на клетках СТ-26.

Результаты

Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).

Выводы

Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).

Ключевые слова

Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28295" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(804) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(744) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия
3 Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(744) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия
3 Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [5]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2028" ["~ID"]=> string(4) "2028" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["~NAME"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:41:49" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 12:41:49" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(3) "140" ["~SORT"]=> string(3) "140" ["CODE"]=> string(100) "gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin" ["~CODE"]=> string(100) "gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2028" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2028" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(282) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицинаGC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(5106) "<p style="text-align: justify;">Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.</p> <h3>Методы и результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО<sub>3</sub> ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО<sub>3</sub>, декстрансульфат, гепатома Зайделя.</p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(185) "GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-14-saso3-vaterity-pokrytye-dekstransulfatom-kak-sistemy-dlya-regionarnogo-vvedeniya-doksorubitsin" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28284" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(313) "<p>Наталья Н. Сударева<sup>1,2</sup>, Ольга М. Суворова<sup>1</sup>, Дмитрий Н. Суслов<sup>3</sup>, Олег В. Галибин<sup>2</sup>, Александр Д. Вилесов<sup>1,2</sup> </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(241) "

Наталья Н. Сударева1,2, Ольга М. Суворова1, Дмитрий Н. Суслов3, Олег В. Галибин2, Александр Д. Вилесов1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28285" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(783) "<p><sup>1</sup> Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(723) "

1 Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28286" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5106) "<p style="text-align: justify;">Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.</p> <h3>Методы и результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО<sub>3</sub> ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО<sub>3</sub>, декстрансульфат, гепатома Зайделя.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4958) "

Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.

Методы и результаты

Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО3 ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной.

Выводы

При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.

Ключевые слова

Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО3, декстрансульфат, гепатома Зайделя.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28287" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28288" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(237) "<p>Natalia N. Sudareva<sup>1,2</sup>, Olga M. Suvorova<sup>1</sup>, Dmitry N. Suslov<sup>3</sup>, Oleg V. Galibin<sup>2</sup>, Alexander D. Vilesov<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(165) "

Natalia N. Sudareva1,2, Olga M. Suvorova1, Dmitry N. Suslov3, Oleg V. Galibin2, Alexander D. Vilesov1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28289" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(530) "<p><sup>1</sup> Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia </p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(434) "

1 Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
2 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28290" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3289) "<p style="text-align: justify;"> Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid. </p> <h3>Methods and results</h3> <p style="text-align: justify;"> The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO<sub>3</sub> cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks. </p> <img alt="Sudareva-fig01.jpg" src="/upload/medialibrary/381/sudareva_fig01.jpg" title="Sudareva-fig01.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO<sub>3</sub>+DexS+DOX </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO<sub>3</sub> carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Doxorubicin, drug delivery system, CaCO<sub>3</sub>, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3019) "

Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid.

Methods and results

The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO3 cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats.

Results

It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks.

Sudareva-fig01.jpg

Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO3+DexS+DOX

Conclusion

No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO3 carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug.

Keywords

Doxorubicin, drug delivery system, CaCO3, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28291" ["VALUE"]=> string(97) "GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(97) "GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28292" ["VALUE"]=> string(4) "2653" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2653" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28293" ["VALUE"]=> string(4) "2654" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2654" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28288" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(237) "<p>Natalia N. Sudareva<sup>1,2</sup>, Olga M. Suvorova<sup>1</sup>, Dmitry N. Suslov<sup>3</sup>, Oleg V. Galibin<sup>2</sup>, Alexander D. Vilesov<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(165) "

Natalia N. Sudareva1,2, Olga M. Suvorova1, Dmitry N. Suslov3, Oleg V. Galibin2, Alexander D. Vilesov1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(165) "

Natalia N. Sudareva1,2, Olga M. Suvorova1, Dmitry N. Suslov3, Oleg V. Galibin2, Alexander D. Vilesov1,2

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28290" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3289) "<p style="text-align: justify;"> Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid. </p> <h3>Methods and results</h3> <p style="text-align: justify;"> The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO<sub>3</sub> cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks. </p> <img alt="Sudareva-fig01.jpg" src="/upload/medialibrary/381/sudareva_fig01.jpg" title="Sudareva-fig01.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO<sub>3</sub>+DexS+DOX </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO<sub>3</sub> carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Doxorubicin, drug delivery system, CaCO<sub>3</sub>, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3019) "

Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid.

Methods and results

The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO3 cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats.

Results

It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks.

Sudareva-fig01.jpg

Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO3+DexS+DOX

Conclusion

No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO3 carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug.

Keywords

Doxorubicin, drug delivery system, CaCO3, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3019) "

Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid.

Methods and results

The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO3 cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats.

Results

It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks.

Sudareva-fig01.jpg

Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO3+DexS+DOX

Conclusion

No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO3 carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug.

Keywords

Doxorubicin, drug delivery system, CaCO3, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma.


" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28287" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28291" ["VALUE"]=> string(97) "GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(97) "GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(97) "GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28289" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(530) "<p><sup>1</sup> Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia </p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(434) "

1 Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
2 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(434) "

1 Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
2 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28284" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(313) "<p>Наталья Н. Сударева<sup>1,2</sup>, Ольга М. Суворова<sup>1</sup>, Дмитрий Н. Суслов<sup>3</sup>, Олег В. Галибин<sup>2</sup>, Александр Д. Вилесов<sup>1,2</sup> </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(241) "

Наталья Н. Сударева1,2, Ольга М. Суворова1, Дмитрий Н. Суслов3, Олег В. Галибин2, Александр Д. Вилесов1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(241) "

Наталья Н. Сударева1,2, Ольга М. Суворова1, Дмитрий Н. Суслов3, Олег В. Галибин2, Александр Д. Вилесов1,2

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28286" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5106) "<p style="text-align: justify;">Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.</p> <h3>Методы и результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО<sub>3</sub> ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО<sub>3</sub>, декстрансульфат, гепатома Зайделя.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4958) "

Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.

Методы и результаты

Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО3 ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной.

Выводы

При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.

Ключевые слова

Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО3, декстрансульфат, гепатома Зайделя.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4958) "

Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.

Методы и результаты

Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО3 ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной.

Выводы

При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.

Ключевые слова

Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО3, декстрансульфат, гепатома Зайделя.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28285" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(783) "<p><sup>1</sup> Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(723) "

1 Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(723) "

1 Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [6]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2023" ["~ID"]=> string(4) "2023" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["~NAME"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:50:13" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:50:13" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "90" ["~SORT"]=> string(2) "90" ["CODE"]=> string(100) "gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts" ["~CODE"]=> string(100) "gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2023" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2023" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(543) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALENGC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA " ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(7487) "<p style="text-align: justify;"> Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе <i>CCR5</i> после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе <i>CCR5</i> оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена <i>CCR5</i> дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена <i>CCR5</i>, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i>, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i> не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена <i>CCR5</i> была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(365) "GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-09-testirovanie-malykh-molekul-dlya-stimulyatsii-protsessa-gomologichnoy-reparatsii-kontsov-dvuts" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28234" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(515) "<p>Алена И. Шакирова<sup>1</sup>, Кирилл В. Лепик<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1</sup>, Владислав С. Сергеев<sup>1</sup>, Т. Р. Карпов<sup>1</sup>, К. И. Аношкин<sup>2</sup>, Марина О. Попова<sup>1</sup>, Борис Фезе<sup>1,3</sup>, Александр Д. Кулагин<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(395) "

Алена И. Шакирова1, Кирилл В. Лепик1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Т. Р. Карпов1, К. И. Аношкин2, Марина О. Попова1, Борис Фезе1,3, Александр Д. Кулагин1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28235" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(855) "<p><sup>1</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия<br> <sup>3</sup> Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(795) "

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия
3 Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28236" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(7487) "<p style="text-align: justify;"> Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе <i>CCR5</i> после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе <i>CCR5</i> оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена <i>CCR5</i> дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена <i>CCR5</i>, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i>, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i> не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена <i>CCR5</i> была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(7211) "

Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе CCR5 после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN.

Материалы и методы

Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе CCR5 оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена CCR5 дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР.

Результаты

Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена CCR5, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена CCR5, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена CCR5 не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена CCR5 была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN.

Заключение

Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома.

Благодарности

Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk.

Ключевые слова

TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28237" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28238" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(403) "<p>Alyona I. Shakirova<sup>1</sup>, Kirill V. Lepik<sup>1</sup>, Albert A. Muslimov<sup>1</sup>, Vladislav S. Sergeev<sup>1</sup>, T. R. Karpov<sup>1</sup>, K. I. Anoshkin<sup>2</sup>, Marina O. Popova<sup>1</sup>, Boris Fehse<sup>1,3</sup>, Alexander D. Kulagin<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(283) "

Alyona I. Shakirova1, Kirill V. Lepik1, Albert A. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, T. R. Karpov1, K. I. Anoshkin2, Marina O. Popova1, Boris Fehse1,3, Alexander D. Kulagin1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28239" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(510) "<p><sup>1</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia<br> <sup>3</sup> Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(414) "

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia
3 Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany


Correspondence:
Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28240" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3988) "<p style="text-align: justify;"> Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the <i>CCR5</i> locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the <i>CCR5</i> locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired <i>CCR5</i> alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> The total average efficiency of the <i>CCR5</i> gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the <i>CCR5</i> gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the <i>CCR5</i> gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the <i>CCR5</i> knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3706) "

Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the CCR5 locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection.

Materials and methods

Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the CCR5 locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired CCR5 alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR.

Results

The total average efficiency of the CCR5 gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the CCR5 gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the CCR5 gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the CCR5 knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN.

Conclusion

The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising.

Acknowledgments

K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk.

Keywords

TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28241" ["VALUE"]=> string(178) "GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(178) "GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28242" ["VALUE"]=> string(4) "2643" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2643" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28243" ["VALUE"]=> string(4) "2644" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2644" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28238" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(403) "<p>Alyona I. Shakirova<sup>1</sup>, Kirill V. Lepik<sup>1</sup>, Albert A. Muslimov<sup>1</sup>, Vladislav S. Sergeev<sup>1</sup>, T. R. Karpov<sup>1</sup>, K. I. Anoshkin<sup>2</sup>, Marina O. Popova<sup>1</sup>, Boris Fehse<sup>1,3</sup>, Alexander D. Kulagin<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(283) "

Alyona I. Shakirova1, Kirill V. Lepik1, Albert A. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, T. R. Karpov1, K. I. Anoshkin2, Marina O. Popova1, Boris Fehse1,3, Alexander D. Kulagin1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(283) "

Alyona I. Shakirova1, Kirill V. Lepik1, Albert A. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, T. R. Karpov1, K. I. Anoshkin2, Marina O. Popova1, Boris Fehse1,3, Alexander D. Kulagin1

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28240" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3988) "<p style="text-align: justify;"> Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the <i>CCR5</i> locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the <i>CCR5</i> locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired <i>CCR5</i> alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> The total average efficiency of the <i>CCR5</i> gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the <i>CCR5</i> gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the <i>CCR5</i> gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the <i>CCR5</i> knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3706) "

Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the CCR5 locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection.

Materials and methods

Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the CCR5 locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired CCR5 alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR.

Results

The total average efficiency of the CCR5 gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the CCR5 gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the CCR5 gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the CCR5 knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN.

Conclusion

The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising.

Acknowledgments

K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk.

Keywords

TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3706) "

Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the CCR5 locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection.

Materials and methods

Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the CCR5 locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired CCR5 alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR.

Results

The total average efficiency of the CCR5 gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the CCR5 gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the CCR5 gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the CCR5 knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN.

Conclusion

The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising.

Acknowledgments

K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk.

Keywords

TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC.


" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28237" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28241" ["VALUE"]=> string(178) "GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA " ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(178) "GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA " ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(178) "GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA " } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28239" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(510) "<p><sup>1</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia<br> <sup>3</sup> Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(414) "

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia
3 Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany


Correspondence:
Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(414) "

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia
3 Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany


Correspondence:
Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28234" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(515) "<p>Алена И. Шакирова<sup>1</sup>, Кирилл В. Лепик<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1</sup>, Владислав С. Сергеев<sup>1</sup>, Т. Р. Карпов<sup>1</sup>, К. И. Аношкин<sup>2</sup>, Марина О. Попова<sup>1</sup>, Борис Фезе<sup>1,3</sup>, Александр Д. Кулагин<sup>1</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(395) "

Алена И. Шакирова1, Кирилл В. Лепик1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Т. Р. Карпов1, К. И. Аношкин2, Марина О. Попова1, Борис Фезе1,3, Александр Д. Кулагин1

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(395) "

Алена И. Шакирова1, Кирилл В. Лепик1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Т. Р. Карпов1, К. И. Аношкин2, Марина О. Попова1, Борис Фезе1,3, Александр Д. Кулагин1

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28236" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(7487) "<p style="text-align: justify;"> Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе <i>CCR5</i> после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе <i>CCR5</i> оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена <i>CCR5</i> дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена <i>CCR5</i>, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i>, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i> не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена <i>CCR5</i> была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(7211) "

Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе CCR5 после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN.

Материалы и методы

Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе CCR5 оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена CCR5 дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР.

Результаты

Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена CCR5, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена CCR5, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена CCR5 не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена CCR5 была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN.

Заключение

Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома.

Благодарности

Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk.

Ключевые слова

TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(7211) "

Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе CCR5 после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN.

Материалы и методы

Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе CCR5 оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена CCR5 дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР.

Результаты

Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена CCR5, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена CCR5, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена CCR5 не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена CCR5 была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN.

Заключение

Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома.

Благодарности

Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk.

Ключевые слова

TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28235" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(855) "<p><sup>1</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия<br> <sup>3</sup> Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(795) "

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия
3 Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(795) "

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия
3 Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия

" } } } [7]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2022" ["~ID"]=> string(4) "2022" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["~NAME"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:38:31" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:38:31" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "80" ["~SORT"]=> string(2) "80" ["CODE"]=> string(100) "gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera" ["~CODE"]=> string(100) "gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2022" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2022" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(271) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапииGC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(6800) "<p style="text-align: justify;"> Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для <i>in vivo</i> визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие). </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала <i>in vivo</i>. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация <i>in vivo</i>. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(184) "GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-08-izuchenie-bioraspredeleniya-polimernykh-nositeley-dlya-dalneyshego-ispolzovaniya-v-gennoy-tera" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28224" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(377) "<p>Анна С. Рогова<sup>1</sup>, Анастасия С. Букреева<sup>1</sup>, Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Александр С. Тимин<sup>1,2</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(293) "

Анна С. Рогова1, Анастасия С. Букреева1, Алиса С. Постовалова1, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28225" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(446) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(404) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28226" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6800) "<p style="text-align: justify;"> Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для <i>in vivo</i> визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие). </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала <i>in vivo</i>. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация <i>in vivo</i>. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6572) "

Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей.

Материалы и методы

В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для in vivo визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе.

Результаты

В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие).

Заключение

Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала in vivo.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация in vivo.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28227" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28228" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(287) "<p>Anna S. Rogova<sup>1</sup>, Anastasia S. Bukreeva<sup>1</sup>, Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Alexander S. Timin<sup>1,2</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(203) "

Anna S. Rogova1, Anastasia S. Bukreeva1, Alisa S. Postovalova1, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28229" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(343) "<p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia </p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(265) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28230" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3962) "<p style="text-align: justify;">Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for <i>in vivo</i> fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material <i>in vivo</i>.</p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;">The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, <i>in vivo</i> visualization.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3734) "

Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.

Materials and methods

In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for in vivo fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.

Results

The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).

Conclusion

The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material in vivo.

Acknowledgments

The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, in vivo visualization.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28231" ["VALUE"]=> string(87) "GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(87) "GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28232" ["VALUE"]=> string(4) "2641" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2641" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28233" ["VALUE"]=> string(4) "2642" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2642" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28228" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(287) "<p>Anna S. Rogova<sup>1</sup>, Anastasia S. Bukreeva<sup>1</sup>, Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Alexander S. Timin<sup>1,2</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(203) "

Anna S. Rogova1, Anastasia S. Bukreeva1, Alisa S. Postovalova1, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(203) "

Anna S. Rogova1, Anastasia S. Bukreeva1, Alisa S. Postovalova1, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28230" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3962) "<p style="text-align: justify;">Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for <i>in vivo</i> fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material <i>in vivo</i>.</p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;">The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, <i>in vivo</i> visualization.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3734) "

Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.

Materials and methods

In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for in vivo fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.

Results

The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).

Conclusion

The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material in vivo.

Acknowledgments

The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, in vivo visualization.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3734) "

Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.

Materials and methods

In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for in vivo fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.

Results

The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).

Conclusion

The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material in vivo.

Acknowledgments

The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, in vivo visualization.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28227" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28231" ["VALUE"]=> string(87) "GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(87) "GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(87) "GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28229" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(343) "<p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia </p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(265) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(265) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28224" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(377) "<p>Анна С. Рогова<sup>1</sup>, Анастасия С. Букреева<sup>1</sup>, Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Александр С. Тимин<sup>1,2</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(293) "

Анна С. Рогова1, Анастасия С. Букреева1, Алиса С. Постовалова1, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(293) "

Анна С. Рогова1, Анастасия С. Букреева1, Алиса С. Постовалова1, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28226" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6800) "<p style="text-align: justify;"> Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для <i>in vivo</i> визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие). </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала <i>in vivo</i>. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация <i>in vivo</i>. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6572) "

Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей.

Материалы и методы

В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для in vivo визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе.

Результаты

В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие).

Заключение

Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала in vivo.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация in vivo.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(6572) "

Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей.

Материалы и методы

В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для in vivo визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе.

Результаты

В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие).

Заключение

Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала in vivo.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация in vivo.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28225" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(446) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(404) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(404) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [8]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2017" ["~ID"]=> string(4) "2017" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["~NAME"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:41:43" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:41:43" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "30" ["~SORT"]=> string(2) "30" ["CODE"]=> string(100) "gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-" ["~CODE"]=> string(100) "gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2017" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2017" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(330) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного составаGC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(5767) "<p style="text-align: justify;">В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.</p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(215) "GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-03-povyshenie-urovnya-transfektsii-pri-dostavke-geneticheskogo-materiala-polimernymi-nositelyami-" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28174" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(372) "<p>Анастасия С. Букреева<sup>1</sup>, Анна С. Рогова<sup>1</sup>, Татьяна В. Машель<sup>3</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Александр С. Тимин<sup>1,2</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(288) "

Анастасия С. Букреева1, Анна С. Рогова1, Татьяна В. Машель3, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28175" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(559) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(499) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28176" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5767) "<p style="text-align: justify;">В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5575) "

В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.

Материалы и методы

В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.

Результаты

Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.

Выводы

В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.

Ключевые слова

Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28177" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28178" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(284) "<p>Anastasia S. Bukreeva<sup>1</sup>, Anna S. Rogova<sup>1</sup>, Tatiana V. Machel<sup>3</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Alexander S. Timin<sup>1,2</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(200) "

Anastasia S. Bukreeva1, Anna S. Rogova1, Tatiana V. Machel3, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28179" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(429) "<p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> ITMO University, St.Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(333) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 ITMO University, St.Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28180" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3415) "<p style="text-align: justify;"> Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The <i>in vitro</i> experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3205) "

Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells.

Materials and methods

In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The in vitro experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry.

Results

Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection.

Conclusions

In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material.

Acknowledgments

This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010.

Keywords

Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28181" ["VALUE"]=> string(115) "GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(115) "GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28182" ["VALUE"]=> string(4) "2631" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2631" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28183" ["VALUE"]=> string(4) "2632" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2632" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28178" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(284) "<p>Anastasia S. Bukreeva<sup>1</sup>, Anna S. Rogova<sup>1</sup>, Tatiana V. Machel<sup>3</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Alexander S. Timin<sup>1,2</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(200) "

Anastasia S. Bukreeva1, Anna S. Rogova1, Tatiana V. Machel3, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(200) "

Anastasia S. Bukreeva1, Anna S. Rogova1, Tatiana V. Machel3, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28180" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3415) "<p style="text-align: justify;"> Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The <i>in vitro</i> experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3205) "

Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells.

Materials and methods

In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The in vitro experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry.

Results

Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection.

Conclusions

In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material.

Acknowledgments

This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010.

Keywords

Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3205) "

Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells.

Materials and methods

In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The in vitro experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry.

Results

Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection.

Conclusions

In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material.

Acknowledgments

This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010.

Keywords

Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency.


" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28177" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28181" ["VALUE"]=> string(115) "GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(115) "GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(115) "GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28179" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(429) "<p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> ITMO University, St.Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(333) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 ITMO University, St.Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(333) "

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 ITMO University, St.Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28174" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(372) "<p>Анастасия С. Букреева<sup>1</sup>, Анна С. Рогова<sup>1</sup>, Татьяна В. Машель<sup>3</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Александр С. Тимин<sup>1,2</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(288) "

Анастасия С. Букреева1, Анна С. Рогова1, Татьяна В. Машель3, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(288) "

Анастасия С. Букреева1, Анна С. Рогова1, Татьяна В. Машель3, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28176" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5767) "<p style="text-align: justify;">В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5575) "

В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.

Материалы и методы

В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.

Результаты

Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.

Выводы

В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.

Ключевые слова

Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(5575) "

В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.

Материалы и методы

В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.

Результаты

Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.

Выводы

В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.

Ключевые слова

Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28175" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(559) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(499) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(499) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [9]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2016" ["~ID"]=> string(4) "2016" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["~NAME"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:28:45" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:28:45" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(221) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(221) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "20" ["~SORT"]=> string(2) "20" ["CODE"]=> string(84) "gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata" ["~CODE"]=> string(84) "gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2016" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2016" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(212) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препаратаGC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(4534) "<p style="text-align: justify;"> Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3). </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i>. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате. </p> <p style="text-align: justify;"> Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(88) "gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata-img" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(139) "GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(88) "gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata-img" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(88) "gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata-img" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(88) "gc-02-doklinicheskie-issledovaniya-sd20-spetsificheskogo-car-t-kletochnogo-preparata-img" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28164" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(126) "<p>Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(114) "

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28165" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(149) "<p>Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(137) "

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28166" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4534) "<p style="text-align: justify;"> Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3). </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i>. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате. </p> <p style="text-align: justify;"> Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4270) "

Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение in vitro и in vivo трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике.

Материалы и методы

Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность.

Результаты

В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3).

Выводы

Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах in vitro и in vivo. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате.

Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а.

