ISSN 1866-8836
Клеточная терапия и трансплантация

Лизат тромбоцитов для ускоренного размножения мезенхимных стромальных клеток человека

Ланге К., Чакироглу Ф., Шписс А., Каппалло-Оберманн Х., Цандер А. Р.

doi 10.3205/ctt-2008-en-000016.01
Отправлено 17 Октября 2008
Одобрено 07 Ноября 2008
Опубликовано 01 Декабря 2008

Резюме

Мезенхимные стромальные клетки (МСК) из костного мозга человека являются перспективными кандидатами для новых способов лечения в трансплантационной и регенеративной медицине. Однако большинство протоколов культивирования включают фетальную телячью сыворотку (ФТС) в качестве источника факторов роста, которая является потенциальным источником чужеродных патогенов. Недавно было показано, что лизаты тромбоцитов (ЛТ) являются безопасной заменой животной сыворотки для размножения МСК, но образующиеся МСК слабо охарактеризованы. ЛТ содержит основные факторы роста, активно секретируемые тромбоцитами: PDGF-αα, -ββ, -αβ, TGF-β1 и -β2, VEGF и EGF. Мы создали легко воспроизводимый протокол для культуры МСК с добавлением ЛТ из концентратов тромбоцитов человека. Как КОЕ-Ф, так и общее число клеток существенно возрастали, по сравнению со стандартной средой, содержащей ФТС. Образующиеся клетки соответствуют всем критериям для МСК, таким, как: прилипание к пластику, веретенообразная форма, экспрессия поверхностных маркеров, отсутствие гемопоэтических маркеров и способность к дифференцировке в три ростка мезенхимных клеток. МСК человека, размноженные с ЛТ, проявляли благоприятные иммунологические свойства в культуре. Мы проверяли иммуномодулирующие свойства МСК, размноженных с ЛТ, в смешанной лимфоцитарной реакции, проводимой с мононуклеарамии крови человека, использованными как эффекторы или облученные стимуляторы в соотношении 1:1:1. При добавлении МСК к смешанной культуре отмечалось эффективное подавление Т-клеточная пролиферации (Р=0,000004), при среднем  уровне подавления 84,8±9,7%. Этот результат подтверждается дифференциальной экспрессией генов, показывающей снижение MHC II в МСК. Кроме того, профили генной экспрессии показали активацию генов клеточного цикла и репликации ДНК, наряду с подавлением генов, связанных с развитием, дифференцировкой, адипогенезом. Таким образом, ЛТ является безопасным компонентом сред для ускоренного и безопасного размножения МСК.

Ключевые слова

мезенхимные стромальные клетки, лизат тромбоцитов, факторы роста, экспрессия генов


Том 1, Номер 2
01.12.2008

Загрузить версию в PDF

doi 10.3205/ctt-2008-en-000016.01
Отправлено 17 Октября 2008
Одобрено 07 Ноября 2008
Опубликовано 01 Декабря 2008

Возврат к списку