Ключевые слова

Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28167" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28168" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(82) "<p>Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(70) "

Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28169" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(244) "<p>Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br>Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(196) "

Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28170" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3641) "<p style="text-align: justify;"> Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared <i>in vitro</i> and<i> in vivo</i> activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3). </p> <img alt="Belovezhets-fig01.jpg" src="/upload/medialibrary/e7c/belovezhets_fig01.jpg" title="Belovezhets-fig01.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation </p> <img alt="Belovezhets-fig02.jpg" src="/upload/medialibrary/99c/belovezhets_fig02.jpg" title="Belovezhets-fig02.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test </p> <img alt="Belovezhets-fig03.jpg" src="/upload/medialibrary/0b6/belovezhets_fig03.jpg" title="Belovezhets-fig03.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment <i>in vivo</i> </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> CAR T-cells obtained display pronounced activity both <i>in vitro</i> and <i>in vivo </i>warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs. </p> <p style="text-align: justify;"> This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3185) "

Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared in vitro and in vivo activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice.

Materials and methods

We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays.

Results

First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3).

Belovezhets-fig01.jpg

Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation

Belovezhets-fig02.jpg

Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test

Belovezhets-fig03.jpg

Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment in vivo

Conclusion

CAR T-cells obtained display pronounced activity both in vitro and in vivo warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs.

This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а.

Keywords

Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28171" ["VALUE"]=> string(73) "GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(73) "GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28172" ["VALUE"]=> string(4) "2629" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2629" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28173" ["VALUE"]=> string(4) "2630" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2630" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28168" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(82) "<p>Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(70) "

Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(70) "

Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28170" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3641) "<p style="text-align: justify;"> Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared <i>in vitro</i> and<i> in vivo</i> activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3). </p> <img alt="Belovezhets-fig01.jpg" src="/upload/medialibrary/e7c/belovezhets_fig01.jpg" title="Belovezhets-fig01.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation </p> <img alt="Belovezhets-fig02.jpg" src="/upload/medialibrary/99c/belovezhets_fig02.jpg" title="Belovezhets-fig02.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test </p> <img alt="Belovezhets-fig03.jpg" src="/upload/medialibrary/0b6/belovezhets_fig03.jpg" title="Belovezhets-fig03.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment <i>in vivo</i> </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> CAR T-cells obtained display pronounced activity both <i>in vitro</i> and <i>in vivo </i>warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs. </p> <p style="text-align: justify;"> This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3185) "

Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared in vitro and in vivo activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice.

Materials and methods

We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays.

Results

First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3).

Belovezhets-fig01.jpg

Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation

Belovezhets-fig02.jpg

Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test

Belovezhets-fig03.jpg

Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment in vivo

Conclusion

CAR T-cells obtained display pronounced activity both in vitro and in vivo warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs.

This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а.

Keywords

Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3185) "

Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared in vitro and in vivo activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice.

Materials and methods

We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays.

Results

First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3).

Belovezhets-fig01.jpg

Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation

Belovezhets-fig02.jpg

Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test

Belovezhets-fig03.jpg

Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment in vivo

Conclusion

CAR T-cells obtained display pronounced activity both in vitro and in vivo warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs.

This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а.

Keywords

Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab.


" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28167" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28171" ["VALUE"]=> string(73) "GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(73) "GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(73) "GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28169" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(244) "<p>Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br>Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(196) "

Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(196) "

Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28164" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(126) "<p>Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(114) "

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(114) "

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28166" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4534) "<p style="text-align: justify;"> Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3). </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i>. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате. </p> <p style="text-align: justify;"> Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4270) "

Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение in vitro и in vivo трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике.

Материалы и методы

Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность.

Результаты

В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3).

Выводы

Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах in vitro и in vivo. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате.

Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а.

Ключевые слова

Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4270) "

Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение in vitro и in vivo трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике.

Материалы и методы

Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность.

Результаты

В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3).

Выводы

Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах in vitro и in vivo. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате.

Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а.

Ключевые слова

Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28165" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(149) "<p>Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(137) "

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(137) "

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия

" } } } [10]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2018" ["~ID"]=> string(4) "2018" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["~NAME"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:54:50" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:54:50" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "40" ["~SORT"]=> string(2) "40" ["CODE"]=> string(100) "gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia" ["~CODE"]=> string(100) "gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2018" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2018" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(465) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапиейGC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(6912) "<p style="text-align: justify;"> Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию <i>in vivo</i> модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей. </p> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(298) "GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-04-sozdanie-in-vivo-modeli-terapii-raka-prostaty-dlya-issledovaniya-protivoopukholevogo-potentsia" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28184" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(503) "<p>Антон Н. Чикаев<sup>1</sup>, Сергей В. Кулемзин<sup>1</sup>, Ольга Ю. Волкова<sup>1</sup>, Татьяна Н. Беловежец<sup>1</sup>, Анастасия В. Семенова<sup>2</sup>, Сергей С. Зайнутдинов<sup>2</sup>, Антонина А. Гражданцева<sup>2</sup>, Галина В. Кочнева<sup>2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(395) "

Антон Н. Чикаев1, Сергей В. Кулемзин1, Ольга Ю. Волкова1, Татьяна Н. Беловежец1, Анастасия В. Семенова2, Сергей С. Зайнутдинов2, Антонина А. Гражданцева2, Галина В. Кочнева2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28185" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(407) "<p><sup>1</sup> Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия<br> <sup>2</sup> Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(365) "

1 Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия
2 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28186" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6912) "<p style="text-align: justify;"> Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию <i>in vivo</i> модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей. </p> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6720) "

Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию in vivo модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии.

Материалы и методы

Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки.

Результаты

Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей.

Выводы

В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044.

Ключевые слова

Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28187" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28188" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(384) "<p>Anton N. Chikaev<sup>1</sup>, Sergey V. Kulemzin<sup>1</sup>, Olga Yu. Volkova<sup>1</sup>, Tatyana N. Belovezhets<sup>1</sup>, Anastasiya V. Semenova<sup>2</sup>, Sergey S. Zainutdinov<sup>2</sup>, Antonina A. Grazhdantseva<sup>2</sup>, Galina V. Kochneva<sup>2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(276) "

Anton N. Chikaev1, Sergey V. Kulemzin1, Olga Yu. Volkova1, Tatyana N. Belovezhets1, Anastasiya V. Semenova2, Sergey S. Zainutdinov2, Antonina A. Grazhdantseva2, Galina V. Kochneva2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28189" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(387) "<p><sup>1</sup> Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia<br> <sup>2</sup> State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(309) "

1 Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia
2 State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28190" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4188) "<p style="text-align: justify;">Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16<sup>th</sup> day after tumor administration mice from the 1<sup>st</sup> group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2<sup>nd</sup> group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18<sup>th</sup> and 23<sup>rd</sup> day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18<sup>th</sup> and 23<sup>rd</sup> days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.</p> <p style="text-align: justify;">This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3924) "

Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.

Materials and methods

We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16th day after tumor administration mice from the 1st group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2nd group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18th and 23rd day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18th and 23rd days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.

Results

We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.

Conclusion

Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.

This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.

Keywords

Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28191" ["VALUE"]=> string(167) "GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(167) "GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28192" ["VALUE"]=> string(4) "2633" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2633" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28193" ["VALUE"]=> string(4) "2634" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2634" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28188" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(384) "<p>Anton N. Chikaev<sup>1</sup>, Sergey V. Kulemzin<sup>1</sup>, Olga Yu. Volkova<sup>1</sup>, Tatyana N. Belovezhets<sup>1</sup>, Anastasiya V. Semenova<sup>2</sup>, Sergey S. Zainutdinov<sup>2</sup>, Antonina A. Grazhdantseva<sup>2</sup>, Galina V. Kochneva<sup>2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(276) "

Anton N. Chikaev1, Sergey V. Kulemzin1, Olga Yu. Volkova1, Tatyana N. Belovezhets1, Anastasiya V. Semenova2, Sergey S. Zainutdinov2, Antonina A. Grazhdantseva2, Galina V. Kochneva2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(276) "

Anton N. Chikaev1, Sergey V. Kulemzin1, Olga Yu. Volkova1, Tatyana N. Belovezhets1, Anastasiya V. Semenova2, Sergey S. Zainutdinov2, Antonina A. Grazhdantseva2, Galina V. Kochneva2

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28190" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4188) "<p style="text-align: justify;">Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16<sup>th</sup> day after tumor administration mice from the 1<sup>st</sup> group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2<sup>nd</sup> group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18<sup>th</sup> and 23<sup>rd</sup> day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18<sup>th</sup> and 23<sup>rd</sup> days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.</p> <p style="text-align: justify;">This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3924) "

Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.

Materials and methods

We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16th day after tumor administration mice from the 1st group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2nd group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18th and 23rd day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18th and 23rd days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.

Results

We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.

Conclusion

Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.

This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.

Keywords

Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3924) "

Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.

Materials and methods

We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16th day after tumor administration mice from the 1st group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2nd group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18th and 23rd day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18th and 23rd days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.

Results

We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.

Conclusion

Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.

This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.

Keywords

Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28187" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28191" ["VALUE"]=> string(167) "GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(167) "GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(167) "GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28189" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(387) "<p><sup>1</sup> Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia<br> <sup>2</sup> State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(309) "

1 Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia
2 State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(309) "

1 Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia
2 State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28184" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(503) "<p>Антон Н. Чикаев<sup>1</sup>, Сергей В. Кулемзин<sup>1</sup>, Ольга Ю. Волкова<sup>1</sup>, Татьяна Н. Беловежец<sup>1</sup>, Анастасия В. Семенова<sup>2</sup>, Сергей С. Зайнутдинов<sup>2</sup>, Антонина А. Гражданцева<sup>2</sup>, Галина В. Кочнева<sup>2</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(395) "

Антон Н. Чикаев1, Сергей В. Кулемзин1, Ольга Ю. Волкова1, Татьяна Н. Беловежец1, Анастасия В. Семенова2, Сергей С. Зайнутдинов2, Антонина А. Гражданцева2, Галина В. Кочнева2

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(395) "

Антон Н. Чикаев1, Сергей В. Кулемзин1, Ольга Ю. Волкова1, Татьяна Н. Беловежец1, Анастасия В. Семенова2, Сергей С. Зайнутдинов2, Антонина А. Гражданцева2, Галина В. Кочнева2

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28186" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6912) "<p style="text-align: justify;"> Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию <i>in vivo</i> модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей. </p> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(6720) "

Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию in vivo модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии.

Материалы и методы

Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки.

Результаты

Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей.

Выводы

В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044.

Ключевые слова

Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(6720) "

Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию in vivo модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии.

Материалы и методы

Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки.

Результаты

Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей.

Выводы

В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044.

Ключевые слова

Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28185" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(407) "<p><sup>1</sup> Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия<br> <sup>2</sup> Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(365) "

1 Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия
2 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(365) "

1 Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия
2 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия

" } } } [11]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2019" ["~ID"]=> string(4) "2019" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["~NAME"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:03:19" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:03:19" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "50" ["~SORT"]=> string(2) "50" ["CODE"]=> string(100) "gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy" ["~CODE"]=> string(100) "gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2019" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2019" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(270) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапииGC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(4115) "<p style="text-align: justify;">Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6]. </p> <p style="text-align: justify;">С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.</p> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, днРНК, глиобластома. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(186) "GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-05-dlinnye-nekodiruyushchie-rnk-kak-potentsialnye-misheni-dlya-genomnogo-redaktirovaniya-i-gennoy" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28194" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(116) "<p>Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(104) "

Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28195" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(174) "<p>Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(162) "

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28196" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4115) "<p style="text-align: justify;">Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6]. </p> <p style="text-align: justify;">С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.</p> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, днРНК, глиобластома. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3947) "

Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG.

Материалы и методы

В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Результаты

По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6].

С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.

Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).

Ключевые слова

CasRx, днРНК, глиобластома.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28197" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28198" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(72) "<p>Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(60) "

Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28199" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(242) "<p>Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(194) "

Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28200" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4020) "<p style="text-align: justify;">The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6]. </p> <p style="text-align: justify;">Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.</p> <p style="text-align: justify;">This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).</p> <h3>References</h3> <p style="text-align: justify;">1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.</p> <p style="text-align: justify;">2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.</p> <p style="text-align: justify;">3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.</p> <p style="text-align: justify;">4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.</p> <p style="text-align: justify;">5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.</p> <p style="text-align: justify;">6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, lncRNA, glioblastoma.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3708) "

The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.

Materials and methods

In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Results

Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6].

Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.

This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).

References

1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.

2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.

3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.

4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.

5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.

6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.

Keywords

CasRx, lncRNA, glioblastoma.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28201" ["VALUE"]=> string(84) "GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(84) "GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28202" ["VALUE"]=> string(4) "2635" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2635" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28203" ["VALUE"]=> string(4) "2636" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2636" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28198" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(72) "<p>Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(60) "

Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(60) "

Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28200" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4020) "<p style="text-align: justify;">The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6]. </p> <p style="text-align: justify;">Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.</p> <p style="text-align: justify;">This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).</p> <h3>References</h3> <p style="text-align: justify;">1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.</p> <p style="text-align: justify;">2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.</p> <p style="text-align: justify;">3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.</p> <p style="text-align: justify;">4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.</p> <p style="text-align: justify;">5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.</p> <p style="text-align: justify;">6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, lncRNA, glioblastoma.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3708) "

The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.

Materials and methods

In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Results

Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6].

Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.

This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).

References

1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.

2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.

3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.

4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.

5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.

6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.

Keywords

CasRx, lncRNA, glioblastoma.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3708) "

The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.

Materials and methods

In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Results

Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6].

Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.

This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).

References

1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.

2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.

3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.

4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.

5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.

6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.

Keywords

CasRx, lncRNA, glioblastoma.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28197" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28201" ["VALUE"]=> string(84) "GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(84) "GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(84) "GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28199" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(242) "<p>Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(194) "

Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(194) "

Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28194" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(116) "<p>Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(104) "

Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(104) "

Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28196" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4115) "<p style="text-align: justify;">Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6]. </p> <p style="text-align: justify;">С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.</p> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, днРНК, глиобластома. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3947) "

Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG.

Материалы и методы

В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Результаты

По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6].

С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.

Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).

Ключевые слова

CasRx, днРНК, глиобластома.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3947) "

Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG.

Материалы и методы

В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Результаты

По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6].

С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.

Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).

Ключевые слова

CasRx, днРНК, глиобластома.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28195" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(174) "<p>Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(162) "

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(162) "

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия

" } } } [12]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2021" ["~ID"]=> string(4) "2021" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["~NAME"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:29:57" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:29:57" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "70" ["~SORT"]=> string(2) "70" ["CODE"]=> string(100) "gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii" ["~CODE"]=> string(100) "gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2021" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2021" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(265) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапииGC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(4692) "<p style="text-align: justify;"> Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием <sup>177</sup>Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием <sup>177</sup>Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью<i> Image-Pro Plus</i>. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией <sup>177</sup>Lu-MPs и химиотерапией цисплатином. </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов <i>in vivo</i>, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(182) "GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-07-lechenie-onkologicheskikh-zabolevaniy-mikronositelyami-s-ispolzovaniem-kombinirovannoy-terapii" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28214" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(367) "<p>Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Тимофей Е. Карпов<sup>1</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(283) "

Алиса С. Постовалова1, Тимофей Е. Карпов1, Дарья Р. Ахметова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28215" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(618) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(558) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28216" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4692) "<p style="text-align: justify;"> Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием <sup>177</sup>Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием <sup>177</sup>Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью<i> Image-Pro Plus</i>. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией <sup>177</sup>Lu-MPs и химиотерапией цисплатином. </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов <i>in vivo</i>, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4440) "

Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких.

Материалы и методы

В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием 177Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием 177Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью Image-Pro Plus.

Результаты

Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией 177Lu-MPs и химиотерапией цисплатином.

Вывод

Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов in vivo, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28217" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28218" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(282) "<p>Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Timofey E. Karpov<sup>1</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(198) "

Alisa S. Postovalova1, Timofey E. Karpov1, Darya R. Akhmetova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28219" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(428) "<p><sup>1</sup> Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St.Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> ITMO University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(332) "

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St.Petersburg, Russia
3 ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28220" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2549) "<p style="text-align: justify;">Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">This study developed a potentially promising treatment with a combination of <sup>177</sup>Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of <i>Image-Pro Plus</i>.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with <sup>177</sup>Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during <i>in vivo</i> experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.</p> <h3>Acknowledgment</h3> <p style="text-align: justify;">The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2309) "

Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.

Materials and methods

This study developed a potentially promising treatment with a combination of 177Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of Image-Pro Plus.

Results

Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with 177Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.

Conclusion

According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during in vivo experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.

Acknowledgment

The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28221" ["VALUE"]=> string(83) "GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(83) "GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28222" ["VALUE"]=> string(4) "2639" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2639" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28223" ["VALUE"]=> string(4) "2640" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2640" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28218" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(282) "<p>Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Timofey E. Karpov<sup>1</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(198) "

Alisa S. Postovalova1, Timofey E. Karpov1, Darya R. Akhmetova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(198) "

Alisa S. Postovalova1, Timofey E. Karpov1, Darya R. Akhmetova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28220" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2549) "<p style="text-align: justify;">Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">This study developed a potentially promising treatment with a combination of <sup>177</sup>Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of <i>Image-Pro Plus</i>.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with <sup>177</sup>Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during <i>in vivo</i> experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.</p> <h3>Acknowledgment</h3> <p style="text-align: justify;">The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.</p> " ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2309) "

Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.

Materials and methods

This study developed a potentially promising treatment with a combination of 177Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of Image-Pro Plus.

Results

Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with 177Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.

Conclusion

According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during in vivo experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.

Acknowledgment

The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(2309) "

Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.

Materials and methods

This study developed a potentially promising treatment with a combination of 177Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of Image-Pro Plus.

Results

Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with 177Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.

Conclusion

According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during in vivo experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.

Acknowledgment

The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.

" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28217" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28221" ["VALUE"]=> string(83) "GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(83) "GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(83) "GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28219" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(428) "<p><sup>1</sup> Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St.Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> ITMO University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(332) "

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St.Petersburg, Russia
3 ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(332) "

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St.Petersburg, Russia
3 ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28214" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(367) "<p>Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Тимофей Е. Карпов<sup>1</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(283) "

Алиса С. Постовалова1, Тимофей Е. Карпов1, Дарья Р. Ахметова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(283) "

Алиса С. Постовалова1, Тимофей Е. Карпов1, Дарья Р. Ахметова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28216" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4692) "<p style="text-align: justify;"> Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием <sup>177</sup>Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием <sup>177</sup>Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью<i> Image-Pro Plus</i>. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией <sup>177</sup>Lu-MPs и химиотерапией цисплатином. </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов <i>in vivo</i>, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4440) "

Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких.

Материалы и методы

В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием 177Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием 177Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью Image-Pro Plus.

Результаты

Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией 177Lu-MPs и химиотерапией цисплатином.

Вывод

Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов in vivo, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4440) "

Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких.

Материалы и методы

В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием 177Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием 177Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью Image-Pro Plus.

Результаты

Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией 177Lu-MPs и химиотерапией цисплатином.

Вывод

Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов in vivo, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28215" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(618) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(558) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(558) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [13]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2020" ["~ID"]=> string(4) "2020" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["~NAME"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:14:56" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 11:14:56" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(237) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "60" ["~SORT"]=> string(2) "60" ["CODE"]=> string(100) "gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2" ["~CODE"]=> string(100) "gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2020" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2020" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(330) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотоповGC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(5050) "<p style="text-align: justify;"> В настоящее время альфа-излучающий радионуклид <sup>225</sup>Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить <sup>225</sup>Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (<sup>221</sup>Fr и <sup>213</sup>Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO<sub>2</sub>), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl<sub>4</sub>), для удерживания <sup>225</sup>Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследования <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO<sub>2</sub> наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (<sup>225</sup>Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO<sub>2</sub> наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку <sup>225</sup>Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения <sup>225</sup>Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(217) "GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-06-modifikatsiya-nanonositeley-oksida-kremniya-metallicheskimi-obolochkami-s-tselyu-uderzhaniya-2" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28204" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(190) "<p>Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(178) "

Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28205" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(407) "<p>«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(395) "

«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28206" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5050) "<p style="text-align: justify;"> В настоящее время альфа-излучающий радионуклид <sup>225</sup>Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить <sup>225</sup>Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (<sup>221</sup>Fr и <sup>213</sup>Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO<sub>2</sub>), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl<sub>4</sub>), для удерживания <sup>225</sup>Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследования <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO<sub>2</sub> наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (<sup>225</sup>Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO<sub>2</sub> наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку <sup>225</sup>Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения <sup>225</sup>Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4688) "

В настоящее время альфа-излучающий радионуклид 225Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить 225Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (221Fr и 213Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма.

Материалы и методы

В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO2), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C4H9O)4) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl4), для удерживания 225Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях.

Результаты

Исследования in vitro и in vivo на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO2 наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (225Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO2 наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку 225Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения 225Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек.

Выводы

Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28207" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28208" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(121) "<p>Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(109) "

Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28209" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(317) "<p>Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(269) "

Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia


Correspondence:
Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28210" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3077) "<p style="text-align: justify;"> The alpha emitting radionuclide <sup>225</sup>Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of <sup>225</sup>Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (<sup>221</sup>Fr and <sup>213</sup>Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO<sub>2</sub>) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl<sub>4</sub>) to retain <sup>225</sup>Ac and its decomposition products in developed nanocarriers. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> <i>In vitro</i> and <i>in vivo</i> studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO<sub>2</sub> nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (<sup>225</sup>Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO<sub>2</sub> nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a <sup>225</sup>Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% <sup>225</sup>Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys. </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2709) "

The alpha emitting radionuclide 225Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of 225Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (221Fr and 213Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body.

Materials and methods

In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO2) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C4H9O)4) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl4) to retain 225Ac and its decomposition products in developed nanocarriers.

Results

In vitro and in vivo studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO2 nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (225Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO2 nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a 225Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% 225Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys.

Conclusion

These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28211" ["VALUE"]=> string(113) "GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(113) "GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28212" ["VALUE"]=> string(4) "2637" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2637" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28213" ["VALUE"]=> string(4) "2638" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2638" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28208" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(121) "<p>Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(109) "

Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(109) "

Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28210" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3077) "<p style="text-align: justify;"> The alpha emitting radionuclide <sup>225</sup>Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of <sup>225</sup>Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (<sup>221</sup>Fr and <sup>213</sup>Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO<sub>2</sub>) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl<sub>4</sub>) to retain <sup>225</sup>Ac and its decomposition products in developed nanocarriers. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> <i>In vitro</i> and <i>in vivo</i> studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO<sub>2</sub> nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (<sup>225</sup>Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO<sub>2</sub> nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a <sup>225</sup>Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% <sup>225</sup>Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys. </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(2709) "

The alpha emitting radionuclide 225Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of 225Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (221Fr and 213Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body.

Materials and methods

In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO2) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C4H9O)4) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl4) to retain 225Ac and its decomposition products in developed nanocarriers.

Results

In vitro and in vivo studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO2 nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (225Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO2 nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a 225Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% 225Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys.

Conclusion

These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(2709) "

The alpha emitting radionuclide 225Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of 225Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (221Fr and 213Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body.

Materials and methods

In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO2) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C4H9O)4) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl4) to retain 225Ac and its decomposition products in developed nanocarriers.

Results

In vitro and in vivo studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO2 nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (225Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO2 nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a 225Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% 225Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys.

Conclusion

These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold.


" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28207" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28211" ["VALUE"]=> string(113) "GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(113) "GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(113) "GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28209" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(317) "<p>Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(269) "

Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia


Correspondence:
Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(269) "

Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia


Correspondence:
Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28204" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(190) "<p>Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(178) "

Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(178) "

Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28206" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5050) "<p style="text-align: justify;"> В настоящее время альфа-излучающий радионуклид <sup>225</sup>Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить <sup>225</sup>Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (<sup>221</sup>Fr и <sup>213</sup>Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO<sub>2</sub>), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl<sub>4</sub>), для удерживания <sup>225</sup>Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследования <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO<sub>2</sub> наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (<sup>225</sup>Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO<sub>2</sub> наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку <sup>225</sup>Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения <sup>225</sup>Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(4688) "

В настоящее время альфа-излучающий радионуклид 225Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить 225Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (221Fr и 213Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма.

Материалы и методы

В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO2), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C4H9O)4) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl4), для удерживания 225Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях.

Результаты

Исследования in vitro и in vivo на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO2 наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (225Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO2 наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку 225Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения 225Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек.

Выводы

Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(4688) "

В настоящее время альфа-излучающий радионуклид 225Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить 225Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (221Fr и 213Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма.

Материалы и методы

В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO2), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C4H9O)4) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl4), для удерживания 225Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях.

Результаты

Исследования in vitro и in vivo на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO2 наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (225Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO2 наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку 225Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения 225Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек.

Выводы

Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28205" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(407) "<p>«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(395) "

«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(395) "

«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

" } } } [14]=> array(49) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["~IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" ["ID"]=> string(4) "2015" ["~ID"]=> string(4) "2015" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["~NAME"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["ACTIVE_FROM"]=> NULL ["~ACTIVE_FROM"]=> NULL ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:05:40" ["~TIMESTAMP_X"]=> string(19) "21.12.2021 10:05:40" ["DETAIL_PAGE_URL"]=> string(234) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii/" ["~DETAIL_PAGE_URL"]=> string(234) "/ru/archive/tom-10-nomer-3/tezisy-dokladov-xv-simpoziuma-pamyati-r-m-gorbachevoy-po-razdelam/gennaya-i-kletochnaya-terapiya-gc-01-gc-15/gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii/" ["LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["~LIST_PAGE_URL"]=> string(12) "/ru/archive/" ["DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["~DETAIL_TEXT"]=> string(0) "" ["DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~DETAIL_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["~PREVIEW_TEXT"]=> string(0) "" ["PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["~PREVIEW_TEXT_TYPE"]=> string(4) "text" ["PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["~PREVIEW_PICTURE"]=> NULL ["LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["~LANG_DIR"]=> string(4) "/ru/" ["SORT"]=> string(2) "10" ["~SORT"]=> string(2) "10" ["CODE"]=> string(97) "gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii" ["~CODE"]=> string(97) "gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii" ["EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2015" ["~EXTERNAL_ID"]=> string(4) "2015" ["IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["~IBLOCK_TYPE_ID"]=> string(7) "journal" ["IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["~IBLOCK_CODE"]=> string(7) "volumes" ["IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["~IBLOCK_EXTERNAL_ID"]=> string(1) "2" ["LID"]=> string(2) "s2" ["~LID"]=> string(2) "s2" ["EDIT_LINK"]=> NULL ["DELETE_LINK"]=> NULL ["DISPLAY_ACTIVE_FROM"]=> string(0) "" ["IPROPERTY_VALUES"]=> array(18) { ["ELEMENT_META_TITLE"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["ELEMENT_META_KEYWORDS"]=> string(0) "" ["ELEMENT_META_DESCRIPTION"]=> string(259) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализацииGC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(5795) "<p style="text-align: justify;"> Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO<sub>3</sub> для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO<sub>2</sub> с металлической оболочкой TiO<sub>2</sub> в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация. </p>" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_META_TITLE"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_META_KEYWORDS"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_META_DESCRIPTION"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii-im" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_ALT"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_TITLE"]=> string(159) "GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации" ["SECTION_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii-im" ["ELEMENT_PREVIEW_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii-im" ["ELEMENT_DETAIL_PICTURE_FILE_NAME"]=> string(100) "gc-01-razrabotka-metodov-modifikatsii-nano-i-mikronositeley-dlya-in-vitro-i-in-vivo-vizualizatsii-im" } ["FIELDS"]=> array(1) { ["IBLOCK_SECTION_ID"]=> string(3) "196" } ["PROPERTIES"]=> array(18) { ["KEYWORDS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "19" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:46:01" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "KEYWORDS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "19" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "4" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "Y" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "Y" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(27) "Ключевые слова" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["SUBMITTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "20" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "SUBMITTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "20" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Дата подачи" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["ACCEPTED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "21" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(8) "ACCEPTED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "21" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(25) "Дата принятия" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["PUBLISHED"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "22" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 17:21:42" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "PUBLISHED" ["DEFAULT_VALUE"]=> NULL ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "22" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(8) "DateTime" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Дата публикации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> NULL } ["CONTACT"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "23" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 14:43:05" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(14) "Контакт" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "CONTACT" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "23" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(14) "Контакт" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHORS"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "24" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:45:07" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "AUTHORS" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "E" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "Y" ["XML_ID"]=> string(2) "24" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "3" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(13) "EAutocomplete" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(9) { ["VIEW"]=> string(1) "E" ["SHOW_ADD"]=> string(1) "Y" ["MAX_WIDTH"]=> int(0) ["MIN_HEIGHT"]=> int(24) ["MAX_HEIGHT"]=> int(1000) ["BAN_SYM"]=> string(2) ",;" ["REP_SYM"]=> string(1) " " ["OTHER_REP_SYM"]=> string(0) "" ["IBLOCK_MESS"]=> string(1) "N" } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> bool(false) ["VALUE"]=> bool(false) ["DESCRIPTION"]=> bool(false) ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> bool(false) ["~DESCRIPTION"]=> bool(false) ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28154" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(367) "<p>Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Тимофей Е. Карпов<sup>1</sup>, Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(283) "

Дарья Р. Ахметова1, Тимофей Е. Карпов1, Алиса С. Постовалова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28155" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(618) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(558) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28156" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5795) "<p style="text-align: justify;"> Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO<sub>3</sub> для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO<sub>2</sub> с металлической оболочкой TiO<sub>2</sub> в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5519) "

Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для in vitro и in vivo визуализации.

Материалы и методы

В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO3 для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO2 с металлической оболочкой TiO2 в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования.

Результаты

По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств.

Выводы

По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения in vitro и in vivo визуализации.

Благодарности

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["DOI"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28157" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["AUTHOR_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28158" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(282) "<p>Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Timofey E. Karpov<sup>1</sup>, Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(198) "

Darya R. Akhmetova1, Timofey E. Karpov1, Alisa S. Postovalova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28159" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(511) "<p><sup>1</sup> Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(415) "

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["SUMMARY_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28160" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3568) "<p style="text-align: justify;"> Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for <i>in vitro</i> and <i>in vivo</i> visualization. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO<sub>3</sub> cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO<sub>2</sub> cores with a TiO<sub>2</sub> metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for <i>in vitro</i> and <i>i</i><i>n vivo</i> visualization were obtained and experimentally tested. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3274) "

Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for in vitro and in vivo visualization.

Materials and methods

Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO3 cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO2 cores with a TiO2 metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies.

Results

According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties.

Conclusions

According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for in vitro and in vivo visualization were obtained and experimentally tested.

Acknowledgments

The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["NAME_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28161" ["VALUE"]=> string(100) "GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(100) "GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["FULL_TEXT_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "42" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-07 20:29:18" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(12) "FULL_TEXT_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "42" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(23) "Полный текст" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } } ["PDF_RU"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "43" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "43" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28162" ["VALUE"]=> string(4) "2624" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2624" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF RUS" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["PDF_EN"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "44" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-09 16:05:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(6) "PDF_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "F" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "44" ["FILE_TYPE"]=> string(18) "doc, txt, rtf, pdf" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28163" ["VALUE"]=> string(4) "2625" ["DESCRIPTION"]=> NULL ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(4) "2625" ["~DESCRIPTION"]=> NULL ["~NAME"]=> string(7) "PDF ENG" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" } ["NAME_LONG"]=> array(36) { ["ID"]=> string(2) "45" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2023-04-13 00:55:00" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "NAME_LONG" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "45" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(80) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> NULL ["VALUE"]=> string(0) "" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(0) "" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(72) "Название (для очень длинных заголовков)" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TYPE"]=> string(4) "HTML" ["TEXT"]=> string(0) "" } } } ["DISPLAY_PROPERTIES"]=> array(8) { ["AUTHOR_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "37" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(6) "Author" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "37" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28158" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(282) "<p>Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Timofey E. Karpov<sup>1</sup>, Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(198) "

Darya R. Akhmetova1, Timofey E. Karpov1, Alisa S. Postovalova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(6) "Author" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(198) "

Darya R. Akhmetova1, Timofey E. Karpov1, Alisa S. Postovalova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

" } ["SUMMARY_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "39" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "39" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28160" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3568) "<p style="text-align: justify;"> Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for <i>in vitro</i> and <i>in vivo</i> visualization. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO<sub>3</sub> cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO<sub>2</sub> cores with a TiO<sub>2</sub> metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for <i>in vitro</i> and <i>i</i><i>n vivo</i> visualization were obtained and experimentally tested. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization. </p> <br>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(3274) "

Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for in vitro and in vivo visualization.

Materials and methods

Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO3 cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO2 cores with a TiO2 metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies.

Results

According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties.

Conclusions

According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for in vitro and in vivo visualization were obtained and experimentally tested.

Acknowledgments

The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization.


" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(21) "Description / Summary" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(3274) "

Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for in vitro and in vivo visualization.

Materials and methods

Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO3 cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO2 cores with a TiO2 metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies.

Results

According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties.

Conclusions

According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for in vitro and in vivo visualization were obtained and experimentally tested.

Acknowledgments

The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization.


" } ["DOI"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "28" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2016-04-06 14:11:12" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(3) "DOI" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(3) "DOI" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "28" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28157" ["VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(3) "DOI" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(38) "10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148" } ["NAME_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "40" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-03 10:49:47" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(4) "Name" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(7) "NAME_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "80" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "40" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "Y" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> NULL ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> NULL ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28161" ["VALUE"]=> string(100) "GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging" ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> string(100) "GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging" ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(4) "Name" ["~DEFAULT_VALUE"]=> string(0) "" ["DISPLAY_VALUE"]=> string(100) "GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging" } ["ORGANIZATION_EN"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "38" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:02:59" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Organization" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_EN" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "38" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28159" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(511) "<p><sup>1</sup> Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(415) "

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Organization" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(415) "

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru

" } ["AUTHOR_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "25" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(12) "Авторы" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(9) "AUTHOR_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "25" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28154" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(367) "<p>Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Тимофей Е. Карпов<sup>1</sup>, Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup></p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(283) "

Дарья Р. Ахметова1, Тимофей Е. Карпов1, Алиса С. Постовалова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(12) "Авторы" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(283) "

Дарья Р. Ахметова1, Тимофей Е. Карпов1, Алиса С. Постовалова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

" } ["SUMMARY_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "27" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(10) "SUMMARY_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "27" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28156" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5795) "<p style="text-align: justify;"> Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO<sub>3</sub> для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO<sub>2</sub> с металлической оболочкой TiO<sub>2</sub> в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация. </p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(5519) "

Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для in vitro и in vivo визуализации.

Материалы и методы

В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO3 для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO2 с металлической оболочкой TiO2 в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования.

Результаты

По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств.

Выводы

По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения in vitro и in vivo визуализации.

Благодарности

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация.

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(29) "Описание/Резюме" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(5519) "

Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для in vitro и in vivo визуализации.

Материалы и методы

В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO3 для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO2 с металлической оболочкой TiO2 в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования.

Результаты

По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств.

Выводы

По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения in vitro и in vivo визуализации.

Благодарности

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация.

" } ["ORGANIZATION_RU"]=> array(37) { ["ID"]=> string(2) "26" ["TIMESTAMP_X"]=> string(19) "2015-09-02 18:01:20" ["IBLOCK_ID"]=> string(1) "2" ["NAME"]=> string(22) "Организации" ["ACTIVE"]=> string(1) "Y" ["SORT"]=> string(3) "500" ["CODE"]=> string(15) "ORGANIZATION_RU" ["DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["PROPERTY_TYPE"]=> string(1) "S" ["ROW_COUNT"]=> string(1) "1" ["COL_COUNT"]=> string(2) "30" ["LIST_TYPE"]=> string(1) "L" ["MULTIPLE"]=> string(1) "N" ["XML_ID"]=> string(2) "26" ["FILE_TYPE"]=> string(0) "" ["MULTIPLE_CNT"]=> string(1) "5" ["TMP_ID"]=> NULL ["LINK_IBLOCK_ID"]=> string(1) "0" ["WITH_DESCRIPTION"]=> string(1) "N" ["SEARCHABLE"]=> string(1) "N" ["FILTRABLE"]=> string(1) "N" ["IS_REQUIRED"]=> string(1) "N" ["VERSION"]=> string(1) "1" ["USER_TYPE"]=> string(4) "HTML" ["USER_TYPE_SETTINGS"]=> array(1) { ["height"]=> int(200) } ["HINT"]=> string(0) "" ["PROPERTY_VALUE_ID"]=> string(5) "28155" ["VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(618) "<p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p>" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["VALUE_ENUM"]=> NULL ["VALUE_XML_ID"]=> NULL ["VALUE_SORT"]=> NULL ["~VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(558) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["~DESCRIPTION"]=> string(0) "" ["~NAME"]=> string(22) "Организации" ["~DEFAULT_VALUE"]=> array(2) { ["TEXT"]=> string(0) "" ["TYPE"]=> string(4) "HTML" } ["DISPLAY_VALUE"]=> string(558) "

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

" } } } }

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых

Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан

GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител

Даниил И. Шмидт1, Иван Н. Гапоненко1, Никита Д. Ёлшин2, Ольга С. Епифановская1, Татьяна Н. Беловежец3, Андрей А. Горчаков3, Сергей В. Кулемзин3, Андрей М. Чекалов1, Елена В. Бабенко1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Кирилл В. Лепик1, Александр Д. Кулагин1

GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток

Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин

GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций

Анастасия А. Якубова1,2, Павел М. Тальянов3, Михаил В. Зюзин3, Альберт Р. Муслимов1,2, Александр С. Тимин1

GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина

Наталья Н. Сударева1,2, Ольга М. Суворова1, Дмитрий Н. Суслов3, Олег В. Галибин2, Александр Д. Вилесов1,2

GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN

Алена И. Шакирова1, Кирилл В. Лепик1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Т. Р. Карпов1, К. И. Аношкин2, Марина О. Попова1, Борис Фезе1,3, Александр Д. Кулагин1

GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии

Анна С. Рогова1, Анастасия С. Букреева1, Алиса С. Постовалова1, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава

Анастасия С. Букреева1, Анна С. Рогова1, Татьяна В. Машель3, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией

Антон Н. Чикаев1, Сергей В. Кулемзин1, Ольга Ю. Волкова1, Татьяна Н. Беловежец1, Анастасия В. Семенова2, Сергей С. Зайнутдинов2, Антонина А. Гражданцева2, Галина В. Кочнева2

GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии

Алиса С. Постовалова1, Тимофей Е. Карпов1, Дарья Р. Ахметова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов

Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов

GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации

Дарья Р. Ахметова1, Тимофей Е. Карпов1, Алиса С. Постовалова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28254
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая,
Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан</p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28255 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28256 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м<sup>2</sup>/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.

Материалы и методы

В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.

Результаты

СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м2/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.

Выводы

В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения.

Ключевые слова

CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28257 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28258 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Antonina E. Shchekina, Gennady M. Galstyan, Olga A. Gavrilina, Zalina T. Fidarova, Vera V. Troitskaya, Vera A. Vasilyeva, Elena N. Parovichnikova, Michael A. Maschan

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28259 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

National Medical Research Center of Hematology, Moscow, Russia


Correspondence:
Antonina E. Shchekina, phone: +7 (916) 330-96-10, e-mail: shekina_ae@mail.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28260 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever &gt;39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m<sup>2</sup>/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%. </p> <h3>Reference</h3> <p style="text-align: justify;"> Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: <a target="_blank" href="https://doi.org/10.1016/j.bbmt.2018.12.758"><u>10.1016/j.bbmt.2018.12.758</u></a> </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Chimeric antigen receptor T-lymphocytes (CAR-T) therapy is a highly effective method in treating refractory B-cell lymphomas and acute lymphoblastic leukemias (ALL). However, CAR-T therapy can be associated with the development of severe life-threatening complications. Cytokine release syndrome (CRS) and immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome (ICANS) are the most serious toxicities. The aim of this study is to evaluate the nature, frequency and treatment methods of CAR-T therapy complications in adult patients.

Materials and methods

The prospective analysis included 9 CAR-T therapy procedures, which were performed in 5 patients (3 women, 2 men) with B-cell lymphomas and B-ALL at the age from 19 to 38 years (median – 29 years). 1 patient with relapse B-ALL underwent 4 CAR-T-therapy procedures, 1 patient with refractory diffuse large B-cell lymphoma underwent 2 procedures. In 3 patients with extramedullary relapses of B-ALL (1 patient with neuroleukemia relapse), CAR-T therapy procedures were performed once. The dose and type of CAR-T therapy were determined individually. All patients before CAR-T therapy received tocilizumab and were observed in the intensive care unit (ICU). The timing of complications, the types of complications based on the accepted criteria1 and the effectiveness of the treatment of complications of CAR-T therapy were recorded.

Results

CRS developed in 4 of 9 CAR-T therapy procedures. The incidence of severe CRS (grade ≥3) was 25%. All patients with CRS had a fever >39°C. Hypotension was presented in 3 of 4 cases of CRS. Shock with multiple organ dysfunction developed in 1 case, in which vasopressor agents, extracorporeal cytokine adsorption and hemodiafiltration were used. Hypoxemia was registered in 2 of 4 cases, none of patients required mechanical ventilation. The median time to the onset of CRS was +6.5 days (range 4-7) after the transfusion of CAR-T cells, the median duration of CRS was 4.5 days (range 2-5 days). Tocilizumab (8 mg/kg) was used in 2 cases of CRS as single injections. Hypofibrinogenemia was observed in 8 of 9 cases of CAR-T therapy (median 1.2 g/l, range 0.8-1.9 g/l). In 6 of 9 cases, hyponatremia was noted (median 124 mmol/l, range 122-132 mmol/l). 1 patient with neuroleukemia developed ICANS grade 3 on +7 day. Cerebrospinal fluid (CSF) cytosis was 77 cells/ml (CAR-T cells were detected in the CSF by immunophenotyping). ICANS was resolved within 24 hours after the initiation of dexamethasone in dose 20 mg/m2/day. Tumor lysis syndrome developed in 2 of 9 cases, septic shock developed in 1 case and caused the patient’s death. The overall survival rate after CAR-T therapy was 89%.

Conclusions

The incidence of serious CAR-T therapy complications (CRS, ICANS, septic) requiring intensive differential diagnosis and treatment can reach 55%.

Reference

Lee DW, Santomasso BD, Locke FL, et al. ASTCT Consensus Grading for Cytokine Release Syndrome and Neurologic Toxicity Associated with Immune Effector Cells. Biol Blood and Marrow Transplant. 2019; 25 (4): 625-38. doi: 10.1016/j.bbmt.2018.12.758

Keywords

CAR-T therapy, cytokine release syndrome, neurotoxicity syndrome.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28261 [VALUE] => GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-11. Complications after chimeric antigen receptor T-cell therapy in adults [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28262 [VALUE] => 2647 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2647 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28263 [VALUE] => 2648 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2648 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-11. Осложнения после терапии Т-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором у взрослых

Загрузить версию в PDF

Антонина Е. Щекина, Геннадий М. Галстян, Ольга А. Гаврилина, Залина Т. Фидарова, Вера В. Троицкая, Вера А. Васильева, Елена Н. Паровичникова, Михаил А. Масчан

Национальный медицинский исследовательский центр гематологии, Москва, Россия

Терапия T-лимфоцитами с химерным антигенным рецептором (CAR-T-терапия) является высокоэффективным методом лечения рефрактерных к химиотерапии В-клеточных лимфом и острых лимфобластных лейкозов (ОЛЛ). Однако CAR-T-терапия может сопровождаться развитием тяжелых, угрожающих жизни осложнений, среди которых наиболее серьезные – синдром выброса цитокинов (СВЦ) и c иммунными клетками ассоциированный нейротоксический синдром (ИКАНС). Цель работы – установить характер, частоту развития и методы лечения осложнений CAR-T-терапии у взрослых больных.

Материалы и методы

В проспективный анализ включено 9 процедур CAR-T-терапии, которые были проведены у 5 больных (3 женщины, 2 мужчины) В-клеточными лимфомами и В-ОЛЛ в возрасте от 19 до 38 лет (медиана – 29 лет). 1 больному с рецидивом В-ОЛЛ выполнено 4 процедуры CAR-T-терапии, у 1 больной с рефрактерной диффузной В-крупноклеточной лимфомой – 2 процедуры. У 3 больных с экстрамедуллярными рецидивами В-ОЛЛ (у 1 больного – нейрорецидив) процедуры CAR-T-терапии выполнялась однократно. Доза и вид CAR-T-терапии определялись индивидуально. Все больные перед CAR-T-терапией получали тоцилизумаб и наблюдались в отделении реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Регистрировали сроки возникновения осложнений, виды осложнений на основании принятых критериев1, эффективность проводимого лечения осложнений CAR-T-терапии.

Результаты

СВЦ развился в 4 из 9 процедур CAR-T-терапии. Частота развития тяжелого СВЦ (≥3 степени) составила 25%. У всех больных с СВЦ была лихорадка > 39ºС. Артериальная гипотензия была в 3 из 4 случаев СВЦ. В 1 случае развился шок с полиорганной дисфункцией, для лечения которого применялась вазопрессорная терапия, экстракорпоральная сорбция цитокинов, гемодиафильтрация. Гипоксемия зарегистрирована в 2 из 4 случаев, ни в одном из них не потребовалось проведения искусственной вентиляции легких. Медиана времени развития СВЦ составила +6,5 день (4-7 дни) после трансфузии CAR-T-клеток, медиана продолжительности СВЦ – 4,5 дня (2-5 дней). Тоцилизумаб (8 мг/кг) применяли в 2 случаях СВЦ в виде однократных введений. В 8 из 9 случаев CAR-T-терапии наблюдалась гипофибриногенемия (медиана 1,2 г/л, разброс 0,8-1,9 г/л). В 6 из 9 случаев отмечена гипонатриемия (медиана 124 ммоль/л, разброс 122-132 ммоль/л). У 1 больного с нейролейкемией на +7 сутки развился ИКАНС 3 степени тяжести. Цитоз ликвора составил 77 клеток/мл, при иммунофенотировании в ликворе обнаружены CAR-T-клетки. Проводилась терапия дексаметазоном (20 мг/м2/сут.), реверсия ИКАНС наблюдалась в течение 24 ч после начала терапии дексаметазоном. В 2 из 9 случаев развился синдром лизиса опухоли, в 1 случае развился септический шок, явившийся причиной смерти больного. Общая выживаемость после CAR-T-терапии составила 89%.

Выводы

В 55% случаев после CAR-T-терапии могут развиваться серьезные осложнения (СВЦ, ИКАНС, септический шок), требующие интенсивной дифференциальной диагностики и лечения.

Ключевые слова

CAR-Т-терапия, синдром высвобождения цитокинов, синдром нейротоксичности.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28244
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Богдан О. Щеглов                                                </p>

                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Богдан О. Щеглов                                                

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28245 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28249 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.</p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;">Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.

Материалы и методы

Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле.

Результаты

Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.

Заключение

Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека.

Ключевые слова

Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28246 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28250 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Bogdan O. Shcheglov                                                               </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Bogdan O. Shcheglov                                                               

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28251 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

School of Medicine, Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia


Correspondence:
Bogdan O. Shcheglov, phone: +7 (914) 718-98-25, e-mail: b.shcheglov@mail.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28252 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;">Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

A number of workers demonstrated an ATP-dependent activity of moving hematopoietic stem cells from immunopurified FLAG-labeled RecQL1 eluate using the example of the human gene RAD54L. Also in the UCSC genome browser presented many publications related to mutant gene activity, which indicates the biomedical potential of the study of this gene.

Materials and methods

Data were collected and maintained by the UCSC Genome Browser. For the gene under consideration, most matches with Human mRNA were found in the NCBI RefSeq, UCSC genes, and GENCODE databases. The ratio of most introns and exons (only the initial ones have different lengths), their length corresponds to Human mRNA and the Human expressed sequence tag (EST). When considering the RAD54L gene with different annotations in RefSeq, it is impossible to give an accurate assessment of the comparison with the experimental and predicted RNAs with PolyA end (there are no such RNAs). According to the RAD54L gene, sequencing in the cell culture K562 PolyA + predominates, found many pseudogenes. Most of the transcript located in the cytosol and nucleosome. The expression level for CAGE is most observed in the nucleosome and cytosol.

Results

The study revealed that this gene in the annotations was reasonably correctly calculated and interpreted. A large number of peptides are observed for the RAD54L gene, a high level of ribosomal profiling signals that coincide with the exon structure of the gene, therefore it is a protein-coding gene. According to COSMIC, multiple mutations were identified that correspond to all exons of the gene in hematopoietic, endometrial and lung tumor diseases. Adenocarcinoma, colonic, somatic, Lymphoma, non-Hodgkin, Breast cancer, pathologies of stem cells were found in the OMIM database.

Conclusions

Based on the results obtained, it can be argued that this RAD54L gene encodes a protein, which is an important link in many physiological, functional and pathological processes in the human body. The mutational activity of this gene is highly likely to lead to the development of pathologies of different genesis: the analysis showed an effect on the oncogenic process, the development of somatic diseases. It has a large role in the development of hereditary diseases. In conclusion, there is a sufficient number of publications on the information of this gene, which indicates possible promising studies of biomedicine in terms of prevention and treatment of somatic and oncogenic diseases of humans.

Keywords

Bioinformatics analysis, hematopoietic stem cells, RAD54L gene.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28247 [VALUE] => GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-10. Bioinformatic analysis of the RAD54L oncogene for detecting the effect on the occurrence of hematopoietic stem disorders [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28248 [VALUE] => 2645 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2645 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28253 [VALUE] => 2646 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2646 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-10. Биоинформатический анализ онкогена RAD54L для выявления влияния на возникновение гемопоэтических стволовых нарушений

Загрузить версию в PDF

Богдан О. Щеглов                                                

Школа медицины, Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия

В ряде исследований была продемонстрирована АТФ-зависимая активность гемопоэтических стволовых клеток из иммуноочищенного меченого маркера элюата RecQL1 на примере человеческого гена RAD54L. Также в браузере генома UCSC представлено множество публикаций, связанных с мутантной активностью гена, что указывает на биомедицинский потенциал изучения этого гена.

Материалы и методы

Данные были собраны и сохранены в геномном браузере UCSC. Для рассматриваемого гена большинство совпадений с мРНК человека были обнаружены в базах данных NCBI RefSeq, UCSC и GENCODE. Соотношение большинства интронов и экзон (только исходные имеют разную длину), их длина соответствует мРНК человека и аннотации экспрессированному тэгу последовательности (EST) человека. При рассмотрении гена RAD54L с различными аннотациями в RefSeq невозможно дать точную оценку сравнения с экспериментальными и прогнозируемыми РНК с концом PolyA (таких РНК нет). Согласно гену RAD54L, при секвенировании в клеточной культуре K562 PolyA+ преобладает множество псевдогенов. Большая часть транскрипта находится в цитозоле и нуклеосоме. Уровень экспрессии для CAGE в большей степени наблюдается в нуклеосоме и цитозоле.

Результаты

Результаты показали, что этот ген в аннотациях был достаточно точно рассчитан и интерпретирован. Для гена RAD54L наблюдается большое количество пептидов, высокий уровень рибосомных сигналов профилирования, которые совпадают со структурой экзона гена, поэтому он является геном, кодирующим белок. По данным базы данных COSMIC, были выявлены множественные мутации, которые соответствуют всем экзонам гена при заболеваниях гемопоэза, эндометрия и опухолей легких. Аденокарцинома, толстая кишка, соматика, лимфома, неходжкинский рак, рак молочной железы, патологии стволовых клеток были обнаружены в базе данных OMIM.

Заключение

Исходя из полученных результатов, можно утверждать, что данный ген RAD54L кодирует белок, который является важным звеном во многих физиологических, функциональных и патологических процессах в организме человека. Мутационная активность этого гена с высокой вероятностью приводит к развитию патологий различного генеза: анализ показал влияние на онкогенный процесс, развитие соматических заболеваний. Он играет большую роль в развитии наследственных заболеваний. Более того, имеется достаточное количество публикаций по исследованиям рассматриваемого гена, что указывает на возможные перспективные исследования биомедицины в части профилактики и лечения соматических и онкогенных заболеваний человека.

Ключевые слова

Биоинформатический анализ, гемопоэтические стволовые клетки, ген RAD54L.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28264
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Даниил И. Шмидт<sup>1</sup>, Иван Н. Гапоненко<sup>1</sup>, Никита Д. Ёлшин<sup>2</sup>, Ольга С. Епифановская<sup>1</sup>, Татьяна Н. Беловежец<sup>3</sup>, Андрей А. Горчаков<sup>3</sup>, Сергей В. Кулемзин<sup>3</sup>, Андрей М. Чекалов<sup>1</sup>, Елена В. Бабенко<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1</sup>,
Владислав С. Сергеев<sup>1</sup>, Кирилл В. Лепик<sup>1</sup>, Александр Д. Кулагин<sup>1</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Даниил И. Шмидт1, Иван Н. Гапоненко1, Никита Д. Ёлшин2, Ольга С. Епифановская1, Татьяна Н. Беловежец3, Андрей А. Горчаков3, Сергей В. Кулемзин3, Андрей М. Чекалов1, Елена В. Бабенко1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Кирилл В. Лепик1, Александр Д. Кулагин1

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28265 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия
3 Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28266 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*10<sup>6</sup> клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов). </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Титр лентивируса составил 8×10<sup>4</sup>/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).</p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;">Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы <i>in vitro</i>, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].

Материалы и методы

кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*106 клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов).

Результаты

Титр лентивируса составил 8×104/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).

Вывод

Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы in vitro, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.

Ключевые слова

CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28267 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28268 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Daniil I. Shmidt<sup>1</sup>, Ivan N. Gaponenko<sup>1</sup>, Nikita D. Yolshin<sup>2</sup>, Olga S. Epifanovskaya<sup>1</sup>, Tatyana N. Belovezhets<sup>3</sup>, Andrey A. Gorchakov<sup>3</sup>, Sergey V. Kulemzin<sup>3</sup>, Andrey M. Chekalov<sup>1</sup>, Elena V. Babenko<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1</sup>, Vladislav S. Sergeev<sup>1</sup>, Kirill V. Lepik<sup>1</sup>, Alexander D. Kulagin<sup>1</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Daniil I. Shmidt1, Ivan N. Gaponenko1, Nikita D. Yolshin2, Olga S. Epifanovskaya1, Tatyana N. Belovezhets3, Andrey A. Gorchakov3, Sergey V. Kulemzin3, Andrey M. Chekalov1, Elena V. Babenko1, Albert R. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, Kirill V. Lepik1, Alexander D. Kulagin1

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28269 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Smorodintsev Research Institute of Influenza, St. Petersburg, Russia
3 Institute of Molecular and Cellular Biology, SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Daniil I. Shmidt, e-mail: daniil.shmidt@yahoo.com, lepikkv@gmail.com

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28270 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*10<sup>6</sup> cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×10<sup>4</sup>/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% <i>vs</i> 59%) and 10 pM/L (96% <i>vs</i> 74%).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells <i>in vitro</i>. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.</p> <h3>References</h3> <p style="text-align: justify;">1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.</p> <p style="text-align: justify;">2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.</p> <p style="text-align: justify;">3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.</p> <p style="text-align: justify;">4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Chimeric antigen receptor T cells (CAR-T) and bispecific antibody technologies (BsAbs) became a breakthrough in the therapy of relapsed/refractory B-cell malignancies. CAR-T cells possess not negligible toxicity that can be fatal in some patients, while their efficiency may be hampered by mechanisms of resistance, such as antigen escape and CAR-T exhaustion. Most of the BsAbs bind CD3 epsilon (CD3ε) protein on T-cells alongside with tumor-associated antigen, lacking important co-stimulatory signals present in CAR structure, which may limit their potential. Introducing CD3 epsilon as an extracellular portion of CAR allows to engage CAR in immune synapse formation using BsAbs. Our approach addresses limitations of both methods, combining potential for control of toxicity by controlling BsAbs infusion, ability to modify antigen-specificity by changing the BsAbs as well as enabling dual or multi-targeting. Moreover, the possibility of making CAR-T cells “rest” by stopping BsAbs infusion may presumably prevent their exhaustion [1].

Materials and methods

cDNA of extracellular domain (ECD) of CD3E gene was derived from healthy donor peripheral blood mononuclear cells (PBMC) mRNA and cloned to pIRES. Then CD3E ECD was inserted in pCDH lentiviral plasmid containing FMC63-CD8stalk-41bbz CAR with NGFR as reporter gene substituting FMC63 (clone 7). Lentiviral preparations were made using HEK293T cells and pMD2.G and psPAX2 packaging plasmids. Lentiviral preparation was titrated using HEK293 cell line. PBMCs of a healthy donor were separated using Ficoll density gradient centrifugation. Cells were plated at the density of 1-2*106 cells/ml and activated with 0.1 mcg/mL OKT3 antibody with 50 IE/mL of IL-2 for 3 days. On day 3 cells were transduced with lentiviral vector for 2 days. Cells were assessed for NGFR expression on day 5-8 post-activation using flow cytometry. On the next day after determining the percentage of NGFR-positive cells, cytotoxicity test was conducted. For cytotoxicity test Raji cell line stained with CFSE dye were plated with CAR-T cells at different effector:target (E:T) ratio in duplicates; BsAbs – blinatumomab or glofitamab – was added at different concentrations. Percentage of living target cells were determined by flow cytometry after 4 or 24 hours. Cytotoxicity was determined by the formula: 100 – cells alive/control cells alive (no effectors). Results. Lentiviral titer was 8×104/µL using HEK293T cells. Efficiency of T-cell transduction ranged from 30 to 90%. Cytotoxicity tests conducted for 4 and 24 hours with blinatumomab at concentrations 0, 10, 100 and 200 ng/mL at E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 3:1, 5:1 did not reveal the difference of cytotoxicity from control T cells. Cytotoxicity with glofitamab was tested at concentrations 0, 1, 10 pM/L with E:T ratio of 0.3:1, 1:1, 5:1 for 24 hours. The most evident difference was seen in 5:1 E:T ratio with increase of cytotoxicity in CAR-T compared to untransduced T-cells at glofitamab concentration 1 pM/L (93% vs 59%) and 10 pM/L (96% vs 74%).

Conclusion

Novel chimeric antigen receptors with extracellular portion of CD3E redirected by bispecific antibody glofitamab, but not blinatumomab may have activity against B-cell lymphoma cells in vitro. These may be explained by the fact that OKT3 antibody fragment, on which blinatumomab is based, can’t recognize CD3E as monomer, only as a dimer [2-4]. Therefore, design of CARs with CD3epsilon/CD3gamma and CD3epsilon/CD3delta extracellular domains is warranted.

References

1. Weber EW, Parker KR, Sotillo E, et al. Transient rest restores functionality in exhausted CAR-T cells through epigenetic remodeling. Science. 2021.

2. Salmerón A, Sánchez-Madrid F, Ursa MA, Fresno M, Alarcón B. A conformational epitope expressed upon association of CD3-epsilon with either CD3-delta or CD3-gamma is the main target for recognition by anti-CD3 monoclonal antibodies. J Immunol. 1991.

3. Law CL, Hayden‐Ledbetter M, Buckwalter S, McNeill L, Nguyen H, Habecker P, Thorne BA, Dua R, Ledbetter JA. Expression and characterization of recombinant soluble human CD3 molecules: presentation of antigenic epitopes defined on the native TCR-CD3 complex. International Immunology, 2002.

4. Trinklein ND, Pham D, Schellenberger U, et al. Efficient tumor killing and minimal cytokine release with novel T-cell agonist bispecific antibodies. MAbs. 2019.

Keywords

CAR-T, chimeric antigen receptor, cell therapy, B-cell malignancies, bispecific antibodies.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28271 [VALUE] => GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-12. Combining bispecifics and CARs: novel design of chimeric antigen receptor with CD3E extracellular domain for redirecting antitumor specificity with bispecific antibodies [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28272 [VALUE] => 2649 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2649 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28273 [VALUE] => 2650 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2650 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-12. Комбинируя CAR-T и биспецифические антитела: новый дизайн химерного антигенного рецептора с внеклеточным доменом CD3E для перенаправления противоопухолевой специфичности с помощью биспецифических антител

Загрузить версию в PDF

Даниил И. Шмидт1, Иван Н. Гапоненко1, Никита Д. Ёлшин2, Ольга С. Епифановская1, Татьяна Н. Беловежец3, Андрей А. Горчаков3, Сергей В. Кулемзин3, Андрей М. Чекалов1, Елена В. Бабенко1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Кирилл В. Лепик1, Александр Д. Кулагин1

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ Гриппа им. А.А. Смородинцева, Санкт-Петербург, Россия
3 Институт молекулярной и клеточной биологии, СО РАН, Новосибирск, Россия

Т-клеточная терапия с использованием рекомбинантного химерного антигенного рецептора (CAR-T) стала выдающийся терапевтической опцией для лечения некоторых В-клеточных злокачественных новообразований. Однако, примерно у половины пациентов наблюдаются рецидивы. Важным механизмом устойчивости к CAR-T терапии являются уменьшение экспрессии антигена и истощение CAR-T продукта. Большинство биспецифических Т-клеточных антител (BsAbs) связывают белок CD3-эпсилон (CD3ε) на Т-клетках вместе с ассоциированным с опухолью антигеном. Использование CD3ε в качестве внеклеточного домена CAR позволяет задействовать данный рецептор в формировании иммунных синапсов как при взаимодейстии BsAbs с Т-клеточным рецептором. CAR-T-терапия обладает непренебрежимой токсичностью – вплоть до фатальных исходов у некоторых пациентов. Наш подход потенциально нацелен на снижение токсического воздействия CAR-T путем контроля путем контроля инфузии BsAbs, а подбор специфичности возможен путем изменения BsAbs. Кроме того, возможность переведения CAR-T клеток в неактивное состояние путем прекращения инфузии BsAbs предположительно устраняет истощение клеточного продукта [1].

Материалы и методы

кДНК внеклеточного домена (ВКД) гена CD3E была получена из мРНК мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) здорового донора и клонирована в pIRES. Затем кДНК внеклеточный домен CD3E была вставлена в лентивирусную плазмиду pCDH, содержащую FMC63-CD8stalk-41bbz CAR с NGFR в качестве репортерного гена заменяя FMC63 (клон 7). Лентивирусные препараты получали с использованием клеток HEK293T и упаковывающих плазмид pMD2.G и psPAX2. Лентивирусный препарат титровали с использованием линии клеток HEK293. PBMC здорового донора выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Клетки были посажены в лунку в концентрации 1-2*106 клеток/мл и активированы 0,1 мкг/мл anti-CD3 антителами (OKT3) с добавлением 50 ЕД/мл IL-2 в течение 3 дней. На 3-й день клетки были трансдуцированы лентивирусным вектором в течение 2 дней. На 5-8 день после активации с помощью проточной цитометрии клетки оценивали на экспрессию NGFR. На следующий день после определения процента NGFR-положительных клеток проводили тест на цитотоксичность: клеточную линию Raji, окрашенную CFSE, инкубировали с CAR-T-клетками в различных соотношениях в двух повторах с добавлением в различных концентрациях BsAbs (блинатумомаб или глофитамаб). Процент выживших клеток-мишеней (Raji) определяли методом проточной цитометрии через 4 или 24 часа. Цитотоксичность определяли по формуле: 100 – живые клетки/контрольные клетки живые (без эффекторов).

Результаты

Титр лентивируса составил 8×104/µL на клетках HEK293T. Эффективность трансдукции составила 30-90%. Цитотоксичность при инкубации 4 и 24 часа с блинатумомабом в концентрациях 0, 10, 100 и 200 нг/мл при соотношении эффектор:мишень (Э:М) – 0,3:1, 1:1, 3:1, 5:1 статистически значимо не отличалась от контроля. Цитотоксичность глофитамаба тестировали при концентрациях 0, 1, 10 пМ/л с соотношением (Э:М) 0,3: 1, 1: 1, 5: 1 в течение 24 часов. Наибольшая цитотоксичность была в соотношении (Э:М) 5:1, где CAR-T был более эффективным, чем нетрансдуцированные Т-клетки при концентрации глофитамаба 1 пМ/л (59% против 93%) и 10 пМ/л (74% против 96%).

Вывод

Новые CAR с внеклеточным доменом CD3E, перенаправляемые BsAbs (глофитамабом), активны против В-клеточной лимфомы in vitro, но при применении блинатумомаба подобного не замечено, что можно объяснить тем, что фрагмент OKT3, на котором основан блинатумомаб, распознает CD3ε только в качестве димера, но не мономера [2-4]. Следовательно, является оправданным создание CAR с внеклеточными доменами CD3epsilon/CD3gamma и CD3epsilon/CD3delta.

Ключевые слова

CAR-T, химерный антигенный рецептор, клеточная терапия, В-клеточные опухоли, биспецифические антитела.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28274
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская,
Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин </p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28275 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28276 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p&lt;0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p&lt;0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p&lt;0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO). </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток.

Материалы и методы

Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни.

Результаты

При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p<0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p<0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p<0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO).

Вывод

Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур.

Ключевые слова

Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28277 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28278 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Irina A. Sidorova, Kirill V. Lepik, Albert R. Muslimov, M. A.Trofimov, Olga S. Epifanovskaya, Vladislav S. Sergeev, Alexander D. Kulagin

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28279 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Irina A. Sidorova, e-mail: sidorovaia03@gmail.com

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28280 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Cryopreservation is a crucial step in the cell lines culturing, as well as in the production of cellular therapy products (CTP). Currently the elimination of xenogenic components of cryopreservation media is considered as a necessary condition for CTP development. The aim of this study is to compare a set of cryopreservation conditions for cell line and primary cell cultures and their effect on the viability and proliferative activity of cells.

Materials and methods

The study was carried out on the K 562 cell line and primary murine mesenchymal stromal cells (mMSC). The study included 5 groups differing in the composition of the cryopreservation medium: a) standard conditions – complete medium (CM, RPMI/®-MEM+10%FBS)+10%DMSO using a cryo container (Mr. Frosty, Nalgene, USA), b) CM+10%DMSO without use of a cryocontainer, c) commercially available xeno-free medium CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, USA), d) SSP+ solution (MacoPharma, France) with 10%DMSO, e) negative control CM without DMSO. Each sample from the group was tested in three repeats, subjected to cryopreservation for 7 days at -80°C, in three independent experiments. After thawing, the cell viability was assessed by flow cytometry with the 7AAD vital staining. The dynamics of the proliferative activity of 1×10^4 cells of each of the studied groups was analyzed by the spectrophotometric method using the alamar blue vital dye after 24, 72 and 168 hours. Statistical assesment of the groups was performed with the Man-Whitney U test.

Results

Assessment of K562 cells viability after thawing, demonstrated the median proportion of 7-AAD(+) cells in group a) of 1.5% (1.2-2.1), group b) 1.6% (1.1-1, 8) group c) 1.4% (1.2-1.9), group d) 1.4% (1.1-1.8), group e) 4.5% (2.7-5,6). Comparison of viability showed no differences between conditions a, b, c, d. The listed conditions had a statistically significant advantage over the negative control (e) (p=0.02). When assessing the viability of mMSC cells, the median proportion of 7-AAD + cells in group a) was 43.8% (16-62), b) 46.0% (22-65), c) 30.2% (17-46), d) 19.7% (16-26), e) 90.1% (86-97). The comparison revealed a statistically significant advantage of conditions a, b, c, d compared to control e (p <0.001). The number of 7AAD+ cells after conservation using SSP+ based medium was significantly lower compared to other conditions of conservation (p <0.05). Assessment of K562 cell line proliferative activity, showed an increase in the median value of the fluorescence intensity of resorufin after 168 hours compared to the value after 24 hours in group a) by 39% b) by 61% c) by 67% d) by 44% e) by 23 %. All conditions of conservation had an advantage over the negative control group (p <0.0001). The fluorescence score was significantly higher in the Cryostor group compared to standard conditions (complete medium + DMSO).

Conclusion

The performed analysis demonstrates no advantages of a cryo container use for cryopreservation of the studied cell types. Cryopreservation using Cryostor® CS10 medium and SSP+ based medium demonstrated the greatest potential in terms of maintaining the viability and proliferative activity of the studied cultures.

Keywords

Cryopreservation, cell cultures, cell products, DMSO.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28281 [VALUE] => GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-13. Comparative assessment of cryopreservation conditions for K562 and mesenchymal stromal cells cultures [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28282 [VALUE] => 2651 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2651 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28283 [VALUE] => 2652 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2652 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-13. Сравнительная оценка условий криоконсервации клеточных культур K562 и мезенхимальных стромальных клеток

Загрузить версию в PDF

Ирина А. Сидорова, Кирилл В. Лепик, Альберт Р. Муслимов, М. А. Трофимов, Ольга С. Епифановская, Владислав С. Сергеев, Александр Д. Кулагин

НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Криоконсервация клеточного материала является необходимым этапом при ведении клеточных линий, а так же при создании биомедицинских клеточных продуктов (БМКП). В настоящее время актуальной задачей является устранение компонентов ксеногенного происхождения из сред для криоконсервации клеток, входящих в состав БМКП. Целью данного исследования является сравнение различных параметров криоконсервации культур и влияние их на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток.

Материалы и методы

Исследование проводилось на клеточных линии К 562 и культуре первичных мезенхимальных стромальных клеток мыши (mMSC). В исследование включены 5 групп, различающихся по составу среды для криоконсервации: a) стандартные условия – полная среда (RPMI/®-MEM+10% FBS)+10%DMSO с использованием криоконтейнера (Mr. Frosty, Nalgene, США), б) полная среда+10%DMSO без использования криоконтейнера, в) коммерчески доступная среда CryoStor® CS10 (Stem Cell Technologies, США), г) раствор SSP+ (MacoPharma, Франция) с 10% DMSO, д) негативный контроль полная среда без добавления DMSO. Каждый образец из группы исследовался в трех повторах, подвергался заморозке в течении 7 дней при температуре -80°С, в трех независимых экспериментах. После разморозки производилась оценка жизнеспособности клеток методом проточной цитофлуориметрии с добавлением витального красителя 7AAD. Проведен анализ динамики пролиферативной активности образца клеток числом 1×10^4 в исследуемых группах спектрофотометрическим методом с использованием витального красителя alamar blue через 24, 72 и 168 ч. Статистическое сравнение групп проводилось методом Мана-Уитни.

Результаты

При оценке жизнеспособности клеточной линии К562 после разморозки, медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 1,5% (1,2-2,1), группе б) 1,6% (1,1-1,8) группе в) 1,4% (1,2-1,9), группе г) 1,4% (1,1-1,8), группе д) 4,5% (2,7-5,6). При сравнении показателей жизнеспособности не было выявлено различий между условиями а, б, в, г. Перечисленные условия обладали статистически значимым преимуществом по сравнению с негативным контролем (д) (p=0,02). При оценке жизнеспособности клеток mMSC медиана доли 7-AAD+ клеток составила в группе а) 43,8% (16-62), б) 46,0% (22-65), в) 30,2% (17-46), г) 19,7% (16-26), д) 90,1% (86-97). При сравнении выявлено статистически значимое преимущество условий а, б, в, г по сравнению с контролем д (p<0,001). Выявлено преимущество среды на основе SSP+ по сравнению с остальными условиями консервации (p<0,05). При оценке пролиферативной активности клеточной линии К562 отмечалось увеличение медианы значения интенсивности флюоресценции резоруфина через 168 ч. по сравнению со значением через 24 часов в группе а) на 39% б) на 61% в) на 67% г) на 44% д) на 23%. Все условия консервации обладали преимуществом по сравнению с группой негативного контроля (p<0,0001). Показатель флюоресценции был значимо выше в группе Cryostor по сравнению со стандартными условиями (полная среда+DMSO).

Вывод

Проведенный анализ демонстрирует отсутствие преимуществ использования криоконтейнера при заморозке исследованных клеточных типов. Криоконсервация с использованием среды Cryostor CS10 и SSP+ c добавлением DMSO продемонстрировали наибольший потенциал в отношении сохранения жизнеспособности и пролиферативной активности исследованных культур.

Ключевые слова

Криоконсервация, клеточные культуры, клеточные продукты, ДМСО.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28294
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Анастасия А. Якубова<sup>1,2</sup>, Павел М. Тальянов<sup>3</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Анастасия А. Якубова1,2, Павел М. Тальянов3, Михаил В. Зюзин3, Альберт Р. Муслимов1,2, Александр С. Тимин1

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28295 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия
3 Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28296 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась <i>in vitro</i> на клетках СТ-26.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.

Материалы и методы

Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась in vitro на клетках СТ-26.

Результаты

Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).

Выводы

Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).

Ключевые слова

Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28297 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28298 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Anastasia A. Yakubova<sup>1,2</sup>, Pavel M. Talianov<sup>3</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup> </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Anastasia A. Yakubova1,2, Pavel M. Talianov3, Mikhail V. Zyuzin3, Albert R. Muslimov1,2, Alexander S. Timin1

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28299 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Alferov Institution of Higher Education and Science Saint Petersburg National Research Academic University of the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
3 School of Physics and Engineering, ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia A. Yakubova, phone: +7 (981) 795-72-41, e-mail: yakubova.nastya@bk.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28300 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.</p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;">Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

For the effective delivering of genetic material to target cells, it’s necessary to provide sustainable conditions of transfection and protect it from intracellular microenvironment, pH, enzymes. It’s possible with a method of creating micro-sized carriers by new method of “soft lithography”, allowing to stamp polymer carriers with precise size and shape. This way passes undesirable stage of fabrication of polyelectrolyte carriers, such as synthesis of template, application of polymers on this template, deletion of the template. The process is becoming more controlled and effective, packing the cargo and the medium does not depend on affinity of the cargo to the template, charge of the polymers. In the research process hydrophobic and hydrophilic structures from 10nm to 5µm were packed, which tend to be unstable in external environment. Also sterile carriers were fabricated. The purpose of the study is to assess stability of the micro-carriers, toxicity for living system and ability to save the cargo over definite time.

Materials and methods

Silicon PDMS mold for micro-carriers fabrication was used. Stability was assessed with a confocal microscope and specrofluorometry. The following polymers were tested: polylactid PLA, Polycaprolaction PCL, polymethylmethacrylate PMMA. We used several test mediums: water, phosphate-buffered saline, human serum. Toxicity was determined with CT-26 cell line.

Results

Experimental results showed that polymer micro-carriers are not toxic for cells. Micro-carriers were able to 10 nm structures, while maintaining their medium.

Conclusions

Fabrication of micro-sized carriers by “soft lythograpy” is possibly effective for packing and saving of genetic material with its microenvironment.

Keywords

Microcarriers, micro-sized carriers, microcapsules, delivery, lythography, genetic material, polymer.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28301 [VALUE] => GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-15. Investigation of the characteristics of micro-sized carriers, using “soft lithography” for packaging of genetic material [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28302 [VALUE] => 2656 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2656 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28303 [VALUE] => 2657 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2657 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-15. Изучение свойств полимерных микрокапсул, синтезированных с помощью метода «мягкой литографии» для запаковки генетических конструкций

Загрузить версию в PDF

Анастасия А. Якубова1,2, Павел М. Тальянов3, Михаил В. Зюзин3, Альберт Р. Муслимов1,2, Александр С. Тимин1

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский национальный исследовательский Академический университет имени Ж. И. Алферова Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия
3 Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Санкт-Петербург, Россия

Для эффективной доставки генетического материала в клетки, необходимо обеспечить благоприятные условия проведения трансфекции, защитить его от внутриклеточного микроокружения, pH среды, ферментов. Это реализуемо при запаковке его в микроносители новым методом – «мягкая литография», позволяющая «отпечатывать» на мягкой силиконовой подложке с определенной микроструктурой полимерные микрокапсулы заданной величины и формы. Этот способ минует такие нежелательные стадии производства полиэлектролитных микрокапсул как: образование ядра, нанесение полимеров на поверхность ядра и последующее его удаление. Процесс производства становится более контролируемым и эффективным, при этом запаковка веществ и среды в микрокапсулы не зависит от сродства веществ к ядру, заряда носителя. В процессе исследования были успешно запакованы гидрофобные и гидрофильные структуры от 10 нм до 5 мкм, являющиеся неустойчивыми в условиях окружающей среды. Был проведен синтез стерильных микрокапсул. Цель исследования: оценить стабильность микрокапсул, токсичность для живых сред и способность удерживать материал в течении определенного времени.

Материалы и методы

Использовали силиконовую подложку для синтеза микрокапсул. Стабильность изучалась на конфокальном микроскопе, спектрофлюориметре. Полимеры: полилактид (ПЛА), поликапролактон (ПКЛ), полиметилметакрилат (ПММА). Среды, в которых исследовалась стабильность: вода, натрий-фосфатный буфер, сыворотка крови. Токсичность определялась in vitro на клетках СТ-26.

Результаты

Полимерные микрокапсулы не являются токсичными для клеток. Данные носители продемонстрировали высокую удерживающую способность, сохраняя свойства инкапсулированных биологически активных соединений в течение длительного периода времени (>7 дней).

Выводы

Таким образом, производство микрокапсул методом «мягкой литографии» может быть эффективным для инкапсулирования генетического материала с сохранением его биологической активности.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке Российского Научного Фонда (грант № 20-45-01012).

Ключевые слова

Микрокапсулы, доставка, литография, генетический материал, полимеры, носители.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28284
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Наталья Н. Сударева<sup>1,2</sup>, Ольга М. Суворова<sup>1</sup>, Дмитрий Н. Суслов<sup>3</sup>, Олег В. Галибин<sup>2</sup>, Александр Д. Вилесов<sup>1,2</sup> </p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Наталья Н. Сударева1,2, Ольга М. Суворова1, Дмитрий Н. Суслов3, Олег В. Галибин2, Александр Д. Вилесов1,2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28285 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28286 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.</p> <h3>Методы и результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО<sub>3</sub> ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО<sub>3</sub>, декстрансульфат, гепатома Зайделя.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.

Методы и результаты

Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО3 ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной.

Выводы

При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.

Ключевые слова

Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО3, декстрансульфат, гепатома Зайделя.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28287 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28288 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Natalia N. Sudareva<sup>1,2</sup>, Olga M. Suvorova<sup>1</sup>, Dmitry N. Suslov<sup>3</sup>, Oleg V. Galibin<sup>2</sup>, Alexander D. Vilesov<sup>1,2</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Natalia N. Sudareva1,2, Olga M. Suvorova1, Dmitry N. Suslov3, Oleg V. Galibin2, Alexander D. Vilesov1,2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28289 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia </p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Institute of Macromolecular Compounds, Russian Academy of Sciences, St. Petersburg, Russia
2 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 A. M. Granov Russian Research Center of Radiology and Surgical Technologies, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Natalia N. Sudareva, phone:+7 (921) 921-35-65, e-mail: nnsas@mail.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28290 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid. </p> <h3>Methods and results</h3> <p style="text-align: justify;"> The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO<sub>3</sub> cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks. </p> <img alt="Sudareva-fig01.jpg" src="/upload/medialibrary/381/sudareva_fig01.jpg" title="Sudareva-fig01.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO<sub>3</sub>+DexS+DOX </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO<sub>3</sub> carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Doxorubicin, drug delivery system, CaCO<sub>3</sub>, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma. </p> <br> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Doxorubicin (DOX) is a water-soluble anthracycline antibiotic with high anti-cancer efficacy. Reducing the concentration of DOX in the blood below the cardiotoxic level during therapy can be achieved by forming a depot containing DOX delivery systems with prolonged drug release. For these purposes, calcium carbonate porous vaterites coated with polyanion dextran sulfate (DexS) were used. The submicron size of the carriers does not allow them to be freely included in the bloodstream. The toxic drug spreads through the body only after it enters the blood as a result of release from the delivery systems (DS). Intraperitoneal administration of DOX-containing DS to rats with transplanted Seidel’s hepatoma allowed us to evaluate the effective concentration of DOX, which inhibits tumor growth and reduces the volume of ascitic fluid.

Methods and results

The dynamics of DOX intake into the blood of healthy rats after intraperitoneal administration of DOX in DS based on submicron DexS-coated porous CaCO3 cores was determined by HPLC. The reaction of experimental rats with Seidel’s hepatoma inoculated within 21 days after DS administration was controlled on the basis of physical examination results, as well as autopsy of rats.

Results

It was shown that intraperitoneal administration of 2 mg of DOX in a DS in rats increases the life expectancy by 1.75 times and reduces the volume of ascites in experimental animals by half. A more effective suppression of the tumor can be expected by increasing the dose of DOX to 4 mg per animal. The dynamics of the appearance of DOX in blood plasma after intraperitoneal administration of the drug in DS to healthy rats was compared with free DOX dynamics. 2 days after the administration of free DOX to rats, it disappears from the blood plasma. As can be seen from Figure 1, the use of DS allows us to prolong the presence of the drug in the blood. Porous carbonate cores coated with dextran sulfate showed DOX release at theconcentrations below cardiotoxic within two weeks.

Sudareva-fig01.jpg

Figure 1. DOX concentrations in rats’ plasma after intraperitoneal administration. 1 – free DOX; 2 – CaCO3+DexS+DOX

Conclusion

No negative reactions were detected in rats using DS, which was confirmed by the behavior and physical condition of the experimental animals, as well as the results of autopsy. Therefore, the studied DS based on CaCO3 carbonate cores coated by DexS can be used for prolonged regional delivery of the DOX antitumor drug.

Keywords

Doxorubicin, drug delivery system, CaCO3, dextran sulfate, Seidel’s hepatoma.


[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28291 [VALUE] => GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-14. CaCO3 dextran sulfate-coated vaterites as a system for regional doxorubicin administration [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28292 [VALUE] => 2653 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2653 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28293 [VALUE] => 2654 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2654 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-14. СаСО3 ватериты, покрытые декстрансульфатом, как системы для регионарного введения доксорубицина

Загрузить версию в PDF

Наталья Н. Сударева1,2, Ольга М. Суворова1, Дмитрий Н. Суслов3, Олег В. Галибин2, Александр Д. Вилесов1,2

1 Институт высокомолекулярных соединений РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Российский научный центр радиологии и хирургических технологий им. акад. А. М. Гранова, Санкт-Петербург, Россия

Доксорубицин (ДОХ) – водорастворимый антрациклиновый антибиотик, обладающий высокой противораковой эффективностью. Уменьшения концентрации ДОХ в крови ниже кардиотоксического уровня в процессе терапии можно добиться, формируя депо, содержащее системы доставки ДОХ с пролонгированным высвобождением лекарства. Для этих целей использовали кальций карбонатные пористые ватериты, допированные полианионом декстран сульфатом (ДекС). Субмикронные размеры носителей не позволяют свободно включаться им в кровеносное русло. Распространяется токсическое лекарство по организму только после попадания в кровь в результате высвобождения из систем доставки (СД). Внутрибрюшинное введение крысам с перевитой гепатомой Зайделя ДОХ-содержащих систем доставки позволило оценить эффективную концентрацию ДОХ, тормозящую рост опухоли и уменьшающую объем асцитной жидкости.

Методы и результаты

Динамику поступления ДОХ в кровь здоровых крыс после внутрибрюшинного введения ДОХ в СД состоящих из пористых СаСО3 ядер, покрытых ДекС, определяли при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Реакцию экспериментальных крыс с перевитой гепатомой Зайделя контролировали на основании результатов физикального осмотра и аутопсии крыс в течение 21 дня после введения СД. Показано, что внутрибрюшное введение в крыс с привитой гепатомой Зайделя 2 мг ДОХ в системе доставки на базе допированных декстрансульфатом пористых кальций карбонатных ядер увеличивает в 1,75 раз продолжительность жизни и вдвое уменьшает объем асцита у экспериментальных животных. Более эффективного подавления опухоли можно ожидать, увеличивая дозу ДОХ до 4 мг на животное. Динамику появления ДОХ в плазме крови после внутрибрюшинного введения здоровым крысам лекарства в СД сравнивали с динамикой свободного ДОХ, который через 2 дня после введения крысам исчезает из плазмы крови. Как видно из рис. 1, использование СД позволяет продлевать присутствие лекарства в крови. Пористые карбонатные ядра, покрытые декстрансульфатом, высвобождают ДОХ в течение 2 недель в концентрациях, ниже кардиотоксичной.

Выводы

При использовании систем доставки ДОХ на базе кальций карбонатных пористых ядер, покрытых декстрансульфатом, негативных реакций у крыс не обнаружено, что подтверждено поведением и физическим состоянием подопытных животных, а также результатами аутопсии. Следовательно, исследованные системы доставки могут быть использованы для пролонгированной регионарной доставки противоопухолевого препарата ДОХ.

Ключевые слова

Доксорубицин, системы доставки лекарств, СаСО3, декстрансульфат, гепатома Зайделя.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28234
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Алена И. Шакирова<sup>1</sup>, Кирилл В. Лепик<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1</sup>, Владислав С. Сергеев<sup>1</sup>, Т. Р. Карпов<sup>1</sup>,
К. И. Аношкин<sup>2</sup>, Марина О. Попова<sup>1</sup>, Борис Фезе<sup>1,3</sup>, Александр Д. Кулагин<sup>1</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Алена И. Шакирова1, Кирилл В. Лепик1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Т. Р. Карпов1, К. И. Аношкин2, Марина О. Попова1, Борис Фезе1,3, Александр Д. Кулагин1

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28235 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия<br> <sup>3</sup> Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия
3 Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28236 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе <i>CCR5</i> после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе <i>CCR5</i> оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена <i>CCR5</i> дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена <i>CCR5</i>, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i>, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена <i>CCR5</i> не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена <i>CCR5</i> была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе CCR5 после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN.

Материалы и методы

Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе CCR5 оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена CCR5 дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР.

Результаты

Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена CCR5, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена CCR5, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена CCR5 не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена CCR5 была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN.

Заключение

Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома.

Благодарности

Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk.

Ключевые слова

TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28237 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28238 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Alyona I. Shakirova<sup>1</sup>, Kirill V. Lepik<sup>1</sup>, Albert A. Muslimov<sup>1</sup>, Vladislav S. Sergeev<sup>1</sup>, T. R. Karpov<sup>1</sup>, K. I. Anoshkin<sup>2</sup>, Marina O. Popova<sup>1</sup>, Boris Fehse<sup>1,3</sup>, Alexander D. Kulagin<sup>1</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Alyona I. Shakirova1, Kirill V. Lepik1, Albert A. Muslimov1, Vladislav S. Sergeev1, T. R. Karpov1, K. I. Anoshkin2, Marina O. Popova1, Boris Fehse1,3, Alexander D. Kulagin1

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28239 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia<br> <sup>3</sup> Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 RM Gorbacheva Research Institute, Pavlov University, St. Petersburg, Russia
2 Research Center for Medical Genetics, Moscow, Russia
3 Research Department of Cell and Gene Therapy, University Medical Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany


Correspondence:
Dr. Alena Shakirova, phone: +7 (911) 733-51-48, e-mail: alyona.i.shakirova@gmail.com

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28240 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the <i>CCR5</i> locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the <i>CCR5</i> locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired <i>CCR5</i> alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> The total average efficiency of the <i>CCR5</i> gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the <i>CCR5</i> gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the <i>CCR5</i> gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the <i>CCR5</i> knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN. </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC. </p> <br> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Targeted insertion of protein-coding sequences regions into the genome of hematopoietic stem cells (HSCs) mediated by engineered nucleases represents a promising platform for gene therapy of monogenic diseases. Homologous recombination (HR) represents the key mechanism for the introduction of genetic material into the double-stranded breaks (DSBs) generated by the targeted nuclease. Increasing the HR efficiency may enable the insertion of large DNA fragments into the HSC genome more efficiently upon delivery of donor repair templates by both viral and non-viral carriers. The mechanisms of DNA damage-induced innate immune response represent an important factor influencing the outcomes of DSB formation induced by engineered nucleases. The aim of this work is to evaluate the effects of adding small-molecule inhibitors of TLR9/AIM2/cGAS, STING and caspase antagonists A151, H151, and Z-VAD-FMK to cultures of primary human HSCs on the HR rate at the CCR5 locus after CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection.

Materials and methods

Uridine-depleted CCR5-Uco-TALEN mRNA was synthesized by Trilink. Magnetic selection of CD34 + HSCs from the bone marrow of healthy donors was performed using the CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). After the activation phase of cultivation, HSCs were transfected with 25 µg/ml CCR5-Uco-TALEN mRNA using Gene Pulser Xcell (BioRad) device. After transfection, HSCs were cultured for 24 hours at 32°C in a StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech) medium. Small molecule inhibitors A151, H151 and FMK were added at concentrations 4 mkg/ml, 0.5 mkg/ml, and 25 mkg/ml respectively at 3 hours before the electroporation. The proportion of non-homologous end joining (NHEJ) events at the CCR5 locus was estimated by digital droplet PCR (ddPCR) on a QX200 System (Bio-Rad) according to the previously described protocol (Mock et al., 2015). In order to count the burden of HR-repaired CCR5 alleles the copy number of the reference gene EPOR was additionally estimated by the method of multiplex ddPCR (Schwarze et al., 2021). The difference between the copy number of the reference gene and the sum of HR-repaired and wild-type alleles was considered the proportion of alleles repaired by HR.

Results

The total average efficiency of the CCR5 gene knockout, calculated as the sum of the NHEJ- and HR-repaired alleles, ranged from 9 to 53.5%. The addition of a FMK small molecule to the HSCs culture significantly affected not only the CCR5 gene knockout overall efficiency (53.5%), but the frequency of both NHEJ (27.2%) and HR (26.3%) as well. The addition of H151 did not affect the overall efficiency of the CCR5 gene knockout (33.5%), as well as the ratio of NHEJ (18.3%) and HR (15.2%) events in the samples. In the presence of A151 small molecule, the CCR5 knockout efficiency was significantly reduced (9%), and 95.6% of knockout alleles were the result of NHEJ events at DSB formed by CCR5-Uco-TALEN.

Conclusion

The small molecules contribution to the stimulation of HR-mediated DSB repair after the CCR5-Uco-TALEN mRNA transfection of primary hematopoietic stem cells was studied. Z-VAD-FMK seems to be the most promising.

Acknowledgments

K.V. Lepik thanks the Russian Foundation for Basic Research for the support, grant No. 19-29-04025mk.

Keywords

TALEN, homology directed repair, STING inhibitors, HSC.


[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28241 [VALUE] => GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-09. Testing of small molecules for homology-directed repair stimulation at CCR5 locus during the transfection of primary human hematopoietic stem cells by CCR5-Uco-TALEN mRNA [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28242 [VALUE] => 2643 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2643 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28243 [VALUE] => 2644 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2644 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-09. Тестирование малых молекул для стимуляции процесса гомологичной репарации концов двуцепочечных разрывов ДНК в локусе CCR5 при трансфекции гемопоэтических стволовых клеток человека мРНК CCR5-Uco-TALEN

Загрузить версию в PDF

Алена И. Шакирова1, Кирилл В. Лепик1, Альберт Р. Муслимов1, Владислав С. Сергеев1, Т. Р. Карпов1, К. И. Аношкин2, Марина О. Попова1, Борис Фезе1,3, Александр Д. Кулагин1

1 НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р. М. Горбачевой, Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
2 Медико-генетический научный Центр им. Н. П. Бочкова, Москва, Россия
3 Отдел клеточной и генной терапии, Департамент трансплантации стволовых клеток, Университетский медицинский центр Гамбург-Эппендорф, Гамбург, Германия

Таргетные инсерции в геном гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) участков белок-кодирующих последовательностей с последующей аутологичной трансплантацией таких клеток является показанием для генной терапии целого ряда моногенных заболеваний человека. Беспрецендентной точностью в этом плане обладает генная терапия с использованием современных инструментов редактирования генома (RNA-guided инженерные нуклеазы, TALEN, ZFN). При их применении процесс протекает за счет так называемого гомологичной репарации (ГР) концов двуцепочечного разрыва (ДР) ДНК, образуемого нуклеазой. Повышение эффективности ГР является актуальной задачей, решение которой позволит с большей эффективностью производить вставки крупных участков ДНК в геном ГСК при доставке донорской репарационной матрицы как вирусными, так и невирусными носителями. Механизмы врожденного иммунного ответа, вызванного повреждением ДНК, представляют собой важный фактор, влияющий на результаты образования ДР, индуцированных инженерными нуклеазами. Целью данной работы является оценка влияния добавления низкомолекулярных ингибиторов TLR9/AIM2/cGAS, STING и антагонистов каспаз A151, H151 и Z-VAD-FMK к культурам первичных ГСК человека на частоту ГР в локусе CCR5 после трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN.

Материалы и методы

Синтез предварительно кодон-опимизированной посредством деплеции уридина мРНК CCR5-Uco-TALEN был осуществлен компанией Trilink (США). Магнитную селекцию CD34+ ГСК из костного мозга здоровых доноров проводили с помощью набора CD34 MicroBead kit (Miltenyi Biotec). Далее, после активирующей фазы культивирования, осуществляли трансфекцию ГСК мРНК CCR5-Uco-TALEN на приборе Gene Pulser Xcell (BioRad). После трансфекции ГСК в течение суток культивировали при 32°С в среде StemMACS HSC Expansion Media XF (Miltenyi Biotech). Низкомолекулярные ингибиторы A151, H151 и FMK добавляли в концентрациях 4 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, и 25 мкг/мл соответственно за 3 часа до электропорации. Долю событий негомологичного (НГР) сшивания концов разрыва в локусе CCR5 оценивали методом цифровой капельной ПЦР по описанному ранее протоколу (Mock et al., 2015) на приборе Bio-Rad QX200. Для оценки аллельной нагрузки репарированных на основе гомологии разрывов дополнительно методом мультиплексной цифровой капельной ПЦР оценивали количество копий референсного гена EPOR и копий гена CCR5 дикого типа (Schwarze et al., 2021). Разницу между количеством копий референсного гена и суммой аллелей НГР и дикого типа считали долей аллелей, репарированных ГР.

Результаты

Согласно полученным результатам суммарная средняя эффективность нокаута гена CCR5, рассчитанная как сумма репарированных НГР и ГР аллелей, составляла от 9 до 53,5%. Добавление в культуру ГСК малой молекулы FMK значительно отразилось на общей эффективности нокаута гена CCR5, которая в этом образце была максимальной и составляла 53,5%, причем увеличилась частота как НГР (27,2%), так и ГР (26,3%) событий по сравнению с контролем. Добавление Н151 на общей эффективности нокаута гена CCR5 не отразилось (33,5%), причем это касалось также соотношения НГР (18,3%) и ГР (15,2%) аллелей в образцах. В образцах ДНК, выделенной из клеток, культивируемых в присутствии A151, эффективность нокаута гена CCR5 была значительно снижена и составила 9%, причем 95,6% нокаутированных аллелей были результатом НГР в локусах разрывов, формируемых CCR5-Uco-TALEN.

Заключение

Выполнено тестирование эффективности добавления малых молекул в плане стимуляции ГР в первичных гемопоэтических стволовых клетках человека при трансфекции мРНК CCR5-Uco-TALEN. FMK представляется наиболее перспективной из них в плане разработки генной терапии на основе комбинации донорской матрицы и инструментов редактирования генома.

Благодарности

Лепик К.В. благодарит за поддержку Российский фонд фундаментальных исследований, грант No. 19-29-04025mk.

Ключевые слова

TALEN, гомологичная репарация, ингибиторы STING, гемопоэтические стволовые клетки.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28224
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Анна С. Рогова<sup>1</sup>, Анастасия С. Букреева<sup>1</sup>, Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Александр С. Тимин<sup>1,2</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Анна С. Рогова1, Анастасия С. Букреева1, Алиса С. Постовалова1, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28225 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28226 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для <i>in vivo</i> визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие). </p> <h3>Заключение</h3> <p style="text-align: justify;"> Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала <i>in vivo</i>. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация <i>in vivo</i>. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей.

Материалы и методы

В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для in vivo визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе.

Результаты

В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие).

Заключение

Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала in vivo.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация in vivo.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28227 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28228 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Anna S. Rogova<sup>1</sup>, Anastasia S. Bukreeva<sup>1</sup>, Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Alexander S. Timin<sup>1,2</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Anna S. Rogova1, Anastasia S. Bukreeva1, Alisa S. Postovalova1, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28229 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia </p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Anna S. Rogova, phone: +7 (904) 601-79-55, e-mail: anna.aroo@mail.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28230 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for <i>in vivo</i> fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material <i>in vivo</i>.</p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;">The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, <i>in vivo</i> visualization.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Various methods of gene therapy demonstrate great prospects in the treatment of various hereditary, infectious and oncological diseases. However, now, the effectiveness of their use is limited by the lack of effective and safe methods of delivering genetic material to cells. To solve this problem, a method consisting in the delivery of genetic material using polymer particles can be used. One of the important advantages of this method is the structure of the capsule, which allows it to protect the contents from the aggressive effects of biological environments of the body. However, for further use of these carriers in clinical practice, it is necessary to study in detail their bio-distribution after introduction into the body. The purpose of this work is to study the bio-distribution of polymer particles on mouse model by various methods, as well as histopathological analysis of tissues after the introduction of carriers.

Materials and methods

In this work, polymer particles obtained by applying polyarginine and dextran sulfate (PARG/DEXS) using Layer-by-Layer technology to calcium carbonate nuclei were used. The nuclei were obtained by co-precipitation of aqueous solutions of salts: sodium carbonate and calcium chloride with the addition of fluorescent dyes FITC and Cy5, as well as magnetite particles. The synthesized carriers were evaluated by light and confocal microscopy, as well as dynamic light scattering. Then the particles were injected into the tail vein of the mice, after which their organs (heart, lungs, liver, spleen and kidneys) were analyzed on the IVIS Spectrum CT device for in vivo fluorescence imaging on days 2, 5, 7, 10 and 15. The data of histological sections were also obtained using imaging methods on a confocal laser scanning microscope (CLSM) and a light microscope.

Results

The results obtained by the methods of CLSM (particles labeled with FITC), light microscopy (labeled with magnetite) and IVIS bioluminograph (labeled with Cy5) correlate with each other, but the assessment of biodistribution using particles labeled with magnetite is not optimal due to the characteristics of the liver and spleen tissue. After administration, the particles are found in large quantities in the lungs, presumably due to the small size of the capillaries and in the liver. Then there is a general decrease in the number of particles in the organs. On day 10, the number of particles in the lungs becomes minimal, while a sufficient amount is recorded in the liver. Also, on days 10 and 15, particles were registered in the spleen. Histopathological analysis illustrates the absence of pathological changes when using polymer micron particles. There is a significant accumulation of particles in tissues with a highly developed reticuloendothelial system (liver, spleen and lungs).

Conclusion

The presented data allow us to better understand the distribution of particles in the animal’s body over a long time and provide information about which organs can potentially be delivered therapeutic agents using this delivery system. In the future, it is planned to conduct experiments on the delivery of clinically relevant genetic material in vivo.

Acknowledgments

The work was carried out with the support of the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Polymer carriers, delivery of genetic material, bio-distribution, histological examination, in vivo visualization.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28231 [VALUE] => GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-08. Study of the biodistribution of polymer carriers for further use in gene therapy [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28232 [VALUE] => 2641 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2641 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28233 [VALUE] => 2642 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2642 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-08. Изучение биораспределения полимерных носителей для дальнейшего использования в генной терапии

Загрузить версию в PDF

Анна С. Рогова1, Анастасия С. Букреева1, Алиса С. Постовалова1, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Различные методы генной терапии имеют большие перспективы при лечении различных наследственных, инфекционных и онкологических заболеваний. Тем не менее, в настоящее время эффективность их применения ограничена отсутствием действенных и безопасных методов доставки генетического материала в клетки. Для решения этой проблемы может быть использован следующий метод, заключающийся в доставке генетического материала с использованием полимерных частиц. Одним из важных преимуществ данного метода является структура капсулы, позволяющая обеспечить защиту содержимого ее полости от агрессивного воздействия биологических сред организма. Однако для дальнейшего использования данных носителей в клинической практике необходимо детально изучить их биораспределение после введения в организм. Цель исследования: изучение биораспределения полимерных частиц в организме мыши различными методами, а также гистопатологический анализ тканей после введения носителей.

Материалы и методы

В данной работе использовались полимерные частицы, полученные путем нанесения полиаргинина и сульфата декстрана (PARG/DEXS) по технологии Layer-by-Layer на ядра из карбоната кальция. Ядра были получены путем соосаждения водных растворов солей: карбоната натрия и хлорида кальция с добавлением флуоресцентных красителей FITC и Cy5, а также частиц магнетита. Синтезированные носители были оценены методами световой и конфокальной микроскопии, а также динамического светорассеяния. Далее частицы вводились мышам в хвостовую вену, после чего на 2, 5, 7, 10 и 15 день анализировались их органы (сердце, легкие, печень, селезенка и почки) на приборе для in vivo визуализации флуоресценции – IVIS Spectrum CT. Также были получены данные гистологических срезов с помощью методов визуализации на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе (КЛСМ) и световом микроскопе.

Результаты

В данной работе результаты, полученные методами КЛСМ (частицы, меченные FITC), световой микроскопии (меченные магнетитом) и биолюминографе IVIS (меченные Cy5) коррелируют между собой, однако оценка биораспределение с помощью частиц, меченных магнетитом, не является оптимальной из-за особенностей ткани печени и селезенки. После введения частицы обнаруживаются в большом количестве в легких, предположительно из-за малого размера капилляров и в печени. Далее замечается общее снижение количества частиц в органах. В легких на 10 день количество частиц становится минимальным, в то время как в печени регистрируется достаточное количество. Также, на 10 и 15 день частицы были зарегистрированы в селезенке. Общая картина иллюстрирует отсутствие патологических изменений при использовании полимерных микронных частиц. Наблюдается значительное накопление частиц в тканях с высокоразвитой ретикулоэндотелиальной системой (печень, селезенка, а также легкие).

Заключение

Представленные данные позволяют лучше понять распределение частиц в организме животного в течение длительного времени и предоставить информацию о том, в какие органы потенциально можно доставлять терапевтические агенты с помощью данной системы доставки. В дальнейшем запланированы проведение экспериментов по доставке клинически релевантного генетического материала in vivo.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Полимерные носители, доставка генетического материала, биораспределение, гистологическое исследование, визуализация in vivo.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28174
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Анастасия С. Букреева<sup>1</sup>, Анна С. Рогова<sup>1</sup>, Татьяна В. Машель<sup>3</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Александр С. Тимин<sup>1,2</sup>,
Альберт Р. Муслимов<sup>1,2</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Анастасия С. Букреева1, Анна С. Рогова1, Татьяна В. Машель3, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28175 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28176 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.</p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.</p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;">В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.</p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.

Материалы и методы

В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.

Результаты

Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.

Выводы

В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.

Ключевые слова

Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28177 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28178 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Anastasia S. Bukreeva<sup>1</sup>, Anna S. Rogova<sup>1</sup>, Tatiana V. Machel<sup>3</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Alexander S. Timin<sup>1,2</sup>, Albert R. Muslimov<sup>1,2</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Anastasia S. Bukreeva1, Anna S. Rogova1, Tatiana V. Machel3, Darya R. Akhmetova1, Alexander S. Timin1,2, Albert R. Muslimov1,2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28179 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> ITMO University, St.Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 ITMO University, St.Petersburg, Russia


Correspondence:
Anastasia S. Bukreeva, phone: +7 (912) 578-67-96, email: ana.bukreevaa@gmail.com

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28180 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The <i>in vitro</i> experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency. </p> <br> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Currently, gene therapy is a promising approach to the treatment of a wide range of diseases. Low efficiency of genetic material delivery is the main limiting factor for development of gene therapy, since the use of “naked” nucleic acids does not provide the desired result. Polymeric carriers protect the genetic material during its transport to the target cells, but it is also necessary to protect it after its entrance to the cell. Background activity of nucleases is considered a significant obstacle to efficient gene delivery using non-viral vectors. To resolve this problem, it is necessary to select an inhibitor that protects the genetic material from degradation and has a positive effect on the efficiency of transfection. The aim of this work was to evaluate the effectiveness of the peptide DNase II inhibitor (SLRLLQWFLWAC) in increasing the efficiency of transfection of mammalian cells.

Materials and methods

In this work, polyelectrolyte particles have been used, being obtained by applying layers of differently charged polymers (Polyarginine/Dextran sulfate) on calcium carbonate cores prepared in advance by co-precipitation of aqueous sodium carbonate solutions and calcium chloride salts. The model genetic material was plasmid DNA encoding green fluorescent protein. Variants of pDNA encapsulation into the core, between polymer layers and simultaneous packing into the core and into the layer were considered. The peptide inhibitor was added to the DNA at the 1:1 ratio. The in vitro experiments were carried out with HEK 293 cell culture. Different cell inoculation techniques were tested with the particles: they were added either to adherent cells, or were incubated with suspended cells, followed by seeding on culture plastic surface. Effects of fetal bovine serum (FBS) upon transfection efficiency was studied. The particles were added to the cells at a ratio of 100:1. Efficiency of transfection was assessed qualitatively by means of laser scanning confocal microscopy as well as quantitatively, using flow cytometry.

Results

Analysis of the experimental results showed that the use of DNase II peptide inhibitor significantly increases the efficiency of transfection. The best results were obtained by incorporating genetic material both into the core and as a layer of a polymer particle. We have found that addition of particles to adherent cells, as well as usage of FBS-free media exerted positive effects upon the level of transfection.

Conclusions

In summary, the effect of a peptide inhibitor of DNase II upon transfection efficiency was investigated, and optimal conditions were determined for inoculation of mammalian cells with the particles containing genetic material.

Acknowledgments

This work was supported by the project of the Russian Science Foundation No. 19-75-10010.

Keywords

Gene therapy, DNase inhibitor, transfection efficiency.


[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28181 [VALUE] => GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-03. Increasing transfection level during delivery of genetic material by polymer carriers of complex composition [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28182 [VALUE] => 2631 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2631 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28183 [VALUE] => 2632 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2632 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-03. Повышение уровня трансфекции при доставке генетического материала полимерными носителями комплексного состава

Загрузить версию в PDF

Анастасия С. Букреева1, Анна С. Рогова1, Татьяна В. Машель3, Дарья Р. Ахметова1, Александр С. Тимин1,2, Альберт Р. Муслимов1,2

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время генная терапия является перспективным направлением для лечения широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для развития генной терапии является проблема эффективной доставки генетического материала, так как использование «голых» нуклеиновых кислот не дает желаемого результата. Полимерные носители защищают генетический материал во время транспортировки к клеткам-мишеням, однако необходимо также защитить его и после попаданию в клетку. Фоновая активность нуклеаз считается значительным препятствием для эффективной доставки генов с использованием невирусных векторов. Для решения данной проблемы необходимо подобрать ингибитор, защищающий генетический материал от деградации и положительно влияющий на эффективность трансфекции. Целью данной работы является оценка эффективности пептидного ингибитора ДНКаз II (SLRLLQWFLWAC) на увеличение уровня трансфекции клеток млекопитающих.

Материалы и методы

В работе были использованы полиэлектролитные носители, полученные нанесением по технологии Layer-by-Layer слоев разнозаряженных полимеров (Polyarginine/Dextran sulfate) на ядра из карбоната кальция, предварительно полученные путем соосаждения водных растворов солей карбоната натрия и хлорида кальция. Модельным генетическим материалом являлась плазмидная ДНК, кодирующая зеленый флуоресцентный белок. Были рассмотрены варианты инкапсуляции пДНК в ядро, между полимерными слоями и одновременная запаковка в ядро и в слой. Пептидный ингибитор добавляли к пДНК в соотношении 1:1. Эксперименты ставились на клеточной культуре НЕК 293. Были рассмотрены разные способы засева частиц к клеткам: их добавляли либо к уже адгезированным клеткам, либо частицы предварительно инкубировали с клетками, после чего их засевали на культуральных пластик. Было изучено влияние добавления эмбриональной бычьей сыворотки (FBS) на эффективность трансфекции. Частицы добавлялись к клеткам в соотношении 100:1. Эффективность трансфекции оценивалась качественно на лазерном сканирующем конфокальном микроскопе и количественно при помощи проточной цитометрии.

Результаты

Анализ результатов экспериментов показал, что использование пептидного ингибитора ДНКазы II значительно повышает эффективность трансфекции. Наилучший результат был получен при включении генетического материала одновременно в ядро, и в качестве слоя полимерной частицы. Было выявлено, что добавление частиц к адгезированным клеткам, а также использование среды, не содержащей FBS, положительно влияет на уровень трансфекции.

Выводы

В результате работы было исследовано влияние пептидного ингибитора ДНКазы II на эффективность трансфекции, а также выявлены оптимальные условия засева частиц, содержащих генетический материал, к клеткам млекопитающих.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда 19-75-10010.

Ключевые слова

Генная терапия, ингибитор ДНКаз, эффективность трансфекции.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28164
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин</p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28165 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28166 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3). </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i>. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате. </p> <p style="text-align: justify;"> Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение in vitro и in vivo трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике.

Материалы и методы

Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность.

Результаты

В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3).

Выводы

Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах in vitro и in vivo. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате.

Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а.

Ключевые слова

Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28167 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28168 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Tatyana N. Belovezhets, Andrey A. Gorchakov, Sergey V. Kulemzin

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28169 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br>Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Tatyana Belovezhets, phone: +7 (903) 049-44-71, e-mail: ochotanya@gmail.com

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28170 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared <i>in vitro</i> and<i> in vivo</i> activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. <i>Cg-Prkdc<sup>scid</sup>Il2rg<sup>tm1Wjl</sup></i>/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3). </p> <img alt="Belovezhets-fig01.jpg" src="/upload/medialibrary/e7c/belovezhets_fig01.jpg" title="Belovezhets-fig01.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation </p> <img alt="Belovezhets-fig02.jpg" src="/upload/medialibrary/99c/belovezhets_fig02.jpg" title="Belovezhets-fig02.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test </p> <img alt="Belovezhets-fig03.jpg" src="/upload/medialibrary/0b6/belovezhets_fig03.jpg" title="Belovezhets-fig03.jpg"> <p class="Table_sign"> Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment <i>in vivo</i> </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> CAR T-cells obtained display pronounced activity both <i>in vitro</i> and <i>in vivo </i>warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs. </p> <p style="text-align: justify;"> This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab. </p> <br> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Impressive clinical activity of CD19-specific CAR T-cell therapy has bolstered active research in the field of adoptive cellular immunotherapy of cancer. To date, FDA has approved 5 CAR T-cell products. However, it becomes clear that further improvements are needed to ensure CAR T-cell homing and long-term persistence, broader range of targetable epitopes, reduced costs, and switching to an allogeneic format. In the present work, we compared in vitro and in vivo activities of three different CD20-specific CARs vs a reference FMC63-based CD19-specific CAR (Kymriah), the first CAR approved for clinical practice.

Materials and methods

We produced lentiviral constructs encoding two CARs based on the mAbs 1F5 and Leu16, as well as the CAR based on the sequence of a fully human mAb ofatumumab (2F2). These constructs differ only in the antigen-recognition domain. Based on these constructs and T cells obtained from peripheral blood of healthy donors, the CAR T-cells were produced and their performance was compared using several assays.

Results

First, we used FACS to measure surface expression of CARs on T-cells. Then, we observed that all CAR T-cells displayed similar level of cytotoxicity in a 4-hour co-incubation test against Nalm6 target cells expressing CD20 (Fig. 1). The proliferation rate of CAR T-cells with antigen-recognition regions from 1F5 and FMC63 was approximately 1.5 times higher than that of other CAR T-cells. In the replating assay, CAR T-cells based on 1F5 and Leu16 likewise showed more promising results (Fig. 2). All the CAR T-cells obtained controlled xenografted tumors in NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ mice significantly better than irrelevant CAR T-cells (specific to PSMA) (Fig. 3).

Belovezhets-fig01.jpg

Figure 1. Level of momentary cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ after 4 hours of incubation

Belovezhets-fig02.jpg

Figure 2. Level of cytotoxicity of CAR-T cells against Nalm6-CD20+ in replating test

Belovezhets-fig03.jpg

Figure 3. CAR-T cells effectively control the progression of B-ALL in a model experiment in vivo

Conclusion

CAR T-cells obtained display pronounced activity both in vitro and in vivo warranting their analysis in the clinic as well as the design and pre-clinical analysis of bi-specific CARs.

This study was supported by the RFBR grant №19-415-543015 р_мол_а.

Keywords

Т-cells, chimeric antigen receptor, CAR T-cell therapy, ofatumumab.


[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28171 [VALUE] => GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-02. Ofatumumab-based CD20-specific CARs: in vitro and in vivo activity [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28172 [VALUE] => 2629 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2629 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28173 [VALUE] => 2630 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2630 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-02. Доклинические исследования СD20-специфического Car-T клеточного препарата

Загрузить версию в PDF

Татьяна Н. Беловежец, Андрей А. Горчаков, Сергей В. Кулемзин

Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия

Выраженная клиническая активность CD19-специфичной CAR T-клеточной терапии обеспечила активные исследования в области адоптивной клеточной иммунотерапиии онкологических заболеваний человека и привела к одобрению FDA 5 препаратов. Вместе с тем становится понятно, что необходимо дальнейшее улучшение данного подхода, а именно, обеспечение хоминга и долговременной персистенции, расширение спектра мишеней, снижение стоимости, переход к аллогенному формату. В настоящей работе было проведено сравнение in vitro и in vivo трех различных CD20-специфичных CAR T-клеток с референсным CD19-специфическим CAR на основе антитела FMC63 (Kymriah), первым допущенным к клинической практике.

Материалы и методы

Были получены лентивирусные конструкции, кодирующие CAR с антиген-распознающими доменами от мышиных антител 1F5, Leu16 и человеческого антитела – офатумумаб (2F2). Полученные конструкции отличались только антигенраспознающим доменом. Затем были получены CAR T-клетки из периферических Т-клеток здорового донора и проверена их активность.

Результаты

В первую очередь был оценен уровень экспрессии всех полученных CAR на поверхности клеток при помощи проточной цитометрии. Полученные CAR T-клетки проявляли одинаковую цитотоксичность в 4-х часовом тесте против клеток-мишеней линии Nalm6, эктопически экспрессирующих CD20 (рис. 1). Скорость пролиферации CAR T-клеток с антигенраспознающими районами от 1F5 и FMC63 была примерно в 1,5 раза выше всех остальных CAR T-клеток. В тесте на повторяющуюся цитотоксичность CAR T-клетки на основе 1F5 и Leu16 показали более перспективные результаты (рис. 2). Все полученные CAR T-клетки контролировали ксенотрансплантированую опухоль в мышах линии NOD. Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ достоверно лучше, чем нерелевантные CAR T-клетки (специфичные к PSMA) (рис. 3).

Выводы

Таким образом, все полученные CAR Т-клетки проявляют выраженную активность в модельных экспериментах in vitro и in vivo. Основываясь на полученных данных, можно сделать прогноз о перспективности применения таких CAR T-клеток в клинике в моно- или биспецифичном формате.

Исследование было поддержано грантом РФФИ №19-415-543015 р_мол_а.

Ключевые слова

Т-клетки, химерные антигенные рецепторы, терапия CAR T-клетками, офатумумаб.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28184
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Антон Н. Чикаев<sup>1</sup>, Сергей В. Кулемзин<sup>1</sup>, Ольга Ю. Волкова<sup>1</sup>, Татьяна Н. Беловежец<sup>1</sup>, Анастасия В. Семенова<sup>2</sup>, Сергей С. Зайнутдинов<sup>2</sup>, Антонина А. Гражданцева<sup>2</sup>, Галина В. Кочнева<sup>2</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Антон Н. Чикаев1, Сергей В. Кулемзин1, Ольга Ю. Волкова1, Татьяна Н. Беловежец1, Анастасия В. Семенова2, Сергей С. Зайнутдинов2, Антонина А. Гражданцева2, Галина В. Кочнева2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28185 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия<br> <sup>2</sup> Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия
2 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28186 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию <i>in vivo</i> модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей. </p> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию in vivo модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии.

Материалы и методы

Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки.

Результаты

Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей.

Выводы

В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044.

Ключевые слова

Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28187 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28188 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Anton N. Chikaev<sup>1</sup>, Sergey V. Kulemzin<sup>1</sup>, Olga Yu. Volkova<sup>1</sup>, Tatyana N. Belovezhets<sup>1</sup>, Anastasiya V. Semenova<sup>2</sup>, Sergey S. Zainutdinov<sup>2</sup>, Antonina A. Grazhdantseva<sup>2</sup>, Galina V. Kochneva<sup>2</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Anton N. Chikaev1, Sergey V. Kulemzin1, Olga Yu. Volkova1, Tatyana N. Belovezhets1, Anastasiya V. Semenova2, Sergey S. Zainutdinov2, Antonina A. Grazhdantseva2, Galina V. Kochneva2

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28189 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia<br> <sup>2</sup> State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS, Novosibirsk, Russia
2 State Research Center of Virology and Biotechnology “Vector”, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Dr. Anton N. Chikaev, phone: +7 (913) 938-52-93, e-mail: chikaev@mcb.nsc.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28190 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16<sup>th</sup> day after tumor administration mice from the 1<sup>st</sup> group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2<sup>nd</sup> group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18<sup>th</sup> and 23<sup>rd</sup> day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18<sup>th</sup> and 23<sup>rd</sup> days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.</p> <p style="text-align: justify;">This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Despite common views that the early-stage prostate cancer is usually well treatable with surgery and hormonal therapy, the disorder remains risky, due to a tendency to develop into the chemo- and castration-resistant metastatic forms. Thus, development and testing of effective therapy for prostate cancer are urgent tasks of modern oncology. Hence, we proposed a combination therapy for prostate cancer based on the two powerful anticancer platforms: CAR-T and oncolytic virotherapy. The first component is T cells expressing chimeric antigen receptor which specifically directed towards the main prostate cancer antigen PSMA (aPSMA-CAR-T). Together with aPSMA-CAR-T, it is proposed to use a recombinant vaccinia virus strain L-IVP (VV-GMCSF-CXCL11) which have been modified to express GM-CSF and CXCL11 cytokines. This should result in efficient lysis of PC3/PSMA prostate cancer cells, as well as boost the tumor homing activity and cytotoxicity of the host immune cells and adoptively transferred aPSMA-CAR-T. This project aims to develop an in vivo model of therapy for prostate cancer and to explore the antitumor potential of aPSMA-CAR-T and VV-GMCSF-CXCL11 platforms separately or in combination.

Materials and methods

We used NOD/Scid mice for human prostate cancer xenograft model. The mice were subcutaneously injected with 2*10^6 PSMA-expressing PC3 cells (PSMA-PC3) and divided into 5 groups. At the 16th day after tumor administration mice from the 1st group received intratumoral injections of VV-GMCSF-CXCL11 at a dose of 10^7 PFU/mouse. Each mouse from the 2nd group was intravenously treated with 2*10^7 human aPSMA-CAR-T cells at the 18th and 23rd day after PSMA-PC3 engraftment. Third group received both virus and CAR-T: mice were intratumorally treated with 10^7 PFU/mouse of VV-GMCSF-CXCL11 at the day 16 followed by the two intravenous injections of 2*10^7 aPSMA-CAR-T at the 18th and 23rd days. Negative control groups were intratumorally injected with saline or intravenously treated with untransduced human T-cells.

Results

We have shown that the single dose of oncolytic VV-GMCSF-CXCL11 virus inhibit tumor growth up to 90% at the 15th day after treatment, whereas mice that received aPSMA CAR-T only or virus with aPSMA CAR-T didn’t control tumors. The probable reason was insufficient immunodeficiency of NOD/Scid mice, since even at the 7th day after second injection no human CAR-T cells were already presented in mice blood. Such rapid elimination of CAR-T may be due to the “host versus graft” reaction. Thus, we repeated the experiments using more immunocompromised NSG mouse model. We showed that CAR-T cells were able to persist and proliferate in NSG mice and, in contrast to NOD/Scid model, the highest antitumor activity was observed in aPSMA-CAR-T only group. However, mice that received combined therapy or virus only were not able to control tumors, which may be due to the spread of viral infection over the bodies of severely immunodeficient NSG mice. High concentration of viral particles in the blood of animals was confirmed by qPCR. The NSG model could be optimized by lowering the dose of VV-GMCSF-CXCL11.

Conclusion

Overall, it seems that both NOD/Scid and NSG-based mice models are not optimal translational models of combination therapy for prostate cancer. Apparently, it is necessary to use an immunocompetent mouse model with syngeneically transplanted PSMA+ tumors, as well as mouse CAR-T cells as a therapy.

This work was supported by the RFBR grant mk18-29-09044.

Keywords

Oncolytic virus, CAR-T, prostate cancer, PSMA.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28191 [VALUE] => GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-04. Development of the in vivo model of therapy for prostate cancer and assessment of antitumor activity of oncolytic viruses combined with CAR T-cell immunotherapy [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28192 [VALUE] => 2633 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2633 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28193 [VALUE] => 2634 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2634 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-04. Создание in vivo модели терапии рака простаты для исследования противоопухолевого потенциала онколитических вирусов в сочетании с CAR T-клеточной иммунотерапией

Загрузить версию в PDF

Антон Н. Чикаев1, Сергей В. Кулемзин1, Ольга Ю. Волкова1, Татьяна Н. Беловежец1, Анастасия В. Семенова2, Сергей С. Зайнутдинов2, Антонина А. Гражданцева2, Галина В. Кочнева2

1 Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, Новосибирск, Россия
2 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия

Несмотря на то, что рак простаты неплохо поддается хирургической и гормональной терапии на ранних стадиях, данное заболевание крайне опасно из-за склон- ности к метастазированию и развитию хеморезистетных форм. В связи с этим разработка и тестирование высокоэффективных средств терапии рака простаты являются актуальными задачами. Нами был предложен вариант комбинированной терапии, объединяющий два перспективных подхода к лечению опухолей: CAR-T-клеточную терапию и виротерапию онколитическими вирусами. Первым компонентом выступают T-лимфоциты, «вооруженные» химерным антигенным рецептором со специфичностью к основному антигену рака простаты PSMA (aPSMA-CAR-T). Совместно с aPSMA-CAR-T предлагается использовать рекомбинантный вирус осповакцины штамма Л-ИВП, в геном которого интегрированы гены секретируемых цитокинов GM-CSF и CXCL11 (VV-GMCSF-CXCL11). В дополнение к собственной онколитической активности вируса, данная комбинация трансгенов должна привлекать в очаг опухоли как клетки иммунной системы, так и экзогенно вводимые CAR-Т. Данная работа посвящена созданию in vivo модели для оценки противоопухолевого потенциала исследуемых aPSMA-CAR-T и VV-GMCSF-CXCL11 как в комбинации, так и в формате монотерапии.

Материалы и методы

Нами были получены ксенографты клеток аденокарциномы простаты человека РС3, экспрессирующих PSMA (PC3-PSMA), на мышах линии NOD/Scid. PC3-PSMA вводились животным подкожно в количестве 2*10^6 клеток/мышь. Первая группа животных получала монотерапию VV-GMSCF-CXCL11 на 16-е сутки в виде внутриопухолевых инъекций (10^7 БОЕ/мышь). Мышам из второй группы внутривенно вводили aPSMA-CAR Т-лимфоциты человека (2*10^6 клеток/мышь) на 18-е и 23-и сутки. Третья группа получала оба компонента терапии: однократную внутриопухолевую инъекцию VV-GMSCF-CXCL11 и два системных введения aPSMA-CAR-T в аналогичных концентрациях с теми же временными интервалами. Контрольным группам интратуморально вводили физраствор и внутривенно нетрансдуцированные Т-клетки.

Результаты

Было показано, что однократное введение вируса ингибирует рост опухоли на 90% на 15-е сутки после начала лечения. При этом инъекции PSMA-специфичных CAR-Т клеток человека не имели терапевтического успеха в этой модели ни моноформате, ни в комбинации с виротерапией. Причиной стал недостаточный уровень иммуносупрессии линии NOD/Scid: CAR-T-клетки элиминировались из организма мышей уже на 7-е сутки вследствие реакции «хозяин против трансплантата». Поэтому эксперимент был повторен на более иммунокомпрометированной мышиной линии NSG. Было показано, что в NSG мышах CAR-T способны к персистенции и пролиферации, и, в отличие от модели NOD/Scid, в данном случае наиболее эффективной оказалась монотерапия именно CAR-T-клетками. При монотерапии вирусом, как и при комбинированной терапии, эффективность существенно снижалась. Вероятно, это связано с генерализацией вирусной инфекции на фоне тяжелого иммунодефицита у NSG мышей (количественный ПЦР анализ показал наличие большого числа вирусных частиц в крови животных). Оптимизировать модель можно посредством корректировки дозы вируса, чтобы избежать его негативного воздействия на организм мышей.

Выводы

В целом следует признать, что оба предложенных варианта имеют существенные ограничения и не являются оптимальными трансляционными моделями комбинированной терапии рака простаты. По-видимому, целесообразно использовать иммунокомпетентную мышиную модель с сингенно трансплантированными PSMA+ опухолями, а в качестве терапии – CAR T-клетки мышей.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ мк18-29-09044.

Ключевые слова

Онколитический вирус, CAR-Т, рак простаты, PSMA.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28194
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов</p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28195 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28196 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;">В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;">По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6]. </p> <p style="text-align: justify;">С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.</p> <p style="text-align: justify;">Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).</p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, днРНК, глиобластома. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG.

Материалы и методы

В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Результаты

По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6].

С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.

Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).

Ключевые слова

CasRx, днРНК, глиобластома.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28197 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28198 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Anton S. Dome, Dmitry V. Semenov, Grigory A. Stepanov

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28199 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia


Correspondence:
Anton S. Dome, phone: +7 (953) 876-97-17, e-mail: domeanton@ya.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28200 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6]. </p> <p style="text-align: justify;">Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.</p> <p style="text-align: justify;">This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).</p> <h3>References</h3> <p style="text-align: justify;">1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.</p> <p style="text-align: justify;">2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.</p> <p style="text-align: justify;">3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.</p> <p style="text-align: justify;">4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.</p> <p style="text-align: justify;">5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.</p> <p style="text-align: justify;">6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">CasRx, lncRNA, glioblastoma.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

The development of genome editing methods and the discovery of the RfxCas13d endonuclease (CasRx) allow to target not only protein-coding genes but also non-coding RNAs. Regulators of the processes of transcription and translation, long noncoding RNAs (lncRNAs) become promising targets for gene therapy. Glioblastoma is one of the oncological diseases, which develop involving lncRNAs. An incomplete understanding of the pathogenesis of glioblastoma makes it difficult to develop an effective therapy. The study of pathogenesis is usually carried out on model cell lines. The models of glioblastoma are the cell lines U87MG, U251MG, U343MG.

Materials and methods

In this work, bioinformatic analysis of the transcriptomic data of the cell lines U87MG, U251MG, and U343MG was carried out in comparison with the lines WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Results

Based on the data of current analysis, three lncRNA have an increased level of expression in glioma lines compared to the group of control cell lines and were selected as potential targets. A high level of LINC00461 is observed in glioma cell lines [1] and in patients with multiple myeloma [2]. LINC01152 is localized mainly in the nucleus and is involved both in the regulation of gene transcription, in particular, IL-23 [3], and in post-transcriptional regulation, for example, by interacting with the 3’-UTR of MAML2 [4]. In glioblastoma, increased expression of LINC01152 promotes epithelial-mesenchymal transition (EMT) [5]. It is shown that LINC01272 also promotes EMT in gastric and colorectal cancer [6].

Using the CasRx system, we will get and characterize cell lines with knockdown of selected lncRNAs. This will allow a deeper study of the role of the selected targets in oncogenesis, as well as improve the strategy of finding and suppressing target genes for gene therapy of oncology.

This work was carried out with the support of the Russian Science Foundation (project No. 21-14-00195), as well as with partial support of the project of basic budgetary financing of the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (0245-2019-0001).

References

1. Yang Y. et al. LINC00461, a long non-coding RNA, is important for the proliferation and migration of glioma cells. Oncotarget. 2017; 8(48): 84123.

2. Deng M. et al. Exosome-transmitted LINC00461 promotes multiple myeloma cell proliferation and suppresses apoptosis by modulating microRNA/BCL-2 expression. Cytotherapy. 2019; 21(1): 96-106.

3. Chen T. et al. HBx-related long non-coding RNA 01152 promotes cell proliferation and survival by IL-23 in hepatocellular carcinoma. Biomedicine & Pharmacotherapy. 2019;115:108877.

4. Wu J. et al. LINC01152 upregulates MAML2 expression to modulate the progression of glioblastoma multiforme via Notch signaling pathway. Cell death & disease. 2021; 12(1):1-14.

5. Chang L. et al. LncRNA RP11-84E24. 3 drives tumorigenesis and epithelial-to-mesenchymal transition of glioma cells by promoting TFAP2C-mediated activation of SNAI1. J. Neuro-Oncol. 2021; 151(2): 157-171.

6. Leng X. et al. LINC01272 promotes migration and invasion of gastric cancer cells via EMT. OncoTargets and Therapy. 2020; 13:3401.

Keywords

CasRx, lncRNA, glioblastoma.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28201 [VALUE] => GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-05. Long non-coding RNAs as potential targets for genome editing and gene therapy [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28202 [VALUE] => 2635 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2635 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28203 [VALUE] => 2636 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2636 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-05. Длинные некодирующие РНК как потенциальные мишени для геномного редактирования и генной терапии

Загрузить версию в PDF

Антон С. Доме, Дмитрий В. Семенов, Григорий А. Степанов

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, Россия

Развитие технологии геномного редактирования и открытие эндонуклеазы RfxCas13d (CasRx) позволяет направлять системы геномного редактирования не только на белок-кодирующие гены, но и некодирующие РНК. Выступая регуляторами процессов транскрипции и трансляции, длинные некодирующие РНК (днРНК) становятся перспективными мишенями для генной терапии. Одним из примеров онкологического заболевания, в развитии которого принимают участие днРНК, является глиобластома. Неполное понимание патогенеза глиобластомы затрудняет разработку эффективной терапии. Изучение патогенеза принято проводить на модельных клеточных линиях. В числе клеточных моделей глиобластомы – линии U87MG, U251MG, U343MG.

Материалы и методы

В рамках данной работы был проведен биоинформатический анализ транскриптомных данных линий клеток U87MG, U251MG и U343MG в сравнении с линиями WI-38, HEK293FT, HEB, BEAS2B, IMR90.

Результаты

По результатам анализа были отобраны три потенциальные днРНК-мишени, имеющие повышенный уровень экспрессии в глиомных линиях по сравнению с группой контрольных линий клеток. Высокий уровень LINC00461 отмечается в клеточных линиях глиомы [1] и у пациентов с множественной миеломой [2]. LINC01152 локализуется преимущественно в ядре, участвует как в регуляции транскрипции генов, в частности, IL-23 [3], так и в посттранскрипционной регуляции, например, взаимодействуя с 3’-UTR MAML2 [4]. При глиобластоме повышенная экспрессия LINC01152 способствует эпителиально-мезенхимальному переходу (ЭМП) [5]. Показано, что LINC01272 также способствует ЭМП при раке желудка и колоректальном раке [6].

С использованием системы CasRx нами будут созданы и охарактеризованы клеточные линии с нокдауном выбранных днРНК. Это позволит глубже изучить роль выбранных мишеней в онкогенезе, а также усовершенствовать стратегию поиска и подавления генов-мишеней для генной терапии онкологических заболеваний.

Работа выполнена при поддержке гранта РНФ 21-14-00195, а также при частичной поддержке проекта базового бюджетного финансирования Минобрнауки РФ (0245-2019-0001).

Ключевые слова

CasRx, днРНК, глиобластома.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28214
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Тимофей Е. Карпов<sup>1</sup>, Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Алиса С. Постовалова1, Тимофей Е. Карпов1, Дарья Р. Ахметова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28215 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28216 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием <sup>177</sup>Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием <sup>177</sup>Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью<i> Image-Pro Plus</i>. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией <sup>177</sup>Lu-MPs и химиотерапией цисплатином. </p> <h3>Вывод</h3> <p style="text-align: justify;"> Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов <i>in vivo</i>, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении. </p> <h3>Благодарность</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких.

Материалы и методы

В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием 177Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием 177Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью Image-Pro Plus.

Результаты

Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией 177Lu-MPs и химиотерапией цисплатином.

Вывод

Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов in vivo, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28217 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28218 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Timofey E. Karpov<sup>1</sup>, Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Alisa S. Postovalova1, Timofey E. Karpov1, Darya R. Akhmetova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28219 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St.Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> ITMO University, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St.Petersburg, Russia
3 ITMO University, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Dr. Alisa S. Postovalova, phone: +7 (922) 155-83-02, e-mail: tiger.ru12@mail.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28220 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;">Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.</p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;">This study developed a potentially promising treatment with a combination of <sup>177</sup>Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of <i>Image-Pro Plus</i>.</p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;">Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with <sup>177</sup>Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.</p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;">According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during <i>in vivo</i> experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.</p> <h3>Acknowledgment</h3> <p style="text-align: justify;">The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.</p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;">Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Lung cancer is the most common malignant tumor, one of the most frequent causes of cancer-related deaths worldwide and the most common cause of death from oncological pathology. In fact, existing methods of treatment, such as сhemotherapy, radiotherapy and immunotherapy, still are able to evoke side effects in normal tissues when administered alone. That is why it is necessary to improve the effectiveness of lung cancer therapy by developing new approaches. Methods based on the combined use of several approaches of treatment have great potential. Radionuclide and chemotherapy can be considered the most promising methods of treating lung cancer. The aim of this project is to study effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy in lung cancer.

Materials and methods

This study developed a potentially promising treatment with a combination of 177Lu-MPs as polymeric micro-carrier radionuclide, and Cisplatin (a cytostatic for chemotherapy). Balb/c mice with lung metastases received this treatment followed by harvesting and examination of the mice lungs. In the course of experiments, effectiveness of treatment was evaluated by measuring mass of lung tissues and counting the number of metastatic pulmonary nodules in the H&E-stained images calculated by means of Image-Pro Plus.

Results

Histological analysis revealed that the number of metastatic foci in the lungs was significantly decreased. Thus, higher efficiency of the combined therapy was shown, as compared to local radiation therapy with 177Lu-MPs, or Cisplatin chemotherapy.

Conclusion

According to the results of the study, obtained data showed the effectiveness of combined radiotherapy and chemotherapy during in vivo experiments, thus requiring more detailed further studies in the area.

Acknowledgment

The study was performed with the support of the V. A. Almazov NMHC of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Lung cancer, nanobiotechnologies, nanoparticles, combined therapy, micro-carriers.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28221 [VALUE] => GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-07. Treatment of oncological diseases with micro-carriers using combined therapy [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28222 [VALUE] => 2639 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2639 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28223 [VALUE] => 2640 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2640 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-07. Лечение онкологических заболеваний микроносителями с использованием комбинированной терапии

Загрузить версию в PDF

Алиса С. Постовалова1, Тимофей Е. Карпов1, Дарья Р. Ахметова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

Рак легкого является наиболее распространенной злокачественной опухолью, одной из наиболее частых причин смертности от рака во всем мире и наиболее распространенной причиной смерти от онкологической патологии. Фактически, существующие и активно использующиеся методы лечения, такие как химиотерапия, лучевая терапия и иммунотерапия, все еще способны вызывать побочные эффекты в нормальных тканях организма при их самостоятельном применении. Именно поэтому необходимо повысить эффективность терапии рака легких путем разработки новых подходов. Методы, основанные на совместном использовании нескольких подходов к лечению, обладают большим потенциалом. Радионуклидная терапия и химиотерапия могут быть определены как одни из наиболее перспективных методов лечения рака легких. Целью данного проекта является изучение эффективности комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в отношении рака легких.

Материалы и методы

В этом исследовании было разработано потенциально перспективное лечение с использованием 177Lu-MPs в качестве полимерных микроносителей с участием 177Lu в качестве радионуклида и цисплатина (химиотерапевтического цитостатика) в комбинированной терапии. Мыши линии Balb/c с метастазами в легких получали лечение. После этого легкие мышей изымали и анализировали. В ходе работы эффективность лечения оценивалась путем измерения массы легочных тканей и подсчета количества метастатических легочных узелков на препаратах, окрашенных гематоксилин-эозиом, рассчитанных с помощью Image-Pro Plus.

Результаты

Гистологический анализ показал, что количество очагов метастазирования в легких значительно уменьшилось. Таким образом, была показана наибольшая эффективность комбинированной терапии по сравнению с индивидуальной лучевой терапией 177Lu-MPs и химиотерапией цисплатином.

Вывод

Согласно результатам исследования и полученным данным показана эффективность комбинированной лучевой терапии и химиотерапии в ходе экспериментов in vivo, что является причиной для проведения дальнейших исследований в этом направлении.

Благодарность

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Рак легкого, нанотехнологии, наночастицы, комбинированная терапия, микроносители.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28204
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов</p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28205 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28206 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> В настоящее время альфа-излучающий радионуклид <sup>225</sup>Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить <sup>225</sup>Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (<sup>221</sup>Fr и <sup>213</sup>Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO<sub>2</sub>), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl<sub>4</sub>), для удерживания <sup>225</sup>Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> Исследования <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO<sub>2</sub> наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (<sup>225</sup>Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO<sub>2</sub> наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку <sup>225</sup>Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения <sup>225</sup>Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010». </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

В настоящее время альфа-излучающий радионуклид 225Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить 225Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (221Fr и 213Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма.

Материалы и методы

В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO2), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C4H9O)4) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl4), для удерживания 225Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях.

Результаты

Исследования in vitro и in vivo на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO2 наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (225Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO2 наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку 225Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения 225Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек.

Выводы

Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28207 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28208 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Тimofey Е. Karpov, Mikhail V. Zyuzin, Аlexander S. Timin, Dmitry О. Antuganov, Аlbert R. Muslimov

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28209 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Granov Russian Research Center of Radiology & Surgical Technologies, Peter The Great St. Petersburg Polytechnic University, Saint-Petersburg, Russia


Correspondence:
Тimofey Е. Karpov, phone: +7 (921) 658-73-67, e-mail: timofius39@mail.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28210 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> The alpha emitting radionuclide <sup>225</sup>Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of <sup>225</sup>Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (<sup>221</sup>Fr and <sup>213</sup>Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO<sub>2</sub>) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C<sub>4</sub>H<sub>9</sub>O)<sub>4</sub>) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl<sub>4</sub>) to retain <sup>225</sup>Ac and its decomposition products in developed nanocarriers. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> <i>In vitro</i> and <i>in vivo</i> studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO<sub>2</sub> nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (<sup>225</sup>Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO<sub>2</sub> nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a <sup>225</sup>Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% <sup>225</sup>Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys. </p> <h3>Conclusion</h3> <p style="text-align: justify;"> These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold. </p> <br> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

The alpha emitting radionuclide 225Ac is currently one of the most promising isotopes in alpha therapy due to its high linear energy transfer during four consecutive alpha decays. However, the main obstacle preventing the full implementation of 225Ac in clinical practice is the lack of stable retention of daughter radioactive isotopes (221Fr and 213Bi), which leads to their free circulation in the body and the destruction of healthy cells in the body.

Materials and methods

In this work, the surface of silica nanoparticles (SiO2) obtained by the sol-gel method was modified with metal shells consisting of nanostructures of titanium butoxide (Ti(C4H9O)4) and hydrogen tetrachloroaurate (HAuCl4) to retain 225Ac and its decomposition products in developed nanocarriers.

Results

In vitro and in vivo studies in healthy mice show that a metal shell applied to the surface of SiO2 nanoparticles contributes to enhanced inhibition of the release of radionuclides (225Ac and its daughter isotopes) compared to unmodified SiO2 nanoparticles for a long period of time. Unmodified titanium/gold-coated silicon nanoparticles exhibited a 225Ac leakage of 20±3% in the first 5 days and 60%-70% after 15-30 days of incubation. In contrast, only 0.3% and 2.6% 225Ac release was found in the case of titanium and gold coated nanoparticles during 30 days of incubation. Histological analysis has shown that the developed nanocarriers do not have a significant toxic effect on the organ systems of laboratory mice within 3-10 days after injections. At the same time, practically no accumulation of released radionuclides was found in non-target organs (for example, in the kidneys). In contrast, unmodified carriers demonstrated the release of free radionuclides, which were distributed throughout the animal’s body with subsequent morphological changes in the tissues of the lungs, liver and kidneys.

Conclusion

These results highlight the potential of the developed nanocarriers for use as radionuclide delivery systems and propose a technology for the manufacture of new nanotherapeutic agents. This work was supported by the project of the Russian Science Foundation “19-75-10010”.

Keywords

Radiotherapy, nanoparticles, radionuclides, alpha radiation, silica, titanium, gold.


[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28211 [VALUE] => GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-06. Modification of silicon oxide nanocarriers with metal shells for capturing 225AC and its daughter isotopes [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28212 [VALUE] => 2637 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2637 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28213 [VALUE] => 2638 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2638 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-06. Модификация наноносителей оксида кремния металлическими оболочками с целью удержания 225AC и его дочерних изотопов

Загрузить версию в PDF

Тимофей Е. Карпов, Михаил В. Зюзин, Александр С. Тимин, Дмитрий О. Антуганов, Альберт Р. Муслимов

«Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А. М. Гранова», Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия

В настоящее время альфа-излучающий радионуклид 225Ac является одним из наиболее многообещающих изотопов в альфа-терапии из-за его высокой линейной передачи энергии во время четырех последовательных альфа-распадов. Однако основным препятствием, мешающим полноценно внедрить 225Ac в клиническую практику, является отсутствие стабильного удержания дочерних радиоактивных изотопов (221Fr и 213Bi), что приводит к их свободной циркуляции в организме и разрушению здоровых клеток организма.

Материалы и методы

В данной работе поверхность наночастиц кремнезема (SiO2), полученных с помощью золь-гель метода, была модифицирована металлическими оболочками, состоящими из наноструктур бутоксида титана (Ti(C4H9O)4) и тетрахлоаурата водорода (HAuCl4), для удерживания 225Ac и продуктов его распада в разработанных наноносителях.

Результаты

Исследования in vitro и in vivo на здоровых мышах показали, что металлическое оболочка, нанесенная на поверхность SiO2 наночастиц, способствует удержанию радионуклидов (225Ac и его дочерних изотопов) по сравнению с немодифицированными SiO2 наночастицами в течение длительного периода времени. Немодифицированные титановой/золотой оболочками наночастицы кремния, продемонстрировали утечку 225Ac 20±3% в первые 5 дней и 60%-70% после 15-30 дней инкубации. Напротив, только 0,3% и 2,6% высвобождения 225Ac было обнаружено в случае наночастиц, покрытых титановой и золотой оболочками в течение 30 дней инкубации. Гистологический анализ продемонстрировал, что в течение 3-10 дней после инъекций разработанные наноносители не оказывают значимого токсического действия на системы органов лабораторных мышей. В то же время практически не было обнаружено скопление высвободившихся радионуклидов в нецелевых органах (например, в почках). Напротив, немодифицированные носители продемонстрировали высвобождение свободных радионуклидов, которые распределялись по всему телу животного с последующими морфологическими изменениями в тканях легких, печени и почек.

Выводы

Эти результаты подчеркивают потенциал разработанных наноносителей для использования в качестве систем доставки радионуклидов и предлагают технологию изготовления новых нанотерапевтических агентов. Работа выполнена при поддержке проекта Российского Научного Фонда «19-75-10010».

Ключевые слова

Радиотерапия, наночастицы, радионуклиды, альфа-излучение, силика, титан, золото.

Генная и клеточная терапия: GC-01 – GC-15

						Array
(
    [KEYWORDS] => Array
        (
            [ID] => 19
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:46:01
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Ключевые слова
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => KEYWORDS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 19
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 4
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => Y
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => Y
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Ключевые слова
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [SUBMITTED] => Array
        (
            [ID] => 20
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата подачи
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => SUBMITTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 20
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата подачи
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [ACCEPTED] => Array
        (
            [ID] => 21
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата принятия
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => ACCEPTED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 21
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата принятия
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [PUBLISHED] => Array
        (
            [ID] => 22
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 17:21:42
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Дата публикации
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => PUBLISHED
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 22
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => DateTime
            [USER_TYPE_SETTINGS] => 
            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Дата публикации
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [CONTACT] => Array
        (
            [ID] => 23
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 14:43:05
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Контакт
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => CONTACT
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 23
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Контакт
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHORS] => Array
        (
            [ID] => 24
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:45:07
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHORS
            [DEFAULT_VALUE] => 
            [PROPERTY_TYPE] => E
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => Y
            [XML_ID] => 24
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 3
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => Y
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => EAutocomplete
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [VIEW] => E
                    [SHOW_ADD] => Y
                    [MAX_WIDTH] => 0
                    [MIN_HEIGHT] => 24
                    [MAX_HEIGHT] => 1000
                    [BAN_SYM] => ,;
                    [REP_SYM] =>  
                    [OTHER_REP_SYM] => 
                    [IBLOCK_MESS] => N
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 
            [VALUE] => 
            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => 
            [~DESCRIPTION] => 
            [~NAME] => Авторы
            [~DEFAULT_VALUE] => 
        )

    [AUTHOR_RU] => Array
        (
            [ID] => 25
            [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20
            [IBLOCK_ID] => 2
            [NAME] => Авторы
            [ACTIVE] => Y
            [SORT] => 500
            [CODE] => AUTHOR_RU
            [DEFAULT_VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 
                    [TYPE] => HTML
                )

            [PROPERTY_TYPE] => S
            [ROW_COUNT] => 1
            [COL_COUNT] => 30
            [LIST_TYPE] => L
            [MULTIPLE] => N
            [XML_ID] => 25
            [FILE_TYPE] => 
            [MULTIPLE_CNT] => 5
            [TMP_ID] => 
            [LINK_IBLOCK_ID] => 0
            [WITH_DESCRIPTION] => N
            [SEARCHABLE] => N
            [FILTRABLE] => N
            [IS_REQUIRED] => N
            [VERSION] => 1
            [USER_TYPE] => HTML
            [USER_TYPE_SETTINGS] => Array
                (
                    [height] => 200
                )

            [HINT] => 
            [PROPERTY_VALUE_ID] => 28154
            [VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => <p>Дарья Р. Ахметова<sup>1</sup>, Тимофей Е. Карпов<sup>1</sup>, Алиса С. Постовалова<sup>1</sup>, Альберт Р. Муслимов<sup>2</sup>, Александр С. Тимин<sup>1</sup>, Михаил В. Зюзин<sup>3</sup></p>
                    [TYPE] => HTML
                )

            [DESCRIPTION] => 
            [VALUE_ENUM] => 
            [VALUE_XML_ID] => 
            [VALUE_SORT] => 
            [~VALUE] => Array
                (
                    [TEXT] => 

Дарья Р. Ахметова1, Тимофей Е. Карпов1, Алиса С. Постовалова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Авторы [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_RU] => Array ( [ID] => 26 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Организации [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 26 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28155 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>2</sup> Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия<br> <sup>3</sup> Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Организации [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_RU] => Array ( [ID] => 27 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:01:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Описание/Резюме [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 27 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28156 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Материалы и методы</h3> <p style="text-align: justify;"> В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO<sub>3</sub> для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO<sub>2</sub> с металлической оболочкой TiO<sub>2</sub> в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования. </p> <h3>Результаты</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств. </p> <h3>Выводы</h3> <p style="text-align: justify;"> По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения <i>in vitro</i> и <i>in vivo</i> визуализации. </p> <h3>Благодарности</h3> <p style="text-align: justify;"> Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России. </p> <h2>Ключевые слова</h2> <p style="text-align: justify;"> Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация. </p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для in vitro и in vivo визуализации.

Материалы и методы

В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO3 для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO2 с металлической оболочкой TiO2 в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования.

Результаты

По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств.

Выводы

По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения in vitro и in vivo визуализации.

Благодарности

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация.

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Описание/Резюме [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [DOI] => Array ( [ID] => 28 [TIMESTAMP_X] => 2016-04-06 14:11:12 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => DOI [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => DOI [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 28 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28157 [VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 10.18620/ctt-1866-8836-2021-10-3-1-148 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => DOI [~DEFAULT_VALUE] => ) [AUTHOR_EN] => Array ( [ID] => 37 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Author [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => AUTHOR_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 37 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28158 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p>Darya R. Akhmetova<sup>1</sup>, Timofey E. Karpov<sup>1</sup>, Alisa S. Postovalova<sup>1</sup>, Albert R. Muslimov<sup>2</sup>, Alexander S. Timin<sup>1</sup>, Mikhail V. Zyuzin<sup>3</sup></p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Darya R. Akhmetova1, Timofey E. Karpov1, Alisa S. Postovalova1, Albert R. Muslimov2, Alexander S. Timin1, Mikhail V. Zyuzin3

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Author [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [ORGANIZATION_EN] => Array ( [ID] => 38 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Organization [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => ORGANIZATION_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 38 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28159 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p><sup>1</sup> Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>2</sup> Pavlov University, St. Petersburg, Russia<br> <sup>3</sup> St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia</p><br> <p><b>Correspondence:</b><br> Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru</p> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

1 Peter the Great St. Petersburg Polytechnic University, St. Petersburg, Russia
2 Pavlov University, St. Petersburg, Russia
3 St. Petersburg National Research University of Information Technologies, Mechanics and Optics, St. Petersburg, Russia


Correspondence:
Darya R. Akhmetova, phone: +7 (912) 691-35-90, e-mail: ahmetova.darya1999@yandex.ru

[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Organization [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [SUMMARY_EN] => Array ( [ID] => 39 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-02 18:02:59 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Description / Summary [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => SUMMARY_EN [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 39 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28160 [VALUE] => Array ( [TEXT] => <p style="text-align: justify;"> Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for <i>in vitro</i> and <i>in vivo</i> visualization. </p> <h3>Materials and methods</h3> <p style="text-align: justify;"> Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO<sub>3</sub> cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO<sub>2</sub> cores with a TiO<sub>2</sub> metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies. </p> <h3>Results</h3> <p style="text-align: justify;"> According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties. </p> <h3>Conclusions</h3> <p style="text-align: justify;"> According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for <i>in vitro</i> and <i>i</i><i>n vivo</i> visualization were obtained and experimentally tested. </p> <h3>Acknowledgments</h3> <p style="text-align: justify;"> The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation. </p> <h2>Keywords</h2> <p style="text-align: justify;"> Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization. </p> <br> [TYPE] => HTML ) [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => Array ( [TEXT] =>

Nanoparticles have many advantages when used for various types of imaging. This type of drug carriers offers a wide range of material choices and are easily subject to various types of surface modifications. That is why there is currently a great deal of interest in this area and many organic and inorganic nanosystems have been developed that provide imaging signal, directionality and correction of the pharmacokinetics of particles. Despite a wide range of studies on combinations of various types of nanoparticles with fluorescent dyes and their widespread use in many types of research, the need of using new technologies and the appearance of particles that are more complex in their structure impose limitations on the already developed working protocols. Purpose of this project is to develop methods for modifying nano- and microcarriers with fluorescent dyes for in vitro and in vivo visualization.

Materials and methods

Particles of micron and submicron sizes were investigated in this work. To obtain studied carriers, CaCO3 cores were used for polymer microparticles with a Polyarginine/Dextran sulfate shell and SiO2 cores with a TiO2 metal shell as nanoparticles were used as a matrix of the multilayer structure. The modification was performed by the method of layer-by-layer deposition of polyelectrolytes; the adsorption of the layers was proved by measuring the change in ζ-potentials. To optimize fluorescence imaging techniques, the optical properties of Cyanine5, Cyanine7, and Rhodamine 800 dyes were investigated. To modify particles with fluorescent agents, these dyes were incorporated into the structure of carriers at the stage of matrix formation of nano- and microparticles. The efficiency of the developed protocols for labeling carriers with fluorescent agents was tested using confocal scanning laser microscopy (CLSM) and bioluminescence studies.

Results

According to the results of the analysis by the СSLM methods and bioluminescence studies, it was proved that the developed protocols for fluorescent labeling of nano- and microcarriers demonstrated their effectiveness in preventing the release of the fluorescent label from the structure of the carriers. Experimental data have shown that the Cyanine5 fluorescent label is the most effective due to its high radiation intensity and long-term retention of fluorescent properties.

Conclusions

According to the results of the study, methods for modifying nano- and imicroparticles with fluorescent agents for in vitro and in vivo visualization were obtained and experimentally tested.

Acknowledgments

The work was done with the support of the Federal State Budgetary Institution “V. A. Almazov National Medical Research Center” of the Ministry of Health of the Russian Federation.

Keywords

Nanobiotechnologies, polymeric microparticles, silica nanoparticles, modification, fluorescent visualization.


[TYPE] => HTML ) [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Description / Summary [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [NAME_EN] => Array ( [ID] => 40 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-03 10:49:47 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Name [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 80 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 40 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => Y [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28161 [VALUE] => GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => GC-01. Development of methods for modifying nano- and microcarriers for in vitro and in vivo imaging [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Name [~DEFAULT_VALUE] => ) [FULL_TEXT_RU] => Array ( [ID] => 42 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-07 20:29:18 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Полный текст [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => FULL_TEXT_RU [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 42 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 200 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Полный текст [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TEXT] => [TYPE] => HTML ) ) [PDF_RU] => Array ( [ID] => 43 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF RUS [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_RU [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 43 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28162 [VALUE] => 2624 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2624 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF RUS [~DEFAULT_VALUE] => ) [PDF_EN] => Array ( [ID] => 44 [TIMESTAMP_X] => 2015-09-09 16:05:20 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => PDF ENG [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => PDF_EN [DEFAULT_VALUE] => [PROPERTY_TYPE] => F [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 44 [FILE_TYPE] => doc, txt, rtf, pdf [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => [USER_TYPE_SETTINGS] => [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => 28163 [VALUE] => 2625 [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => 2625 [~DESCRIPTION] => [~NAME] => PDF ENG [~DEFAULT_VALUE] => ) [NAME_LONG] => Array ( [ID] => 45 [TIMESTAMP_X] => 2023-04-13 00:55:00 [IBLOCK_ID] => 2 [NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [ACTIVE] => Y [SORT] => 500 [CODE] => NAME_LONG [DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) [PROPERTY_TYPE] => S [ROW_COUNT] => 1 [COL_COUNT] => 30 [LIST_TYPE] => L [MULTIPLE] => N [XML_ID] => 45 [FILE_TYPE] => [MULTIPLE_CNT] => 5 [TMP_ID] => [LINK_IBLOCK_ID] => 0 [WITH_DESCRIPTION] => N [SEARCHABLE] => N [FILTRABLE] => N [IS_REQUIRED] => N [VERSION] => 1 [USER_TYPE] => HTML [USER_TYPE_SETTINGS] => Array ( [height] => 80 ) [HINT] => [PROPERTY_VALUE_ID] => [VALUE] => [DESCRIPTION] => [VALUE_ENUM] => [VALUE_XML_ID] => [VALUE_SORT] => [~VALUE] => [~DESCRIPTION] => [~NAME] => Название (для очень длинных заголовков) [~DEFAULT_VALUE] => Array ( [TYPE] => HTML [TEXT] => ) ) )
GC-01. Разработка методов модификации нано- и микроносителей для in vitro и in vivo визуализации

Загрузить версию в PDF

Дарья Р. Ахметова1, Тимофей Е. Карпов1, Алиса С. Постовалова1, Альберт Р. Муслимов2, Александр С. Тимин1, Михаил В. Зюзин3

1 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
2 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия
3 Национальный исследовательский университет ИТМО, Санкт-Петербург, Россия

Наночастицы имеют множество преимуществ при их использовании для различных видов визуализации. Данные носителей лекарственных препаратов предполагают широкий спектр возможностей при выборе материалов и легко подвергаются различным видам поверхностных модификаций. Именно поэтому в настоящее время существует большой интерес к данной сфере и разработано множество органических и неорганических наносистем, которые обеспечивают сигнал визуализации, направленность и корректировку фармакокинетики частиц. Несмотря на широкий спектр исследований сочетаний различных видов наночастиц с флуоресцентными красителями и их широкое использование во многих видах исследований, необходимость использования новых технологий и появление усложненных по своей структуре частиц ставит ограничения уже отработанным рабочим протоколам. Целью данного проекта является разработка методов модификации нано- и микроносителей флуоресцентными красителями для in vitro и in vivo визуализации.

Материалы и методы

В работе были исследованы частицы микронных и субмикронных размеров, в качестве матрицы многослойной структуры которых были использованы ядра CaCO3 для полимерных микрочастиц с оболочкой Polyarginine/Dextran sulfate и ядра SiO2 с металлической оболочкой TiO2 в качестве наночастиц. Модификация была произведена методом послойного нанесения полиэлектролитов, адсорбция слоев была доказана измерением изменения ζ-потенциалов. Для оптимизации методик флуоресцентной визуализации были исследованы оптические свойства красителей Cyanine5, Cyanine7 и Rhodamine 800. Для модификации частиц флуоресцентными агентами данные красители были включены в структуру носителей на этапе образования матрицы нано- и микрочастиц. Эффективность разработанных протоколов для мечения носителей флуоресцентными агентами была проверена с помощью методов конфокальной сканирующей лазерной микроскопии (КСЛМ) и биолюминографического исследования.

Результаты

По результатам анализа методами КСЛМ и биолюминографического исследования было доказано, что разработанные протоколы флуоресцентного мечения нано- и микроносителей продемонстрировали свою эффективность для предотвращения высвобождения флуоресцентной метке из структуры носителей. Экспериментальные данные показали, что флуоресцентная метка Cyanine5 является наиболее эффективной благодаря высокой интенсивности излучения и длительности сохранения флуоресцентных свойств.

Выводы

По результатам исследования были получены и экспериментально апробированы методы модификации нано- и микрочастиц флуоресцентными агентами для проведения in vitro и in vivo визуализации.

Благодарности

Работа выполнена при поддержке ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России.

Ключевые слова

Нанобиотехнологии, полимерные микрочастицы, наночастицы диоксида кремния, модификация, флуоресцентная визуализация.